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[发明专利]一种粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗和应用-CN202211597973.9在审
发明人： 孙石静;赵亚荣;丁家波;蒋卉;宋程;李筱英;汤波;闫国晖;刘奇;聂思静;张学贤;王敏;陈硕;马阿丽;何杰 -专利权人：北京科牧丰生物制药有限公司;兆丰华生物科技（南京）有限公司;兆丰华生物科技（南京）有限公司北京生物医药科技中心
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明涉及兽用生物制品领域，特别涉及一种粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗和应用。所述布鲁氏菌为自然分离的粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒菌株，命名为RM101，其保藏编号为：CGMCC No.25728。由本发明粗糙型羊种布鲁氏菌RM101株制成的布鲁氏病活疫苗具有良好的安全性、免疫原性和效力，可用于孕畜免疫，不会导致流产，弥补了现有疫苗不能用于孕畜的缺陷。本发明的疫苗可通过微量凝集试验实现鉴别诊断，解决现有布病疫苗无法实现临床区分疫苗免疫和野菌感染的鉴别诊断的技术问题。
一种粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗应用

[发明专利]一株重组A型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法-CN201910284347.6有效
发明人： 孙石静;王芳;蒋卉;朱良全;秦玉明;许冠龙;丁家波;彭小薇;冯宇;范学政;王楠 -专利权人：中国兽医药品监察所
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： A61K39/10 文献下载
摘要：本发明涉及一株重组A型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗生产方法。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株，以蔗糖自杀质粒为载体，将含有特定启动子序列的A型口蹄疫病毒VP1基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中，成功构建了能够高效表达型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌RA343‑VP1‑FMDV‑A株。该重组疫苗株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性，对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性，而且该重组菌免疫动物后，能产生针对FMDV VP1抗体，从而实现对FMD的免疫保护。该重组疫苗株按特定工艺开发成具有耐热保护特点的新型疫苗，免疫动物后能同时实现对布病和口蹄疫的双重免疫保护。
重组口蹄疫病毒 vp1 基因粗糙布鲁氏菌及其疫苗生产方法

[实用新型]一种数字展厅用灯箱-CN202120302368.9有效
发明人： 孙石静;白雪波;李依航;刘寅;王宏;才俊;孙鹏 -专利权人：北京天际数字技术股份公司
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2021-10-22 - 主分类号： G09F13/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种数字展厅用灯箱，包括安装底座一，所述安装底座一上可拆卸设有外壳体，所述外壳体内固定设有固定灯座，所述固定灯座内设有照明灯条，所述照明灯条外可拆卸安装有防扩散装置，所述外壳体内对称设有松紧度调节装置，所述松紧度调节装置包括旋转筒，所述旋转筒的一端设有连接杆，所述连接杆的一端通过连接轴承一与所述外壳体的一侧内壁连接，所述旋转筒上开设有固定槽，所述旋转筒的另一端设有螺纹连接杆，所述螺纹连接杆通过连接轴承二与所述外壳体的另一侧内壁连接，所述螺纹连接杆上设有紧固螺纹套，有益效果：这样的装置结构简单，安装方便，可以有效的对广告布料15进行收卷拉紧，防止其出现褶皱，影响美观。
一种数字展厅灯箱

[实用新型]一种数字展厅智能化控制系统-CN202120302369.3有效
发明人： 孙石静;白雪波;李依航;刘寅;王宏;才俊;孙鹏 -专利权人：北京天际数字技术股份公司
申请日： 2021-02-03 - 公布日： 2021-09-28 - 主分类号： G05B19/042 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种数字展厅智能化控制系统，包括网络监控单元、云端服务器、工作本体和显示屏，所述工作本体外壁一侧固定设有设置板，所述设置板外表面固定设有保护仓，所述保护仓内部设有气缸，所述气缸的输出端固定设有横板，所述横板底端固定设有轴承。有益效果：清洗软棉本身是属于轻微挤压出去的，且清洗软棉本身具有一定的复原性，避免轻微挤压造成清洗软棉本身无法复原回原状态，清理完成后，清洗软棉缩回保护仓，对其清洗软棉进行防尘保护，而设置的密封板则会卡进保护仓侧面上的穿口内，因此使其保护仓为密封状，散热风机将其外界空气吸进工作本体内部，内部热量通过出风管排出，过滤网设置，有效防止灰尘进入内部。
一种数字展厅智能化控制系统

[发明专利]一种PCV2型杆状病毒、猪肺炎支原体、猪流感病毒、副猪嗜血杆菌四联灭活疫苗-CN202011629275.3在审
发明人：刘奇;车艳杰;于萍萍;王亚玲;汤波;刘飞;孙石静;聂思静;刘运平;张渊魁;王敏 -专利权人：北京科牧丰生物制药有限公司;兆丰华生物科技（南京）有限公司;兆丰华生物科技（南京）有限公司北京生物医药科技中心;兆丰华生物科技（福州）有限公司
申请日： 2020-12-31 - 公布日： 2021-02-23 - 主分类号： A61K39/295 文献下载
摘要：本发明属于兽用疫苗领域，具体涉及一种猪圆环病毒2型杆状病毒、猪肺炎支原体、猪流感病毒、副猪嗜血杆菌四联灭活疫苗，并进一步公开其制备方法和应用。本发明所述四联灭活疫苗，含有灭活的猪圆环病毒2型杆状病毒表达的Cap蛋白、灭活的猪肺炎支原体、灭活的猪流感病毒H1N1亚型病毒、灭活的副猪嗜血杆菌4型、5型、13型和疫苗的佐剂；四种抗原之间无干扰，可实现一针免疫四种保护，一次免疫即可预防四种疫病；同时，从攻毒保护和血清抗体水平看，其免疫效果达到或超过各商品单苗的水平，免疫持续期长，效力持久，具备了安全性好、制备方法简单、免疫方便、降低免疫成本等优点。
一种 pcv2 杆状病毒肺炎支原体流感病毒嗜血杆菌四联灭活疫苗

