[发明专利]运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌的方法无效
| 申请号： | 200410072852.8 | 申请日： | 2004-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN1635156A | 公开（公告）日： | 2005-07-06 |
| 发明（设计）人： | 高旗利;黄熙泰;罗茂凰;刘寅;张霞;郑泽军 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国天津出入境检验检疫局;南开大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 天津市学苑有限责任专利代理事务所 | 代理人： | 解松凡 |
| 地址： | 300456天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的方法，属于细菌检验技术。其技术方案是利用坂崎肠杆菌种特异性DNA序列，设计特异性寡核苷酸引物和探针，分别应用外切酶探针荧光PCR和荧光染料嵌合PCR技术直接从样本中扩增细菌靶基因。本发明包括设计的坂崎肠杆菌种特异性6条寡核苷酸序列，作为对照的两条报告质粒扩增序列，以及与之配套的荧光PCR反应条件。本发明解决了从食品和临床样本中检测坂崎肠杆菌的标准方法，其有益效果是：省略了细菌的反复培养，不需电泳观察，从而节约时间；此外，此法灵敏度更高，检测速度更快，可进行定量分析。 | ||
| 搜索关键词： | 运用 荧光 pcr 技术 检测 坂崎肠 杆菌 方法 | ||
【主权项】：
1.运用荧光PCR技术检测坂崎肠杆菌的方法，其特征在于，荧光PCR技术之一是通过外切酶探针PCR反应所发出的荧光信号检测坂崎肠杆菌的方法(简称探针法)，其使用的引物、探针序列及报告质粒扩增序列如下：引物：探针法引物序列1：CCGGAACAAGCTGAAAATTCT探针法引物序列2：GTCTTCGTGCTGCGATTAC探针：探针法探针序列1：ACTCTGACACCGCGCATTCCTG探针法探针序列2：CCTTTGGCGTTTCCCGATGTCCGT探针法报告质粒扩增序列：GGAGGGATTGCAGCGTGTTTTTAATGAGGTCATCACGGGATCCCATGTGCGTGACGGACATCGGGAAACGCCAAAGGAGATT
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