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[发明专利]高通量快速筛选阳性杂交瘤细胞的方法及系统-CN201611053051.6有效
发明人： 索广力;乔勇 -专利权人：南京凌芯生物科技有限公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种高通量快速筛选阳性杂交瘤细胞的方法，其包括：提供三维细胞培养芯片，其包括选定基底以及形成于选定基底表面的图纹结构，所述图纹结构包括由若干图案形成的阵列，所述图案由至少能够促使单细胞附着的修饰剂组成；在所述芯片表面施加细胞悬浮液，再进行细胞培养，之后去除多余细胞，获得单细胞阵列；将基质胶施加到所述芯片表面，并将所述图纹结构完全覆盖，其后孵育至所述基质胶充分固化；以细胞培养完全培养基覆盖所述固化的基质胶，并持续培养，之后甄选阳性杂交瘤细胞进行后续处理。本发明还公开了一种相应的系统。本发明的方法操作简单，培养周期短，无需饲养细胞，且能大幅提高杂交瘤筛选通量，减小筛选结果的假阳性率。
通量快速筛选阳性杂交瘤细胞方法系统

[发明专利]基于软光刻技术的三维细胞培养芯片、其制备方法及应用-CN201611053030.4有效
发明人： 索广力;乔勇 -专利权人：南京凌芯生物科技有限公司
申请日： 2016-11-25 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于软光刻技术的三维细胞培养芯片、其制备方法及应用。该制备方法包括：采用软光刻技术制作具有设定图案结构的掩模；以液态高分子化合物或高分子化合物溶液均匀覆盖所述掩模，并形成一定厚度的液层；使该液层固化，之后移除掩模，获得印章，其印面具有设定立体结构；以所述印面与修饰剂接触，使修饰剂以可脱离方式附着在所述印面上；以所述印面与选定基底表面接触，之后将所述印章从选定基底上移离，从而使至少部分修饰剂脱离所述印面而附着在所述选定基底表面并形成图纹结构，所述图纹结构包括若干能够吸附单细胞的图案组成的阵列。本发明的三维细胞培养芯片易于简单、低成本、大规模的制备，且能够提供理想的3D细胞培养环境。
基于光刻技术三维细胞培养芯片制备方法应用

[发明专利]一种肿瘤干细胞筛选和基于肿瘤干细胞的肿瘤类器官构建方法-CN202210421807.7有效
发明人： 索广力;赵喆;刘星志 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2022-04-21 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明提供了一种肿瘤干细胞筛选和基于肿瘤干细胞的肿瘤类器官构建方法。本发明所述肿瘤类器官构建方法如下：取肿瘤样本置于缓冲液中清洗，加入组织裂解液进行酶解匀浆得到匀浆组织液；将酶解所得匀浆组织液过滤得到组织来源的肿瘤单细胞，对所得肿瘤单细胞进行重悬，并将所得细胞重悬液铺于细胞芯片上，待细胞沉降进入所述细胞芯片的微孔中，加入培养基，培养2‑3天，得到细胞球；将所得细胞球进行扩增，并铺在改性细胞芯片中，培养2‑3天，得到所述肿瘤类器官，经自动化挑取设备挑取后，进行药敏试验的开展，足量大小与质量均一的类器官为药物筛选的准确性提供可能。
一种肿瘤干细胞筛选基于器官构建方法

[发明专利]一种细胞芯片及其应用-CN202310385981.5在审
发明人： 索广力;刘星志;吴寒非;徐中娟 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2023-04-12 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种细胞芯片及其应用。所述细胞芯片包括基底，所述基底上设置有至少一个捕获腔，所述捕获腔的腔体具有至少一个尖角，所述捕获腔的顶部设置有开口，所述开口包括侧壁，所述侧壁中相邻的侧壁至少两个之间成尖角。本发明创造性地设计了一种细胞芯片，和传统细胞芯片相比，能够有效提高对单细胞的捕获率，提高对单细胞生物学功能的检测和展示能力，单细胞分泌功能检测过程中可以不需要微球磁珠的协助，不需要频繁换液等操作，成本低，操作便捷，效率高，通量高。
一种细胞芯片及其应用

