本发明公开了一种用于构建基因缺失型拟南芥突变体植株的向导RNA、拟南芥突变体植株及其制备方法,所述向导RNA包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的一对序列。所述制备方法包括:根据向导RNA设计引物对;采用所述的引物对进行PCR扩增、纯化、酶切后,与载体连接后获得重组质粒;采用重组质粒转化感受态细胞后筛选、验证,获得用于敲除拟南芥中待敲除基因的表达载体;将获得的表达载体转化农杆菌并浸花后,筛选得到拟南芥突变体植株。本发明的技术方案克服了目前植物育种等性能上的不足,能够将拟南芥的抽薹期提前,为拟南芥在植物育种方向上提供了重要价值。
本发明公开了一种用于敲除拟南芥ROS1基因的向导RNA、方法及应用,所述向导RNA包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2的一对序列。所述方法采用如上述所述的向导RNA。本发明的技术方案能够有效敲除ROS1基因的gRNA序列,并基于此获得不同拟南芥品种的等位突变体,进一步达到鉴定成本低,时间短,且能够针对性获得不同拟南芥品种ROS1基因的相同位点突变体。
本发明公开了一种泽泻鲨烯环氧化酶及其应用,所述泽泻鲨烯环氧化酶具有SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。本发明首次克隆了泽泻鲨烯环氧化酶基因全长,并提供了一种泽泻鲨烯环氧化酶,以及该酶基因的原核表达方法,并制得了该酶蛋白的多克隆抗体,提供了该蛋白的ELISA检测方法和Western Blot检测方法,本发明可用于提高泽泻原萜烷型三萜生物合成效率及监测药效成分动态积累过程。