本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种与E2特异性结合的HEV1适配体及检测方法与应用。本发明通过对76‑MER适配体进行结构改造,合成了一种新的用于检测E2的HEV1适配体,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该HEV1适配体具有与76‑MER适配体相近的结合能力。同时本发明还提供了两种基于HEV1适配体的传感器(包括纳米金比色传感器和电化学适配体传感器)及其检测方法,该纳米金比色传感器具有优异的灵敏度,该电化学适配体传感器具有良好的重复性和选择性。本发明的HEV1适配体与E2具有较强的结合能力,以及优异的检测准确性和特异性,并且合成成本低,比长序列适配体更适用于雌二醇的临床检测。