本发明公开了一种具有改善睡眠作用的短肽凝胶及其制备方法和应用,属于生物工程制品领域。其中,所述短肽凝胶由短肽DSIP或其改造短肽DSIP‑M以及凝胶成型剂组成,所述短肽DSIP的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述短肽DSIP‑M的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;所述凝胶成型剂由去离子水、透明质酸和泊洛沙姆组成。本发明中的短肽凝胶剂具有较好的改善睡眠效果,能够减少大鼠自发活动,缩短失眠模型大鼠阈上戊巴比妥钠睡眠潜伏时间、延长睡眠时间;并显著改善睡眠障碍人群的睡眠质量。短肽凝胶剂在使用期间及停用后,所有受试者均无不良症状和皮肤过敏反应,具有较好的安全性。