本发明公开了一种利用葡萄糖脱氢酶催化麦芽糖合成麦芽糖酸的方法，属于生物医药领域。该方法以大肠杆菌为模板，克隆出葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh；构建重组表达葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh体系，表达出葡萄糖脱氢酶；再以麦芽糖为底物，以NADH为电子供体，经葡萄糖脱氢酶催化制备麦芽糖酸；所述的葡萄糖脱氢酶基因Ecgdh的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明获得的葡萄糖脱氢酶，与以PQQ为辅因子的醌蛋白葡萄糖脱氢酶相比大大提高，相较于其他醌蛋白葡萄糖脱氢酶对于麦芽糖具有更强的底物偏好性，适合大规模的制备麦芽糖酸，为麦芽糖酸的合成提供了新的方式。
本发明公开了一种2,4‑二氨基丁酸转移酶突变体基因及其应用，所述基因编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的2,4‑二氨基丁酸转移酶突变体。该突变体基因应用于四氢嘧啶的合成，先通过构建2,4‑二氨基丁酸转移酶突变体基因EctBm、2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶EctA和四氢嘧啶合成酶EctC的表达框，共表达2,4‑二氨基丁酸转移酶突变体基因、2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶基因和四氢嘧啶合成酶基因，获得2,4‑二氨基丁酸转移酶突变体、2,4‑二氨基丁酸乙酰转移酶和四氢嘧啶合成酶，在此基础上，以葡萄糖或甘油为碳源，经一步法发酵大肠杆菌高效合成四氢嘧啶即可。该突变体与底物天冬氨酸‑β‑半醛具有较高的结合力，有效提高了四氢嘧啶的合成效率。
本发明公开了一种跨膜蛋白复合体基因及其在生物发酵制备重组类人胶原蛋白中的应用，所述跨膜蛋白复合体基因包含三段基因，第一段基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，第二段基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，第三段基因选自能够表达分子量在6‑12kDa类人胶原蛋白的人胶原蛋白基因片段。本发明采用大肠杆菌跨膜蛋白复合体将第3段目的基因类人胶原蛋白分泌表达到发酵液或大肠杆菌周质空间，离心和提取周质蛋白，再经纯化，所得发酵液或大肠杆菌周质空间的重组类人胶原蛋白的电泳纯度已经达到符合使用要求，内毒素含量低，生产周期短和快捷，生产成本低，便于大规模工业化生产。
本发明涉及具有催化活性的人猪嵌合尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，含有该表达载体的宿主细胞，以及采用该宿主细胞制备人猪嵌合尿酸氧化酶的方法。该人猪嵌合尿酸氧化酶的序列是将SEQ ID NO：1所示序列进行若干位点氨基酸残基替换所得的重组氨基酸残基序列。与现有技术相比，本发明的人猪嵌合尿酸氧化酶有着更高的催化活性，具有制备低免疫原性甚至无免疫原性降尿酸药物或药物组合物的良好前景。
本发明涉及一系列具有催化活性的人源尿酸氧化酶，编码它们的DNA序列，含有该DNA序列的表达载体，以及含有该表达载体的宿主细胞。该人源尿酸氧化酶具有以SEQ ID NO17为基础进行具体位点氨基酸残基替换、或者进行外显子位点氨基酸残基替换得到的重组氨基酸残基序列。本发明成功复活了人类尿酸氧化酶假基因，使之表达出具有催化活性的人源尿酸氧化酶，具有制备低免疫原性甚至无免疫原性降尿酸药物的良好前景。
