本发明涉及一种HPV分型检测用的核酸组合物、检测芯片及其制作方法、检测试剂盒及其使用方法。该HPV分型检测用的核酸组合物,包括PCR扩增引物和检测探针。其中,PCR扩增引物包括用于扩增HPV病毒L1区的变异区域的病毒PCR扩增引物对。所述检测探针包括14个序列或互补序列中含有分别如SEQ ID NO:1~14所示序列的病毒寡核苷酸探针。该HPV分型检测用的核酸组合物针对HPV病毒L1区的变异区域设计病毒PCR扩增引物对,因而,一次PCR扩增就能将含有14个高危型HPV的变异区域的目标片段扩增出来,再针对各HPV类型设计特异性的病毒寡核苷酸探针,一次扩增就能检测14个HPV亚型,整个检测过程简单,高效。