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[发明专利]一种抗口蹄疫病毒的类病毒粒子VLP疫苗及其制备方法-CN201510428078.8有效
发明人：刘明秋;苗巍男;郑兆鑫 -专利权人：复旦大学
申请日： 2015-07-21 - 公布日： 2017-12-29 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程技术领域，具体为一种抗口蹄疫病毒的类病毒粒子VLP疫苗及其制备方法。本发明涉及的类病毒粒子（VLP）疫苗是由含有口蹄疫病毒的抗原表位基因和作为载体的猪圆环病毒（procine circovirus，PCV）的外壳蛋白CAP基因的重组杆状病毒连接形成的，其中口蹄疫病毒的抗原基因可以是任何毒株的抗原表位基因。该重组杆状病毒转入表达体系后传代到第三代可以收获重组病毒粒子，提取出的类病毒粒子便是抗口蹄疫病毒的VLP疫苗。该疫苗免疫口蹄疫模式动物豚鼠后，可以使37.5%的豚鼠免受口蹄疫病毒的感染。
一种口蹄疫病毒类病毒粒子 vlp 疫苗及其制备方法

[发明专利]口蹄疫病毒O型毒株(O/BY/CHA/2010)中VP1、VP2和VP4三个结构蛋白的表位最小基序肽及其应用-CN201410476076.1有效
发明人：刘明秋;郑兆鑫;栾喜梅 -专利权人：复旦大学
申请日： 2014-09-17 - 公布日： 2017-11-10 - 主分类号： C07K7/06 文献下载
摘要：本发明属于生物医药与生物检测技术领域，具体为一种口蹄疫病毒O型毒株(O/BY/CHA/2010)中VP1、VP2和VP4三个结构蛋白的表位最小基序肽及其应用。本发明提供的5个线性抗原表位最小基序肽可用作研发新的抗O型口蹄疫病毒重组多表位肽疫苗候选表位肽，其氨基酸序列分别为SEQ.ID NO.1～SEQ.ID NO.5。本发明还提供用作研制诊断口蹄疫病毒流行情况的高特异性和高敏感度的重组多表位肽的检测抗原的候选表位，其氨基酸序列如SEQ.ID NO.6～SEQ.ID NO.10所示。
口蹄疫病毒型毒株 by cha 2010 vp1 vp2 vp4 三个结构蛋白最小基序肽

[发明专利]能抑制口蹄疫病毒的shRNA转基因重组质粒及其应用-CN201210223353.9有效
发明人：刘明秋;郑兆鑫;曾溢滔;焦晔;严维耀 -专利权人：复旦大学
申请日： 2012-07-02 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程技术领域，具体为一种能抑制口蹄疫病毒的转基因重组质粒及其应用。该质粒含有两个shRNA表达基因，能同时编码两种分别靶向口蹄疫病毒基因组3DRNA聚合酶和2B非结构蛋白保守区域的特异shRNA；两个shRNA表达基因呈串联状态。该质粒适用于多种转基因技术。当使用PB转座子系统将该质粒转入体外培养的猪细胞IBRS-2后，经攻毒实验证明，筛选得到的转基因细胞系具有抵抗20-50TCID50剂量O型或亚洲Ⅰ型FMDV毒株感染的能力。当将该质粒通过显微注射导入小鼠受精卵后，筛选得到的转基因小鼠家系使用3-6LD50O型FMDV毒株感染时，相对同窝小鼠对照明显提高了存活率。
抑制口蹄疫病毒 shrna 转基因重组质粒及其应用

