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[发明专利]一种基于冰冻切片的杨树根尖3D荧光原位杂交方法-CN202010106601.6有效
发明人：席梦利;尚大鑫;刘光欣;辛昊阳;赵乙琏;鹿东东;宁仪杭 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2020-02-20 - 公布日： 2021-01-26 - 主分类号： C12Q1/6841 文献下载
摘要：本发明公开一种基于冰冻切片的杨树根尖3D荧光原位杂交方法，属于分子细胞遗传学领域。本方法包括：获取杨树根尖，用卡诺固定液固定后水洗，再用包埋剂将其包埋并冷冻后切片，将切片粘附到载玻片上，随后经过烤片、变性、杂交、抗体检测等FISH步骤，最后在激光共聚焦显微镜下观察并捕获3D图像。本发明提供的方法可以获得根尖完整的组织结构且FISH信号清晰，相比传统制片方法获得的2D FISH结果，本发明的方法可以在三维水平直观展示染色体在细胞中的真实空间占位，以及在三维水平准确定位靶序列在细胞中的空间分布，可应用于杨树的染色体空间占位、基因表达及Hi‑C测序结果的分析等领域，具有广阔的应用前景。
一种基于冰冻切片杨树根尖荧光原位杂交方法

[发明专利]一种基于石蜡切片的杨树根尖3D荧光原位杂交方法-CN202010090059.X有效
发明人：席梦利;赵乙琏;辛昊阳;鹿东东;刘光欣;尚大鑫;宁仪杭 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2020-02-12 - 公布日： 2020-12-22 - 主分类号： C12Q1/6841 文献下载
摘要：本发明公开一种基于石蜡切片的杨树根尖3D荧光原位杂交方法，属于分子细胞遗传学领域。本方法主要包括：获取杨树幼嫩根尖，用卡诺固定液固定；正丁醇梯度溶液脱水、浸蜡、包埋；切片、展片、烤片及脱蜡；制片用果胶酶、纤维素酶、胃蛋白酶及RNA酶处理；制片及探针变性、杂交过夜；二抗孵育后检测杂交信号。本发明所提供的方法可以获得杨树根尖石蜡切片清晰的FISH信号，使用激光共聚焦显微镜捕获的3D图像可以准确反映靶序列在细胞中三维水平的空间分布。本发明的方法可用于杨树的染色体空间占位、基因表达及Hi‑C测序结果的分析等研究领域，具有广阔的应用前景。
一种基于石蜡切片杨树根尖荧光原位杂交方法

[发明专利]杨树功能着丝粒组蛋白CENH3的抗原多肽及其应用-CN202010163329.5有效
发明人：席梦利;宁仪杭;辛昊阳;刘光欣;赵乙琏;尚大鑫 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2020-03-10 - 公布日： 2020-12-04 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明公开杨树功能着丝粒组蛋白CENH3的抗原多肽及其应用，属于生物信息学和分子细胞遗传学领域。该发明主要包括：筛选毛果杨CENH3蛋白特异的一段氨基酸序列并人工合成多肽，用该多肽免疫新西兰兔，制备抗血清，亲和纯化后得到CENH3蛋白抗体；抗体通过免疫荧光检测、ChIP‑FISH进行特异性验证，证明了该抗体可以准确识别功能着丝粒。该抗体可以在杨属树种中通用，不仅可以准确标记杨树功能着丝粒的位置，也为开展杨树着丝粒的结构、功能及进化研究奠定基础。本发明在杨树分子细胞遗传学、基因组学及表观组学等研究领域具有广阔的应用前景。
杨树功能着丝粒组蛋白 cenh3 抗原多肽及其应用

[发明专利]一种大叶杨的组培快繁方法和应用-CN201911020465.2有效
发明人：席梦利;尚大鑫;宁仪杭;赵乙琏;辛昊阳;郭瑞红 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2019-10-24 - 公布日： 2020-06-09 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种大叶杨的组培快繁方法和应用，包括：以大叶杨幼嫩叶柄为外植体，外植体依次进行不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养和移栽。利用上述的组培快繁方法得到的组培生根苗培养时间短，培养流程简便，提高了大叶杨繁殖的效率；能快速获得遗传性状一致的大叶杨组培生根苗，组培生根苗移栽成活率高。利用组培快繁技术，进行外植体培养，不受季节气候变化、自然灾害的影响，可进行大规模的工业化育苗，利用上述组培快繁方法，可以保持优良基因型的特性不变，从而为大叶杨优良种质资源的保存和利用提供技术保障。
一种大叶杨组培快繁方法应用

