本发明公开了一种基于等温扩增和Cas14a双重放大的检测肌酸激酶同工酶的试剂盒,涉及蛋白检测领域;包括以下组分:PtNPs/Cu‑TCPP(Fe)、DNA水凝胶、生物素修饰的适配体序列、cDNA、EXPAR等温扩增体系、Cas14a、crRNA和tracrRNA;该适配体序列为SEQ ID NO:1所示序列;该cDNA的序列为SEQ ID NO:2所示序列;该crRNA的序列为SEQ ID NO:4所示序列;该tracrRNA的序列为SEQ ID NO:5所示序列。本发明通过提供一种灵敏特异、操作简便、可靠通用的适配体传感检测方法,以实现对心肌梗死标志物肌酸激酶同工酶的高灵敏检测。