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[发明专利]一种细胞培养用GF微载体及其制备方法-CN201310211566.4有效
发明人：冯玉萍;马忠仁;李明生;田伟;马桂兰;暴艳敏 -专利权人：冯玉萍
申请日： 2013-05-30 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明提供一种细胞培养用微载体，其制备方法如下：1）配制变性胶原或明胶溶胀液；2）油乳液制球：将无毒高密度油与异辛醇混合，搅拌制成油乳液，将胶液倒入油乳液中，形成微球；3）交联固定；4）凝固；5）除油；6）还原脱色：用B还原剂还原脱色，并中和多余的戊二醛；7）脱脂脱水：用梯度酒精脱脂脱水,完成制备。本发明的微载体具有下述优点：基质浓度高、无毒性、透明度和生物相容性好、可以采用高压灭菌、使用前不需对细胞培养容器预先硅化、工艺简单、使用方便、价格低廉，在搅拌状态下悬浮培养，细胞不容易脱落，适合于多种贴壁细胞的大规模微载体悬浮培养。
一种细胞培养 gf 载体及其制备方法

[实用新型]双侧臂细胞悬浮培养瓶-CN201220235019.0有效
发明人： 马忠仁;丁建一 -专利权人：兰州百灵塑料制品有限公司
申请日： 2012-05-23 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C12M3/02 文献下载
摘要：一种双侧臂细胞悬浮培养瓶，属于生物培养容器。本实用新型是瓶体内壁上设有凸起棱。瓶体内的底面上也设有凸起棱，侧盖是一个整体或者侧盖是由侧部和顶部活动平板组成。本实用新型的优点是成本低；用聚碳酸酯制成不易破碎；由于瓶体内壁和底面设有凸起棱，使得搅拌时易产生涡流，混合均匀；侧盖上设有孔座方便液体抽出与放入。
双侧臂细胞悬浮培养

[发明专利]一种钢样夹持磨制装置及方法-CN201010282823.X有效
发明人： 马忠仁;梁祥远;李丹;吴长宽 -专利权人：鞍钢股份有限公司
申请日： 2010-09-16 - 公布日： 2012-04-04 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明提供一种钢样夹持磨制装置及方法，支撑板通过转轴活动连接在磨样机平台上，转轴上端设有斜面碰头，装有夹具的翻转杆下端铰接在支撑板上。上翻时翻转杆上夹具与碰头相撞，滑杆伸出将待磨钢样放至夹头“凹槽”内；松开翻转杆，滑杆在压簧作用下使夹头夹紧钢样；翻转杆下翻，钢样打磨面与砂纸贴合，且钢样被进一步锁紧；将钢样研磨至符合标准后，翻转杆上翻松开夹头，取下钢样送检。本发明投资少、见效快，可自行制作，结构简单，便于操作，夹持牢固，不仅显著提高钢样夹持磨制速度，减轻工人的劳动强度，提高作业率；而且可降低砂纸消耗，消除钢样脱落伤人的问题，提高钢样成分分析的准确性。
一种夹持磨制装置方法

[实用新型]聚碳酸酯生物反应器-CN201120284960.7有效
发明人： 马忠仁;丁建一;者沐霖;丁晓 -专利权人：兰州百灵塑料制品有限公司
申请日： 2011-08-07 - 公布日： 2012-03-14 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：一种聚碳酸酯生物反应器，属于生物反应装置。本实用新型是在罐体外设有外套，在外套上设有进水口和出水口，进水口和出水口与罐体与外套之间的夹层连通。本实用新型的优点是由于罐体与外套之间设有夹层，通过对夹层中水温的调节，能够进行保温或者冷却，罐体与罐盖用螺纹连接，使得连接可靠，不易脱落，不易泄漏，由于采用聚碳酸酯塑料制成，提高了刚性和韧性指标。
聚碳酸酯生物反应器

