本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种HPV分型检测引物及其检测方法和应用。分型检测HPV的qPCR引分别由SEQ ID NO:1‑38所示,所述分型检测HPV的qPCR引物在制备HPV检测试剂盒中的应用。本发明提供的引物对以及试剂盒在HPV检测分型特异性、灵敏度都远高于常见的反向点杂交方法,且对环境和操作要求较低,应用广泛。同时本发明还将DNA双链嵌合荧光染料qPCR检测方法应用到HPV分型检测中,并通过扩增曲线及熔解曲线双重分析提高检测特异性,在特异性达到探针法检测水平的同时,极大地降低了成本,对HPV普查的推广和宫颈癌的防治具有重要意义,具有极高的推广应用价值。