本申请涉及免疫分析领域，尤其涉及一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的N末端片段、编码基因、多克隆抗体及其制备方法和应用；所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；所述N末端片段蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；所述多克隆抗体特异性结合所述N末端片段蛋白；通过设计磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的N末端片段蛋白的编码基因的核苷酸序列及蛋白制备方法，其在修饰折叠阶段同天然GPC3的方式相似，提高N末端片段蛋白的折叠修饰的准确性，由于设计的核苷酸序列的5’端较为简单，使得转录阶段形成的mRNA无复杂的二级结构，从而减少翻译阶段的困难，提高翻译效率，从而提高N末端片段蛋白的表达量。
本申请涉及肿瘤免疫诊断技术领域，尤其涉及一种抗磷脂酰肌醇蛋白多糖‑3的单克隆抗体、多核苷酸及其制备方法和应用；所述单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的重链区CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的重链区CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的重链区CDR3；所述轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的轻链区CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的轻链区CDR2和氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示的轻链区CDR3；所述单克隆抗体对GPC3抗原的解离常数KD(M)为1.21E‑11，属于高亲和力N末端抗体，适合应用于GPC3临床血清样本的检测。
