本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白、应用及分离纯化方法，所述蛋白的氨基酸序列由SEQ ID NO:1所示，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或多个氨基酸序列获得具有同等活性的蛋白。本发明还提供了所述抗真菌效应蛋白的编码基因、表达载体或工程菌，本发明还提供了假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白的分离纯化方法。所述蛋白在抗真菌药剂中的应用以及所属蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明涉及的YPK_D305抗真菌基因属于一个几丁质酶，该基因具有更高的抗真菌活性，靶向作用真菌范围也更广泛，为病原真菌防治提供策略和途径，具有较大的学术价值和潜在的应用前景。
本发明公开了一种大肠杆菌突变体的构建方法及外膜囊泡的制备方法。其包括大肠杆菌外膜囊泡高产突变体的构建和外膜囊泡的提取，所述突变体是通过CRISPR‑Cas9系统同时敲除大肠杆菌Tol‑pal内膜系统蛋白(如SEQ ID NO:1所示)和外膜磷脂积累相关蛋白(如SEQ ID NO:2所示)进行构建。所述外膜囊泡的提取包括：将菌株培养于LB液体培养基，将培养上清过滤除菌、超滤浓缩和超速离心，最终获得外膜囊泡。本发明中双基因的缺失发挥了协同作用，与现有单双基因突变株相比，不仅可显著提高外膜囊泡产量，较原始菌株提高了约180倍，而且所得外膜囊泡具有高纯度、粒径大小适当等特点，是一种低廉、高效的制备方法，解决了外膜囊泡产量不足的问题，展现了其良好的应用前景。
本发明公开了一株解磷菌在盐碱地中的应用。该菌分离自甘肃省庆阳市小崆峒沟盐碱土壤中，经鉴定为Mixta theicola，命名为米克斯塔菌N1，该菌保藏单位为：中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国武汉武汉大学，保藏日：2021.11.1，保藏登记号为：CCTCC M 20211350。该菌株能够在低温和较高盐碱环境中生存，并且在低温盐碱环境中具有较强的解磷能力，该菌株在低温盐碱条件下的解磷特性，可以有效为盐碱土壤中植物生长提供有效的磷，并且适合应用于我国寒冷地区广泛分布的盐碱地，为提高我国寒冷地区盐碱土壤的磷供给及盐碱地的开发利用提供了解决办法。
本发明公开了一种蛋白型锰离子螯合剂、免疫抑制剂及应用，属于基因工程领域，包括假结核耶尔森氏菌转锰效应蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；在所述的蛋白上螯合Mn2+。转锰效应蛋白可特异并高效与锰离子结合，且在增强细菌的致病能力方面发挥了重要作用，具体体现在该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株降低了假结核耶尔森氏菌对小鼠的致病能力，并且该效应蛋白编码基因缺失突变体菌株更能激活宿主细胞的天然免疫应答；本发明公开的转锰效应蛋白在制备特异性锰离子螯合剂以及免疫抑制剂方面均具有潜在应用前景，同时为增强细菌抗环境胁迫能力提供了新的途径。
本发明公开了假结核耶尔森氏菌效应蛋白及其应用，属于生物化学、分子生物学和基因工程等技术领域，包括：Tce1，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示或某一个位点氨基酸的突变；和/或Tce2，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示或某一个位点氨基酸的突变。所示的氨基酸序列中通过替换、缺失或插入一个或几个氨基酸所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述效应蛋白的编码基因、表达载体、工程菌，类假结核耶尔森氏菌效应蛋白的分离纯化方法，所述蛋白在辅助治疗肠道耐药致病细菌感染药物制备过程中的应用。本发明涉及的Tce1、Tce2效应蛋白具有更安全、更广谱的杀菌活性。
本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌抗真菌蛋白及其编码基因和应用，属于基因工程技术领域，所述抗真菌蛋白为由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或几个氨基酸序列所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述抗真菌蛋白的编码基因、表达载体、工程菌，本发明还提供了类假结核耶尔森菌抗真菌蛋白的分离纯化方法。所述蛋白在抗真菌药剂中的应用以及所述蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明涉及的YPK_AFP1001抗真菌基因及蛋白具有更高，更广谱的抗真菌活性。
本发明公开了一种假结核耶尔森氏菌杀虫蛋白及其编码基因和应用，属于基因工程和生物农药技术领域，所述杀虫蛋白为由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，或在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列中经取代、缺失或插入一个或几个氨基酸序列所获得的具有同等活性的蛋白质。本发明还提供了所述杀虫蛋白的编码基因、表达载体、工程菌、本发明还提供了类假结核耶尔森菌杀虫蛋白分离纯化方法。所述蛋白在杀虫药剂中的应用以及所述蛋白的编码基因在转化植物中的应用。本发明提供了一种杀虫蛋白的编码基因；本发明的杀虫蛋白可以用于杀死大蜡螟、棉铃虫、甜菜夜蛾和亚洲玉米螟等鳞翅目害虫，提高转基因作物的杀虫能力。
本发明提供了一株可高效降解木质素的乙酸钙不动杆菌，其特征在于：乙酸钙不动杆菌Acinetobacter calcoaceticus LG‑1，已在中国典型培养物保藏中心（CCTCC）登记保藏；保藏日期为2014年3月12日；编号为CCTCC M 2014079。该菌对木质素具有高效降解作用，其可以在以木质素作为唯一碳源的木质素无机盐培养液中生长，且其生长曲线图显示该菌的生长效果明显高于作为阳性对照的红球菌和作为阴性对照的大肠杆菌，本菌株可应用于造纸，能源，环保等领域，利用其对碱性木质素的高效降解效率进而解决碱木质素在各行业中降解难度大的问题。
本发明公开了一株具有促植物抗干旱作用的克雷伯氏菌及其应用，代号为LTGPAF‑6F，该菌株于2016年1月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC M 2016053，分类命名为Klebsiella sp.LTGPAF‑6F。本发明所述菌株LGPAF‑6F具有产胞外多糖、吲哚乙酸，能自生固氮等促生抗逆性状。将该菌株制备成108～109CFU/mL的活菌制剂，接种到小麦幼苗根部，能显著增加小麦幼苗生物量，提高小麦幼苗对干旱胁迫的抵御能力。本发明所述克雷伯氏菌LTGPAF‑6F可以作为生物菌剂，在旱区农业生产实践中进行应用，提高植物抗旱能力。
一个新型细菌抗逆功能基因及其表达产物与应用，所述基因的核苷酸序列如SED ID NO：1所示。本发明还包括新型细菌抗逆功能基因的表达产物分支硫醇抗氧化物酶MPx与应用。本发明之新型细菌抗逆基因可克隆到表达载体pET28a上，然后转到BL21(DE3)菌株中表达，并用温和破碎法纯化表达产物，即可得到分支硫醇抗氧化物酶MPx，该表达产物可显著提高细菌的抗逆性。实验证明，在100mM过氧化氢、11mM异丙苯-OOH和120mMLA-OOH处理下，Δmpx突变体的存活率下降约20％～35％，野生型中Pmpx的启动子活性在35mM H2O2，5.5mM异丙苯-OOH和60mMLA-OOH处理下分别提高了38.7％，44.5％和32.3％。