[发明专利]一种基于浅层液体培养的麝香百合遗传转化方法-CN201711172159.1有效
发明人：席梦利;赵乙琏;孙惠霖;姜珊;施季森 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2017-11-22 - 公布日： 2020-01-10 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于浅层液体培养的麝香百合遗传转化方法，包括预培养、菌株活化、农杆菌侵染与共培养、脱菌与筛选培养、分化与抗性苗的获得、体视荧光显微镜观察检测等步骤；本发明以愈伤组织发生能力较强以及愈伤增殖速度较快的麝香百合‘雷山’试管鳞茎的鳞片为实验材料，采取植物细胞薄层切片法，以浅层液体培养为基础，利用根癌农杆菌介导法进行麝香百合遗传转化的研究，将绿色荧光蛋白基因(GFP)转入麝香百合，获得再生植株后采用正置体视式荧光显微镜观测，为百合的基因工程研究提供基础。
一种基于液体培养麝香百合遗传转化方法

[发明专利]一种利用寡核苷酸探针识别杨树全部染色体的方法-CN201910168504.7有效
发明人：席梦利;辛昊阳;赵乙琏;尚大鑫;宁仪杭 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2019-03-06 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12Q1/6841 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用寡核苷酸探针识别杨树全部染色体的方法，依据毛果杨的基因组信息，通过生物信息学分析获得每条染色体特异的寡核苷酸序列，合成杨树1‑19号染色体对应的寡核苷酸库，然后用生物素或地高辛将其标记成寡核苷酸探针，再通过荧光原位杂交技术识别杨树的染色体，每轮杂交最多同时使用3条染色体的寡核苷酸探针，在同一个中期分裂相上重复进行7次荧光原位杂交，可以准确辨别杨属树种的19对染色体。具有在杨属树种通用、实验重复性好、分辨率高的优点；本发明提供了一种准确识别杨属树种每条染色体的新方法，为杨树的分子细胞遗传学研究奠定了扎实的工作基础。
染色体寡核苷酸探针杨树杨属树种荧光原位杂交技术分子细胞遗传学生物信息学分析寡核苷酸序列荧光原位杂交寡核苷酸库基因组信息实验重复性工作基础地高辛生物素分辨率毛果辨别合成杂交分裂通用重复研究

[实用新型]培养基制备装置-CN201821579599.9有效
发明人： 赵乙琏;席梦利 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2018-09-26 - 公布日： 2019-08-16 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及培养基制备装置，包括实验箱体和设于所述实验箱体内的培养基制备容器、恒温磁力搅拌器、紫外杀菌灯、温度计、分装管和电子蠕动泵，恒温磁力搅拌器和电子蠕动泵设于实验箱体的底部，紫外杀菌灯设于实验箱体的顶部，培养基制备容器的开口处设有容器盖，容器盖上设有加料口、分装口和温度计孔，加料口内插设有加料装置，温度计自所述温度计孔插入培养基制备容器内，分装口内插有分装管，分装管的一端自分装口插入培养基制备容器内，分装管的另一端通过电子蠕动泵通往分装装置。本培养基制备装置能够完整培养基制备的全过程，包括制备、加热、消毒、分装，提高了制备效率且能够有效防止培养基被污染。
培养基制备实验箱体分装管分装电子蠕动泵制备恒温磁力搅拌器紫外杀菌灯温度计孔温度计容器盖本实用新型完整培养基分装装置加料装置培养基加料加料口开口处加热消毒污染

[发明专利]一种适于植物染色体rDNA物理定位的探针组合和方法-CN201810928031.1有效
发明人：席梦利;兰月;辛昊阳;赵乙琏;倪润欣;陈曦 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2018-08-14 - 公布日： 2019-06-18 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种适于植物染色体rDNA物理定位的探针组合和方法；涉及分子细胞遗传学技术领域。该探针组合包括SEQ ID NO.1‑4的探针，分别是5S rDNA探针、5.8S rDNA探针、18S rDNA探针和25S rDNA探针；采用该探针组合及方法进行植物染色体原位杂交，可以捕获到较高分辨率的染色体及荧光原位杂交信号，适用于多种植物的染色体原位杂交；且该探针组合为寡核苷酸探针，具有制作成本低、使用方便、操作简单等特点。
探针组合探针植物染色体物理定位分子细胞遗传学染色体原位杂交寡核苷酸探针荧光原位杂交高分辨率原位杂交染色体捕获制作

[实用新型]超净工作台-CN201821579598.4有效
发明人： 赵乙琏;席梦利 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2018-09-26 - 公布日： 2019-05-03 - 主分类号： B01L9/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及超净工作台，包括相连的实验箱体和箱门，所述箱门可以转动或移动继而打开所述实验箱体，所述实验箱体内部的底面为实验台面，所述实验箱体内设有紫外杀菌灯和至少一块用于反射所述紫外杀菌灯发出的紫外光的镜面反射片，所述镜面反射片的反射面呈曲面，利用镜面反射片将紫外杀菌灯发射的紫外线反射到工作台的各个角度，能够有效避免部分区域杀菌效果差的问题。
实验箱体镜面反射片紫外杀菌灯箱门反射超净工作台紫外线反射紫外光杀菌效果实验台面工作台底面转动发射移动

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