[发明专利]一种铸补渣罐及铸补方法-CN201010209267.3有效
发明人：梁祥远;李丹;齐志宇;袁兴文;姚刚;王成青;马忠仁 -专利权人：鞍钢股份有限公司
申请日： 2010-06-25 - 公布日： 2011-12-28 - 主分类号： B22D19/10 文献下载
摘要：本发明提供一种铸补渣罐及铸补方法，渣罐罐底修补部位采用梯形缺口、补丁吻合及钢筋焊接，缺口内预设连接件强化，下部采取保护板贴护，上面进行铁水浇铸以及耐火泥缝隙充填等一系列铸补措施，使补丁牢固地固定在罐底缺口内，破损报废的渣罐得以重新使用。经修复的渣罐强度高，翻罐处理时耐撞击性能好，盛装液态钢渣密封严实，安全性高，可减少渣罐的粘罐率，提高渣罐处理的返空率，渣罐使用周期提高半年以上，极大降低渣罐的备件储备和冶炼成本，为炼钢生产的顺行奠定基础。其操作简单，方便易行，可就地取材，自行修补，无需更多投资就能立见成效，具有极高的推广使用价值。
一种铸补渣罐方法

[发明专利]BHK-21细胞无血清悬浮培养技术在口蹄疫疫苗生产中的应用-CN201110066205.6有效
发明人：乔自林;令世鑫;李明生;冯若飞;柏家林;沈武玲;王家敏;马桂兰;徐水林;冯玉萍;马忠仁 -专利权人： 马忠仁;乔自林;令世鑫;李明生;冯若飞;冯玉萍
申请日： 2011-03-18 - 公布日： 2011-09-14 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明公开了一种BHK-21细胞无血清悬浮培养技术在口蹄疫疫苗生产中的应用，包括有以下步骤：1）细胞复苏；2）反应器培养及细胞放大培养；3）接种口蹄疫病毒种毒液及毒液收获。本发明的有益效果为：本发明提供的无血清悬浮培养BHK-21细胞生产口蹄疫灭活疫苗的工艺及细胞逐级放大的方法，使口蹄疫疫苗生产的周期缩短，产量增加，质量稳定，效益显著。本发明提供的生产工艺降低了培养基的使用量，收获的病毒液的量就是消耗的培养基量，而转瓶生产工艺消耗的培养基的量是收获病毒液的2倍以上，且需要培养基量约5%的牛血清。
bhk 21 细胞血清悬浮培养技术口蹄疫疫苗生产中的应用

[发明专利]一种提取糜胰蛋白酶的方法-CN201110024936.4无效
发明人： 马忠仁;印明善;冯玉萍;李明生;蔡翠萍;乔自林;冯若飞;阮小华 -专利权人： 马忠仁;印明善
申请日： 2011-01-20 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：本发明涉及生物工程领域，更具体地说涉及一种提取糜胰蛋白酶的方法。本发明采用CaCl2激活糜胰蛋白酶原成为糜胰蛋白酶的同时加入饱和度的(NH4)2SO4，使其生成CaSO4沉淀吸附糜胰蛋白酶，不需要先采用盐析多重结晶结合透析和乙醇及丙酮等的有机溶剂法制备成糜胰蛋白酶粗制品，再通过CM-纤维素柱层析和亲和层析等复杂步骤，进行纯化制备，而直接经过洗脱，盐析、超滤和冻干步骤即可获得白色的冻干粉末。本发明提取方法简便可行，适于工业化生产，这样既节省了成本又缩短了时间，由原来约需7～8天时间缩短到3～4天。每公斤胰脏可获得冻干糜胰蛋白酶粉4.0～4.5克，其中糜蛋白酶的比活力为360U./mg蛋白(氮)，胰蛋白酶的比活力为1380U./mg蛋白(氮)。
一种提取胰蛋白酶方法

[实用新型]检测脑心肌炎病毒抗体的酶联免疫试剂盒-CN201120040748.6无效
发明人：冯若飞;樊得英;马忠仁;李明生;乔自林;李向茸 -专利权人：冯若飞;马忠仁
申请日： 2011-02-17 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种检测EMCV抗体的酶联免疫试剂盒，本试剂盒由盒体和扣装在盒体上端的盒盖组成，盒体内部设置带凹槽的固定板，凹槽共有八个，分别为包被EMCV重组抗原的酶标板凹槽、酶标记的EMCV抗原工作液凹槽、EMCV抗体阳性对照凹槽、EMCV抗体阴性对照凹槽、洗液凹槽、显色剂A凹槽、显色剂B凹槽和终止液凹槽，凹槽的形状分别与所放置的物品相适应。本试剂盒取用方便，易于携带，使用时将试剂放置在固定位置的凹槽中，避免了试剂的错放、漏放，提高了操作人员的工作效率。
检测脑心肌炎病毒抗体免疫试剂盒