[发明专利]猪干扰素基因家族及其作为抗猪蓝耳病药物及疫苗佐剂的应用-CN201010208935.0有效
发明人： 郑兆鑫;赵欣;程功;刘明秋;严维耀 -专利权人：复旦大学
申请日： 2010-06-24 - 公布日： 2011-01-26 - 主分类号： C12N15/20 文献下载
摘要：本发明属遗传工程技术领域，具体为猪干扰素家族基因及其作为抗猪蓝耳病药物及疫苗佐剂的应用。所述猪干扰素基因是从家猪基因组中调取获得，具有抗病毒作用，其氨基酸序列为SEQ ID NO.1，SEQ ID NO.3，SEQ ID NO.5，SEQ ID NO.7，或SEQ ID NO.9；涉及的药物和疫苗佐剂是将家猪干扰素基因利用分子生物学技术克隆入真核表达载体获得的重组质粒及将该质粒转入猪霍乱沙门氏菌弱毒株而获得活菌苗。动物实验证明，该药物和佐剂安全性好，效果显著。直接注射家猪后当天攻毒，保护率可达80％。佐剂与蓝耳病灭活疫苗联用，一次免疫注射家猪后28天攻毒，保护率可达80％。
干扰素基因家族及其作为抗猪蓝耳病药物疫苗佐剂应用

[发明专利]一种口蹄疫病毒抑制剂、其制备方法及应用-CN200810203053.8有效
发明人：刘明秋;严维耀;丛薇;金虹;郑兆鑫 -专利权人：复旦大学
申请日： 2008-11-20 - 公布日： 2010-06-16 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程领域，具体涉及一种应用RNAi技术设计的口蹄疫病毒病抑制剂、其制备方法及应用。该抑制剂是含有表达抗口蹄疫病毒的siRNA的质粒、以减毒猪霍乱沙门氏菌为受体菌的重组活菌苗。本发明的重组活菌苗储存、使用方便。既可以口服适用，又可以肌肉注射。减毒沙门氏菌作为载体传递siRNA表达质粒，不仅可以使机体抵抗该siRNA靶向的病毒，同时也可以抗沙门氏菌感染。
一种口蹄疫病毒抑制剂制备方法应用

[发明专利]抗家畜亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法-CN200810036563.0无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;刘明秋;韩姬;王加龙 -专利权人：复旦大学
申请日： 2008-04-24 - 公布日： 2009-05-06 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明属于免疫学与遗传工程技术领域，具体为一种抗家畜亚洲I型口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法。本疫苗利用亚洲I型口蹄疫病毒VP1蛋白中133-163位氨基酸这一B细胞表位，以及VP2蛋白中1-33位氨基酸的T细胞表位，用化学方法合成编码这两种抗原表位基因组成的重复串联基因序列，将这一串联重复基因序列分别插入牛IgG重链恒定区基因的C末端，或β-半乳糖苷酶基因的C末端构建两种表达载体，经发酵后分别表达两种融合蛋白，超声并纯化后制备成疫苗，检测该两种疫苗的安全性及对动物的免疫保护作用，经动物攻毒实验证明两种疫苗对豚鼠有良好的保护效果，免疫豚鼠100％抵抗100ID₅₀剂量的Asia I型口蹄疫病毒攻击。
家畜亚洲口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法

[发明专利]抗家畜口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法-CN200810036562.6无效
发明人：刘明秋;严维耀;郑兆鑫;焦晔 -专利权人：复旦大学
申请日： 2008-04-24 - 公布日： 2008-12-03 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明属于遗传工程技术领域，具体为一种抗家畜口蹄疫病毒工程多肽疫苗及其制备方法。本发明的多肽疫苗以截短的β－半乳糖苷酶pWR280作为抗原载体蛋白，以化学合成法合成编码口蹄疫病毒VP1蛋白中具有抗原性的氨基酸肽段的DNA序列和T辅助细胞刺激因子的基因序列，在DNA水平上连接成完整的抗原基因。将该抗原基因插入载体pWR280。新构建的基因工程菌经发酵，超声破菌获得的包涵体制备成疫苗。该疫苗安全性好，效果显著，对家畜有理想的保护效果。
家畜口蹄疫病毒基因工程多肽疫苗及其制备方法

