本发明提供了一种将过表达蛋白锚定于细胞膜的微小蛋白及其应用，属于分子生物技术领域。本发明的将过表达蛋白锚定于细胞膜的微小蛋白为(a)或(b)：(a)由SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成的微小蛋白；(b)将SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有将过表达蛋白锚定于细胞膜的微小蛋白。本发明的微小蛋白不仅为外源蛋白提供了定向表达的方法，而且为在细胞表面定位表达外源蛋白用于生物转化提供工具。
本发明属于基因测序领域，具体涉及一种FH测序文库的构建方法和引物组及试剂盒。该FH测序文库的构建方法，包括如下步骤：获得DNA样本；利用第一引物集和第二引物集分别对DNA样本进行多重PCR扩增，分别得到第一扩增产物和第二扩增产物；将第一扩增产物和第二扩增产物混合，得到混合产物；利用测序接头引物对混合产物进行扩增，得到测序文库；其中，所述第一引物集的序列如SEQ ID NO.1‑130所示；所述第二引物集的序列如SEQ ID NO.131‑260所示。该FH测序文库的构建方法，具有高检测覆盖度和高均一性、样本消耗量少、样本要求低和大量节省检测成本的优点，并能为临床发现新发基因突变提供技术基础。
