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[发明专利]中国仓鼠卵巢细胞中内源性逆转录病毒的表征及灭活-CN201980092783.1在审
发明人： P-O·迪鲁瓦;S·博斯哈德;P·勒玛斯亚;E·施密德-西格特;N·梅尔莫 -专利权人：思兰克斯有限公司
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：嵌入中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的C型内源性逆转录病毒(ERV)被改变以改变培养上清液中逆转录病毒颗粒和/或逆转录病毒样颗粒的释放。尽管缺少这些颗粒的传染性证据，但它们的存在已经引发了安全问题。鉴定出聚集在功能性保守组内的173个C型ERV序列。鉴定出来自一个C型ERV组的转录物为具有完整的开放阅读框的全长转录物，并且具有装载到逆转录病毒样颗粒中的相应病毒RNA基因组。此外，对来自病毒颗粒的基因RNA的序列分析表明，它们可能是由少数表达的ERV序列导致的。本文公开了使用CRISPR‑Cas9基因组编辑对表达的ERV组的gag基因进行破坏/改变。对在DNA和mRNA水平上CRISPR衍生的突变进行比较，从而确定了负责从CHO细胞中释放病毒RNA负载颗粒的单个ERV基因座。在这个特定ERV基因座带有Gag功能缺失突变的克隆显示细胞上清液中含病毒RNA的颗粒减少了超过250倍。值得注意的是，ERV的诱变没有损害细胞生长、细胞大小或重组蛋白的产生。本文提供了一种新的策略和细胞，特别是工程化CHO细胞，以减轻生物制药过程中来自CHO内源性逆转录病毒的潜在污染。
中国仓鼠卵巢细胞内源逆转录病毒表征

[发明专利]用于蛋白生产的改进的真核细胞及其制备方法-CN201680075813.4在审
发明人： N·梅尔莫德;P-O·迪鲁瓦;S·博斯哈德;P·勒玛斯亚 -专利权人：思兰克斯有限公司
申请日： 2016-12-23 - 公布日： 2018-08-31 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：公开了具有降低的过去病毒/逆转录病毒感染的残留物负载的哺乳动物细胞和哺乳动物细胞系、及其生产和使用方法。
哺乳动物细胞系逆转录病毒感染哺乳动物细胞蛋白生产真核细胞制备病毒改进生产

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