本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带海绵凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及用途,该海绵凝集素基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。重组溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将AVL的基因序列通过Xba I和Bgl II位点插入pCB质粒,获得pCB‑AVL质粒;(B)pCB‑AVL质粒和痘苗病毒通过在细胞内的重组,经筛选和鉴定后,获得携带海绵凝集素基因的溶瘤痘苗病毒。本发明的溶瘤痘苗病毒oncoVV‑AVL对乳腺癌细胞、肝癌细胞、结直肠癌细胞以及胶质瘤细胞的体外抑制效果显著,且呈剂量依赖,同时对多种肿瘤动物模型也具有显著的治疗效果,因此本发明显著提高了溶瘤痘苗病毒在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤能力。
本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带SIKE基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及应用,该SIKE基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。重组溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将SIKE的基因序列通过Xba I和Bgl II位点插入pCB质粒,获得pCB‑SIKE质粒;(B)pCB‑SIKE质粒和痘苗病毒通过在细胞内的重组,经筛选和鉴定后,获得携带SIKE基因的溶瘤痘苗病毒。通过实验证实,本发明的溶瘤痘苗病毒oncoVV‑SIKE不仅对肝癌细胞、乳腺癌细胞或胶质瘤细胞等多种肿瘤细胞的药物体外抑制效果显著,且呈剂量依赖,而且病毒复制水平显著提高,同时对肿瘤动物模型也具有显著的治疗效果。因此本发明可用于制备抗肿瘤的病毒药物,为肿瘤的病毒治疗提供了新的靶点,具备广阔的临床应用前景。
本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带鲎凝集素基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及应用。溶瘤痘苗病毒携带鲎凝集素基因,鲎凝集素基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示;溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将鲎凝集素的基因序列通过Xba I和Bgl II位点插入pCB质粒,获得pCB‑TTL质粒;(B)pCB‑TTL质粒和痘苗病毒通过在细胞内的重组,经筛选和鉴定后,获得携带鲎凝集素基因的溶瘤痘苗病毒。本发明的溶瘤痘苗病毒不仅对多种肿瘤细胞具有显著抑制效果,而且能显著抑制肿瘤细胞的抗病毒因子水平和显著提高ERK磷酸化水平,有利于病毒复制;此外,携带TTL基因后溶瘤痘苗病毒的复制水平也显著提高。
本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种携带CTTNBP2NL基因的溶瘤痘苗病毒、构建方法及应用,该CTTNBP2NL基因的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。重组溶瘤痘苗病毒的构建方法包括两个步骤:(A)将CTTNBP2NL的基因序列通过Xba I和Bgl II位点插入pCB质粒,获得pCB‑TTL质粒;(B)pCB‑TTL质粒和痘苗病毒通过在细胞内的重组,经筛选和鉴定后,获得携带CTTNBP2NL基因的溶瘤痘苗病毒。本发明的溶瘤痘苗病毒不仅对多种肿瘤细胞具有显著抑制效果,而且显著提高了溶瘤痘苗病毒在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤能力,在抑制肿瘤生长以及延长荷瘤小鼠生存时间上都得到了体现,为肿瘤的病毒治疗提供了新的靶点,具备广阔的临床应用前景。