本发明涉及一种人类乳头瘤病毒衣壳蛋白L1(HPVL1)多肽及其制备与应用。该人类乳头瘤病毒衣壳蛋白L1多肽,氨基酸序列为N端---Cys Thr Leu Thr Ala Asp Val Met Thr Tyr Ile His---C端的肽段,或者是包含这一氨基酸序列且长度小于50个氨基酸的肽段。本发明是通过对18种低危型和高危型HPV亚型(6,11,16,18,52,58等)的L1蛋白表位预测和多序列比对,筛选出的一条非常保守且位于蛋白质表面的肽段,诱导产生的抗体可以与多型别HPVL1反应,可用于多种型别HPVL1的检测,尤其是在人类宫颈癌癌前病变检测中的应用,针对这一肽段的抗体还可用于多型别HPVL1的纯化、制备。另外,本发明还提供这一肽段作为多种型别HPV抗血清和单克隆抗体被检测物的应用。