[发明专利]一种在低血清和无血清培养基中高密度悬浮培养的BHK-21细胞及其制备方法-CN201110050597.7有效
发明人：冯玉萍;乔自林;令世鑫;冯若飞;李明生;柏家林;马祺;王家敏;沈武玲;马忠仁 -专利权人： 马忠仁
申请日： 2011-03-02 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种在低血清和无血清培养基中高密度悬浮培养的BHK-21细胞及其培养方法，培养方法包括以下步骤：1）将冻存的BHK-21细胞复苏并贴壁培养，得到贴壁培养的BHK-21细胞；2）贴壁培养的BHK-21细胞利用培养液传代培养得到悬浮培养的BHK-21细胞并冻存；3）悬浮培养的BHK-21细胞进行复苏培养并进行生物学特性鉴定；4）鉴定合格的悬浮培养的BHK-21细胞进行生物反应器适应培养。本发明的有益效果为：本发明提供的细胞驯化方法及得到的可悬浮培养的BHK-21细胞，节省了培养液和牛血清，将悬浮培养的细胞运用到实际生产中在场地和人力投入上也会大幅度节省，符合目前节能、环保及低碳理念，在带来可观地经济效益的同时，也会产生较好地社会效益。
一种血清培养基中高密度悬浮培养 bhk 21 细胞及其制备方法

[发明专利]一种利用牦牛乳制备水解乳蛋白的方法-CN201110053655.1有效
发明人：冯玉萍;李明生;乔自林;冯若飞;令世鑫;马忠仁 -专利权人： 马忠仁;冯玉萍;李明生;乔自林;冯若飞;令世鑫
申请日： 2011-03-07 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： A23J1/20 文献下载
摘要：一种利用牦牛乳制备水解乳蛋白的方法，属于牛奶制品加工领域，牦牛乳经脱脂、制备凝乳酶干酪素、烘干粉碎、水解、灭活酶、纯化、浓缩、干燥等步骤，得水解乳蛋白成品。本发明水解乳蛋白的方法用时短，使用双酶水解较酸、碱水解，反应条件温和，水解彻底，水解率高。
一种利用牦牛制备水解蛋白方法

[发明专利]检测脑心肌炎病毒抗体的酶联免疫试剂盒及其应用-CN201110039786.4有效
发明人：冯若飞;樊得英;马忠仁;李明生;乔自林;李向茸 -专利权人：冯若飞;马忠仁
申请日： 2011-02-17 - 公布日： 2011-06-08 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：检测脑心肌炎病毒抗体的酶联免疫试剂盒及其应用，本发明公开了一种检测EMCV抗体的酶联免疫试剂盒，所述试剂盒包括：包被EMCV重组抗原的酶标板、酶标记的EMCV抗原工作液、EMCV抗体阳性对照、EMCV抗体阴性对照、洗液、显色剂A、显色剂B和终止液；本发明还涉及该试剂盒在检测人和动物EMCV抗体中的应用。该试剂盒能对人和动物进行检测，灵敏度高，特异性强，热稳定性好，检测成本低，检测时间短，适用于大批量的EMCV抗体的检测；经试验，99.6%的血清能直接判断出阴阳性，具有很好的实用效果。
检测脑心肌炎病毒抗体免疫试剂盒及其应用

[实用新型]一种钢样夹持磨制装置-CN201020531039.3有效
发明人： 马忠仁;梁祥远;李丹;吴长宽 -专利权人：鞍钢股份有限公司
申请日： 2010-09-16 - 公布日： 2011-04-13 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本实用新型提供一种钢样夹持磨制装置，支撑板通过转轴连接在磨样机平台上，转轴上端设有斜面碰头，装有夹具的翻转杆铰接在支撑板上。夹具由滑杆、滑套、压簧、钢垫及螺母组成，滑杆“喇叭口”插装在滑套“喇叭口”内，套于滑杆上的压簧通过钢垫和螺母卡装在滑套凹槽内。使用时下压翻转杆，将钢样放入夹头内；松开翻转杆，使夹头夹紧钢样；将翻转杆下翻，钢样与砂纸贴合；待钢样研磨至符合标准后，将翻转杆上翻松开夹头，取下钢样送检。其结构简单，夹持牢固，可降低砂纸消耗，消除安全隐患，显著加快夹持磨制速度，减轻劳动强度，提高作业效率和成分分析的准确性；并可就地取材，自行制作。
一种夹持磨制装置