[发明专利]含梯度细胞因子的细胞基质材料、其制备方法及应用-CN201910413983.4有效
发明人： 索广力;耿俊飒;乔勇;徐中娟;肖同乾 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2019-05-17 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种含梯度细胞因子的细胞基质材料、其制备方法及应用。所述制备方法包括：构建包含细胞因子的编码基因的重组载体；将重组载体整合入宿主细胞，构建能够稳定表达细胞因子的重组细胞；以抗生素对重组细胞进行加药筛选，获得稳转细胞系；将稳转细胞系接种到基体上进行培养，并使在基体上培养出的重组细胞的分布密度沿指定方向梯度变化；将附着在基体上的重组细胞冻干，获得含梯度细胞因子的细胞基质材料。本发明提供的细胞基质材料可富集SDF‑1α，且其来源于细胞自身，可以最小化免疫反应，同时因其具有SDF‑1α因子梯度，可以在体外模拟体内的炎症微环境，并且还可为细胞附着提供支撑，使干细胞向炎症部位迁移。
梯度细胞因子细胞基质材料制备方法应用

[发明专利]外泌体在细胞外基质中的富集方法、富含外泌体的ECM生物材料与应用-CN202010878116.0有效
发明人： 索广力;于延珍;乔勇 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2020-08-27 - 公布日： 2023-01-17 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种外泌体在细胞外基质中的富集方法、富含外泌体的ECM生物材料与应用。本发明还公开了一种CBD‑LAMP 2b融合基因。含有前述CBD‑LAMP 2b融合基因的细胞系能够稳定表达CBD‑LAMP 2b蛋白，并能够稳定分泌结合到细胞外基质上的外泌体，实现外泌体在细胞外基质中的富集。所述ECM生物材料由前述细胞系合成并分泌到胞外。本发明构建了携带有胶原结合区域CBD的LAMP 2b融合蛋白，进而使外泌体具有结合到ECM成分之一胶原I上的能力，ECM生物海绵实现了对于外泌体的抓取和富集，并且采用反复冻融的方式制备富含外泌体的ECM生物材料，其可以作为药物或miRNA载体，实现对于疾病的药物递送。
外泌体细胞基质中的富集方法富含 ecm 生物材料应用

[发明专利]一种循环肿瘤细胞捕获方法-CN202210375256.5在审
发明人： 索广力;熊璇;赵喆;刘星志 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2022-04-11 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种循环肿瘤细胞捕获方法，包括以下步骤：将待测细胞液进行红细胞裂解后，加入设置有细胞芯片的培养容器中，细胞芯片包括基体以及阵列在基体表面的盲孔，待细胞进入盲孔中后加入培养基进行培养，培养过程中待测细胞液中的循环肿瘤细胞可增殖成细胞球，加入与循环肿瘤细胞特异性反应的荧光抗体，根据荧光和细胞增殖情况定位循环肿瘤细胞。利用规律排列的微孔、荧光抗体、细胞形态以及增殖情况可以精准鉴定和定位CTC，解决了现有技术中由于部分抗体假阳性造成的干扰从而引起的CTC捕获准确度不高以及CTC活力低的问题。
一种循环肿瘤细胞捕获方法

