本发明公开了基于PCR‑CRISPR‑cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒。本发明提供了一种用于检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒,含有Cas13a蛋白和crRNA,或者二者形成的复合体;所述crRNA包括用于与Cas13a蛋白结合的锚定序列和靶向乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列的向导序列;所述乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列如SEQ ID No.4所示。本发明是采用PCR技术联合CRISPR‑Cas13a技术检测HBV cccDNA,以此方法开发的HBV cccDNA新型检测试剂盒,具有特异性强、灵敏度高的特点,有着非常重要的临床应用前景和开发价值。