[实用新型]一种铸补渣罐-CN201020237067.4无效
发明人：梁祥远;李丹;齐志宇;袁兴文;姚刚;王成青;马忠仁 -专利权人：鞍钢股份有限公司
申请日： 2010-06-25 - 公布日： 2011-03-09 - 主分类号： C21B3/10 文献下载
摘要：本实用新型提供一种铸补渣罐，在渣罐罐底破损部位切割成的梯形缺口内嵌入带有孔洞的补丁，补丁用钢筋焊接在渣罐内壁上，补丁的各孔洞内插有上部带直角弯的连接件，连接件的下端铆焊在补丁的下面，补丁下面包有保护板，保护板用铆钉铆固在渣罐上，在补丁的上面注有冷却后凝固铁水，凝固铁水与渣罐内壁之间的缝隙中填充有耐火泥。经修复后的渣罐强度和安全性高，密封性与耐撞击性能好，可提高渣罐的使用周期半年以上，既降低渣罐的备件储备，减少资金占用量，又极大降低冶炼成本，实现废物利用。
一种铸补渣罐

[发明专利]一种糜胰蛋白酶的提取方法-CN200910170682.X无效
发明人： 马忠仁;印明善;冯玉萍;李明生;蔡翠萍;乔自林;冯若飞;阮小华 -专利权人： 马忠仁;印明善
申请日： 2009-08-27 - 公布日： 2010-02-10 - 主分类号： C12N9/76 文献下载
摘要：本发明涉及生物工程领域，更具体地说涉及一种糜胰蛋白酶的提取方法。本发明采用CaCl₂激活糜胰蛋白酶原成为糜胰蛋白酶的同时加入(NH₄)₂SO₄，使其生成CaSO₄沉淀吸附糜胰蛋白酶，不需要先采用盐析多重结晶结合透析和乙醇及丙酮等的有机溶剂法制备成糜胰蛋白酶粗制品，再通过CM-纤维素柱层析和亲和层析等复杂步骤，进行纯化制备，而直接经过洗脱，盐析、超滤和冻干步骤即可获得白色的冻干粉末。本发明提取方法简便可行，适于工业化生产，这样既节省了成本又缩短了时间，由原来约需7～8天时间缩短到3～4天。每公斤胰脏可获得冻干糜胰蛋白酶粉4.0～4.5克，其中糜蛋白酶的比活力为355U./mg蛋白(氮)，胰蛋白酶的比活力为1361U./mg蛋白(氮)。
一种胰蛋白酶提取方法

[发明专利]一种牛血清采集方法-CN200810018377.4无效
发明人： 马忠仁;富小刚 -专利权人： 马忠仁;富小刚
申请日： 2008-05-27 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： A61B5/15 文献下载
摘要：本发明涉及一种动物血清采集方法，更具体地说涉及一种牛血清采集方法。本发明有下述顺序的步骤：采血、接血、离心和分装，关键是：在接血瓶内按接血瓶总容积1％的比例加入0.9％氯化钠注射液，在离心前将接血瓶放到38℃水浴箱中，直到血清开始析出后才可进行离心。本发明的优点是：在接血瓶内加入0.9％氯化钠注射液，人为制造了一个等渗环境，血液的渗透压不会发生改变，不会因红细胞破裂而溶血。接血瓶在38℃水浴箱内，使血液均匀受热，这样有利于不稳定蛋白的析出，有利于血清的析出、离心和分离，采集的血清外观为黄色且透亮。本发明采集的血清不仅血清品质好，而且采集数量比传统方法要多出300毫升以上。每头牛血清多收益30～60圆，可以促进农牧民的增收。
种牛血清采集方法