[发明专利]一种构建阿尔兹海默症细胞模型的方法及其用途-CN201911291544.7在审
发明人： 索广力;于延珍;梁瑜;乔勇;张书忙;肖同乾 -专利权人：上海大学;中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2019-12-16 - 公布日： 2021-06-18 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种构建阿尔兹海默症细胞模型的方法及其用途。所述方法包括：构建包含有APP蛋白编码基因的重组载体，再利用所述重组载体将所述APP蛋白的编码基因整合到宿主细胞的基因组中，进而构建形成所述细胞模型。本发明通过基因技术构建了过表达APP基因的CHO和HFF细胞系作为AD细胞模型，采取慢病毒转染的方式，可以保证AD细胞模型具有的AD病理特征的长久性和稳定性；并且，本发明的AD细胞模型可以稳定表达且能够分泌Aβ，可长久使用，并且具有稳定持续的Aβ沉积和tau蛋白磷酸化特征，可以很好的实现对阿尔兹海默症的病理特征的模拟，为阿尔茨海默症行相关药物的研发与筛选、机理的研究提供体外细胞研究平台可能。
一种构建阿尔兹海默症细胞模型方法及其用途

[发明专利]一种杂交瘤细胞株、其制备方法和应用-CN202011081642.0在审
发明人： 索广力;瞿伟伟 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2020-10-12 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种杂交瘤细胞株、其制备方法和应用。所述杂交瘤细胞株的制备方法包括：以人SARS‑CoV‑2 S重组蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠，之后取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，其后筛选出能够分泌新冠病毒表面S抗原单克隆抗体(简称“单抗”)的杂交瘤细胞。本发明还提供了利用所述杂交瘤细胞生产所述单抗的方法，所述单抗能够特异性结合新冠病毒表面S抗原，特异性强，效价高，有望实现新冠病毒的快速、敏感、准确、简便的检测，并能显著提高检测速度、检测灵敏度，大幅简化检测程序，而无需复杂漫长的PCR扩增过程和设备，尤其适合大量临床样本的快速筛查和即时检测，且所述单抗的制备方法产量高、稳定性好，生产成本低。
一种杂交瘤细胞株制备方法应用

[发明专利]一种含有CBD的融合基因、细胞系、液态ECM与应用-CN201810186004.1有效
发明人： 索广力;张书忙;乔勇;肖同乾 -专利权人：上海大学;中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2018-03-07 - 公布日： 2020-10-02 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种含有CBD的融合基因、细胞系、液态ECM与应用。所述含有CBD的融合基因为CBD‑IDE融合基因或CBD‑NEP融合基因，所述CBD‑IDE和CBD‑NEP融合基因的序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。含有前述CBD的融合基因的细胞系能够稳定表达且分泌生长因子IDE和NEP并结合在细胞外基质上。所述液态ECM由前述细胞系合成并分泌到胞外。本发明通过基因技术构建了携带有CBD的融合基因，进而使其所表达的IDE和NEP蛋白结合到ECM的胶原I上，达到在ECM上富集的目的，实现对阿尔兹海默症的治疗。
一种含有 cbd 融合基因细胞系液态 ecm 应用

[发明专利]富含血管内皮生长因子a的片状细胞外基质材料、其制备方法及应用-CN201911390844.0在审
发明人： 索广力;曹俊俊;乔勇 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2019-12-30 - 公布日： 2020-05-01 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种富含血管内皮生长因子a的片状细胞外基质材料、其制备方法及应用。所述制备方法包括：构建包含有CBD‑VEGFa融合基因的重组载体，再利用所述重组载体将所述CBD‑VEGFa融合基因导入宿主细胞，进而构建能够表达所述血管内皮生长因子a的重组细胞；将所述重组细胞接种到培养皿上进行培养；将附着在培养皿上的重组细胞冻干，获得富含血管内皮生长因子a的片状细胞外基质。本发明构建了携带有胶原结合区域的VEGFa，进而使VEGFa蛋白结合到ECM的胶原I上，达到在ECM上富集的目的，本发明制备的富含VEGFa的片状细胞外基质材料可以诱导间充质干细胞分化成内皮细胞。
富含血管内皮生长因子片状细胞基质材料制备方法应用