[发明专利]一种口蹄疫基因工程多肽疫苗佐剂及其制备方法和应用-CN200610147664.6无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;程功;刘明秋 -专利权人：复旦大学
申请日： 2006-12-21 - 公布日： 2007-07-11 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明属遗传工程技术领域，具体为一种口蹄疫基因工程多肽疫苗佐剂及其制备方法和应用。本发明涉及的佐剂是将家猪干扰素－α基因利用分子生物学技术克隆入真核表达载体获得的重组质粒。其中家猪干扰素－α基因是指家猪干扰素－α多基因家族中的任一亚型的基因；真核表达载体可以是具有真核启动子、原核复制子以及原核抗性基因为特征的任一种DNA表达载体。该重组质粒转入大肠杆菌扩增并通过碱裂解法获得大量质粒，并用PBS缓冲液稀释质粒到一定浓度，配制成本发明所述的多肽疫苗佐剂。动物试验证明，该佐剂安全性好，效果显著，与O型口蹄疫基因工程疫苗联用，一次免疫注射家猪后即可对口蹄疫病毒具有理想的预防效果，家畜受保护率达100％。
一种口蹄疫基因工程多肽疫苗佐剂及其制备方法应用

[发明专利]一种能增强动物抗体应答的多肽片段及其应用-CN200610147255.6无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;王加龙;刘明秋;陈维灶;韩姬 -专利权人：复旦大学
申请日： 2006-12-14 - 公布日： 2007-06-27 - 主分类号： C07K14/09 文献下载
摘要：本发明属免疫学与遗传工程技术领域，具体为一种能增强动物抗体应答的多肽片段及其应用。该多肽片断是一种能够刺激基因工程疫苗诱发中和抗体应答水平的免疫刺激多肽片断，具体为口蹄疫病毒VP2蛋白第1－33位氨基酸序列。本发明采用β－半乳糖苷酶作为载体蛋白，将上述免疫刺激肽段连接在该载体蛋白半乳糖苷酶C端，制备得融合蛋白LacZ－B1。该融合蛋白可作为新型口蹄疫基因工程多肽疫苗免疫刺激佐剂。该融合蛋白佐剂安全性好，能有效提高动物抗体应答水平。
一种增强动物抗体应答多肽片段及其应用

[发明专利]能抑制口蹄疫病毒复制与感染的siRNA及其制备方法-CN200510028483.7无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;陈维灶;刘明秋 -专利权人：复旦大学
申请日： 2005-08-04 - 公布日： 2006-04-12 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明是一种能抑制口蹄疫病毒在细胞与动物个体中复制与感染的siRNA及其制备方法和应用。选取口蹄疫病毒基因组中1D结构蛋白基因和3D聚合酶基因为siRNA的干扰靶点，设计并以人重组腺病毒Ad5为载体表达三种siRNA，其中，21VPl siRNA和63VPl siRNA靶向口蹄疫病毒1D基因，56POL siRNA靶向3D基因。通过细胞攻毒实验证明，上述三种siRNA均能高效抑制病毒在细胞中的复制，并百分百保护敏感细胞不受病毒攻击，且对不同口蹄疫病毒毒株起到交叉保护作用。该药物安全性好，效果显著，对家畜有理想的保护效果。
抑制口蹄疫病毒复制感染 sirna 及其制备方法

[发明专利]一种抗口蹄疫病毒重组活菌苗及其制备方法-CN200510027385.1无效
发明人：刘明秋;严维耀;郑兆鑫 -专利权人：复旦大学
申请日： 2005-06-30 - 公布日： 2006-02-08 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明是一种以减毒猪霍乱沙门菌为载体的抗口蹄疫病毒重组活菌苗，用化学合成方法合成编码口蹄疫病毒抗原表位基因的DNA序列，并在DNA水平上连接成完整抗原基因，构成融合基因。融合基因插入表达质粒载体构建成真核表达质粒pBO1。然后将该真核表达质粒pBO1经过中间宿主鼠伤寒沙门菌LB5010后，电转化到减毒的猪霍乱沙门菌C500中，构建成抗口蹄疫病毒的重组活菌苗pBO1/S.cho。免疫家兔后，重组活菌苗pBO1/S.cho在家兔体内诱导了明显的T细胞增殖反应并检测到针对FMDV的特异性抗体。
一种口蹄疫病毒重组菌苗及其制备方法

