本发明公开了一种用于鉴定药用蛭类及其制品的DNA条形码、DNA微条形码及鉴定方法,DNA条形码的标准检测片段的核苷酸序列如SEQ ID No.1‑3所示;DNA微条形码的检测片段的核苷酸序列如SEQ ID No.4‑15所示。本发明提供了特异性扩增《中国药典》中收录的三种药用蛭类目的片段的引物及PCR方法,以三种蛭类DNA为模板,将待测样品中蛭类目的基因片段高效准确地扩增出来,测序后获得片段通过后期的系统发育分析鉴定药用蛭类。该发明有助于准确鉴定三种药用蛭类药材的鲜品或干品、全虫或部分虫体、炮制品或粉末状样品,以及各种含有药用蛭类的不同药物剂型的中成药或化妆品、保健品等中所含的药用蛭类。