[发明专利]三维单细胞来源细胞球生产芯片、其制备方法及应用-CN201811114650.3在审
发明人： 索广力;乔勇 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2018-09-25 - 公布日： 2019-01-11 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种三维单细胞来源细胞球生产芯片，其包括基底和形成于基底表面的图案微阵列，所述图案微阵列包括彼此间隔设置的多个图案，所述基底表面是电中性的，所述图案由带正电荷的材料形成。本发明还公开了所述芯片的制备方法和应用。例如，其中一种基于所述芯片的单细胞来源间充质干细胞球的生产方法包括：利用所述芯片进行3‑5天的三维培养后，形成的细胞球可通过磷酸盐缓冲液等稀释，并直接离心收集。本发明的所述芯片结构简单，成本低廉，易于制作，而基于所述芯片的单细胞来源间充质干细胞球生产方法可大量筛选并生产高质量、均一化来源的单细胞来源细胞球，可靠性好、稳定性高、高通量，可以很好地满足基础研究和临床应用的需求。
芯片来源细胞图案间充质干细胞基底表面微阵列生产三维制备方法和应用磷酸盐缓冲液材料形成基础研究间隔设置离心收集临床应用三维培养芯片结构电中性高通量均一化细胞球正电荷基底稀释制备筛选制作应用

[发明专利]金纳米探针、金纳米探针试纸，其制备方法及应用-CN201410456201.2在审
发明人：林家骅;黄志清;杨令延;翁承毅;于建涛;索广力 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2014-09-10 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明公开了一种金纳米探针，所述探针包括金纳米粒子以及包覆于所述金纳米粒子表面的铅化合物。其制备方法包括步骤：制备金纳米粒子溶液；将金纳米粒子溶液与铅离子溶液加入到甘氨酸-氢氧化钠溶液中反应，使铅化合物包覆于所述金纳米粒子的表面，获得所述金纳米探针。本发明还公开了一种金纳米探针试纸，包括试纸主体以及吸附于所述试纸主体上金纳米探针。本发明还公开了前述的金纳米探针以及金纳米探针试纸在检测水样中亚砷酸浓度的应用。
纳米探针试纸制备方法应用

[发明专利]环境可吸入颗粒体外安全检测装置及方法-CN201410320487.1在审
发明人：林家骅;范兰兰;黄志清;索广力;孙哲琳 -专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所
申请日： 2014-07-04 - 公布日： 2016-01-06 - 主分类号： G01N15/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种环境可吸入颗粒体外安全检测装置及方法。该安全检测装置包含环境可吸入颗粒物采样单元、颗粒物暴露单元等，所述颗粒物暴露单元包括气液界面暴露装置。该检测方法包括：将待测物置入气液界面暴露空间；向所述气液界面暴露空间输入环境可吸入颗粒物，并使所述环境可吸入颗粒物在所述气液界面暴露空间内均匀分布，同时监测进入所述气液界面暴露空间的环境可吸入颗粒物浓度；经过预设时间后，检测所述待测物暴露于所述环境可吸入颗粒物后所受影响。利用本发明可以高仿真的模拟真实人体暴露环境，并更为准确地检测细胞暴露于可吸入颗粒后所产生的毒害影响。
环境吸入颗粒体外安全检测装置方法

[发明专利]一种表达人骨形态发生蛋白的方法及其专用表达载体-CN200410096493.X有效
发明人： 索广力;陈冰;薛勇彪;戴建武 -专利权人：中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2004-12-02 - 公布日： 2006-06-07 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达人骨形态发生蛋白的方法及其专用表达载体。本发明所提供的人骨形态发生蛋白植物表达载体，是在花椰菜花叶病毒的35S启动子下游插入有人骨形态发生蛋白的成熟肽编码基因(并去掉5′端12个氨基酸的肝素结合区)的pBI121质粒。本发明所提供的表达人骨形态发生蛋白的方法，是将上述人骨形态发生蛋白的植物表达载体导入烟草中得到转基因烟草，培育转基因烟草细胞，表达得到人骨形态发生蛋白。该方法可表达人骨形态发生蛋白占全蛋白的0.02％。
一种表达形态发生蛋白方法及其专用载体

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