[发明专利]一种能抑制口蹄疫病毒复制与感染的siRNA及其制备方法和应用-CN200410054028.X无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;刘明秋;陈维灶 -专利权人：复旦大学
申请日： 2004-08-26 - 公布日： 2005-03-02 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明是一种能抑制口蹄疫病毒(FMDV)在动物细胞与个体中复制与感染的siRNA及其制备方法和应用。选取FMDV基因组序列的五个区段，即5NCR，VP4，VPg，POL，3NCR中高度保守的序列部分作为siRNA的靶序列，并且以靶序列中的任何连续的21－25bp的序列设计siRNA。细胞攻毒实验证明，以FMDV基因组中高度保守的序列作为靶基因，应用能与靶基因的DNA序列互补配对的siRNA，可以有效地抑制不同0型FMDV毒株在BHK21细胞中的复制与感染，并能有效的保护乳鼠抵抗病毒的感染，对细胞和乳鼠有很好的保护作用。
一种抑制口蹄疫病毒复制感染 sirna 及其制备方法应用

[发明专利]带有降钙素基因相关肽衍生物及其制备方法-CN200410016826.3无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;刘明秋;邱媛媛 -专利权人：复旦大学
申请日： 2004-03-09 - 公布日： 2005-01-05 - 主分类号： C07K14/585 文献下载
摘要：本发明为一种带有降钙素基因相关肽(CGRP)衍生物及其制备方法。CGRP具有降血压等重要的生理功能，但是在动物体内易被降解，作用时间短。本发明设计了一段DNA序列和大肠杆菌质粒载体pGEX－4T－2的GST基因相连接，构成带有降钙素基因相关肽基因的新的表达质粒pGEX－CGRP。由大肠杆菌发酵生产的融合蛋白，再经分离提取过程制备降钙素基因相关肽衍生物I。另外分别将2个有降压功能的小肽HHL和RPLKPW的基因克隆到CGRP基因后，构建成2个表达质粒pGEX－CGRP－3AA和pGEX－CGRP－6AA。转入大肠杆菌细胞后，经发酵从大肠杆菌细胞中分离到降钙素基因相关肽衍生物II和III。上述衍生物可用于制备治疗心血管疾病的药物。
带有降钙素基因相关衍生物及其制备方法

[发明专利]抗O型和A型口蹄疫病毒双价多肽疫苗及其制备方法-CN200310108506.6无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;易建中;刘明秋;朱彩珠;陈维灶;盛祖恬 -专利权人：复旦大学
申请日： 2003-11-07 - 公布日： 2004-11-03 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明是一种抗O型和A型口蹄疫病毒的二价多肽疫苗，用化学合成法合成编码O型口蹄疫病毒VP1蛋白中21ヘ40、141ヘ160位氨基酸的小肽基因，将其组成串联结构；编码A型口蹄疫病毒VP1蛋白21ヘ40、138ヘ160位氨基酸的小肽基因，将其组成串联结构；加入编码适当氨基酸多肽的核苷酸作为接头，然后将这两个串连重复序列连接构成一编码O型口蹄疫病毒和A型口蹄疫病毒VP1蛋白主要抗原决定簇的融合基因，将此融合基因插入表达载体，经发酵制备成疫苗，该疫苗安全性好，效果显著，对豚鼠有理想的保护效果。
口蹄疫病毒多肽疫苗及其制备方法

[发明专利]一种抗亚洲一型口蹄疫病毒的多肽疫苗及其制备方法-CN03129229.1无效
发明人： 郑兆鑫;严维耀;张青;张震宇 -专利权人：复旦大学
申请日： 2003-06-13 - 公布日： 2004-01-28 - 主分类号： A61K39/135 文献下载
摘要：本发明是一种抗亚洲一型(Asial型)口蹄疫病毒的多肽疫苗及其制备方法。该疫苗由Asial型口蹄疫病毒VP1和VP4上B，T细胞表位氨基酸的DNA序列串联单独编码表位蛋白，或与载体大分子相连编码表位融合蛋白制备获得。用化学方法合成编码Asial型VP1和VP4上B细胞表位和T细胞表位的肽段基因，将其串联，串联基因单独或与载体大分子相连再插入质粒载体，转入细菌表达，经过发酵制备得抗口蹄疫病毒疫苗。该疫苗安全性好，具有较强的免疫原性，对豚鼠保护力强。
一种亚洲口蹄疫病毒多肽疫苗及其制备方法

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