[发明专利]一种猪流行性腹泻病毒稳定传代的培养方法-CN201610282129.5有效
发明人：何海蓉;王正春;陈坚;孙石静;王秋娟 -专利权人：中崇信诺生物科技泰州有限公司
申请日： 2016-04-29 - 公布日： 2020-06-16 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种猪流行性腹泻病毒稳定传代的培养方法。本发明使用含有低浓度胰酶、磷酸胰蛋白肉汤、酵母提取液、二甲基亚砜、双抗、胚牛血清的a‑MEM培养基，通过对猪流行性腹泻病毒与Vero细胞预处理的过程，使在Vero细胞中难以稳定传代的猪流行性腹泻病毒的流行毒株，可稳定传至130代以上，TCID50达108.0/ml以上；同时进行初步鉴定，提高了检测阳性率，大大缩短了检测周期，这对于分离猪流行性腹泻病毒的田间野毒、稳定传代并致弱、制备疫苗以预防猪流行性腹泻是重要的突破。
种猪流行性腹泻病毒稳定传代培养方法

[发明专利]一株重组O型口蹄疫病毒VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法-CN201910284341.9在审
发明人：蒋卉;丁家波;朱良全;孙石静;彭小薇;李秋辰;范学政;秦玉明;王芳;许冠龙;冯宇 -专利权人：中国兽医药品监察所
申请日： 2019-04-10 - 公布日： 2019-07-12 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一株重组O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因的粗糙型布鲁氏菌及其疫苗生产方法。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株，以蔗糖自杀质粒为载体，将含有特定启动子序列的O型口蹄疫病毒VP1基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中，成功构建了能够高效表达型FMDV VP1基因的重组布鲁氏菌RA343‑VP1‑FMDV‑O株。该重组疫苗株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性，对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性，而且该重组菌免疫动物后，能产生针对FMDV VP1抗体，从而实现对FMD的免疫保护。该重组疫苗株按特定工艺开发成具有耐热保护特点的新型疫苗，免疫动物后能同时实现对布病和口蹄疫的双重免疫保护。
布鲁氏菌粗糙重组疫苗株免疫动物疫苗生产布鲁氏菌病密码子优化免疫保护性启动子序列高效表达工艺开发免疫保护双重免疫新型疫苗原始亲本自杀质粒基因组弱毒株重组菌蔗糖耐热构建抗体亲本无痕口蹄疫保留成功

[发明专利]一种全悬浮细胞培养生产猪圆环病毒2型抗原的方法-CN201410313057.7有效
发明人：何海蓉;孙石静;王正春;董彦鹏;何叶峰;胡芳;张志华;缪芬芳;刘怡;姜冲 -专利权人：江苏南农高科技股份有限公司
申请日： 2014-07-02 - 公布日： 2017-04-26 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明涉及一种应用反应器全悬浮细胞培养生产猪圆环病毒2型(PCV2)抗原的方法，本发明使用生物反应器全悬浮无血清培养生产PCV2抗原，制备灭活疫苗。该发明方法可以大量降低生产成本，相比转瓶工艺单位抗原成本降低90％以上，投入产出比提高4～10倍，较传统反应器培养工艺单位抗原成本降低50％～70％，产量提高3～5倍，此发明无需载体，无血清残留，生产的疫苗安全性更高，同时制品的批间差异小，质量稳定易于控制，可明显提高制品的产量及质量。
一种悬浮细胞培养生产圆环病毒抗原方法

[发明专利]一种大规模高密度生产猪圆环病毒2型抗原的方法-CN201410261474.1有效
发明人：董彦鹏;孙石静;何叶峰;缪芬芳;何海蓉;张志华;胡芳 -专利权人：江苏南农高科技股份有限公司
申请日： 2014-06-12 - 公布日： 2014-08-27 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种大规模高密度生产猪圆环病毒2型抗原的方法。本发明使用生物反应器微载体悬浮培养工艺代替现有转瓶培养工艺生产猪圆环病毒2型抗原，该方法可以大量降低生产成本和提高产量，相比转瓶工艺单位抗原成本降低80％～90％，生产周期减少7天，产量提高3～10倍；因为其可以多次收获抗原，因而较传统反应器培养工艺单位抗原成本降低40％～50％，产量提高3～5倍，此发明生产的抗原无血清残留，生产的疫苗安全性更高，同时制品的批间差异小，质量稳定易于控制，可明显提高制品的产量及质量。
一种大规模高密度生产圆环病毒抗原方法

[发明专利]一种在大肠杆菌中表达瑞替普酶的方法-CN200710303763.3无效
发明人： 孙石静;张春娥;蔡国平 -专利权人：清华大学深圳研究生院
申请日： 2007-12-21 - 公布日： 2008-06-11 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明公开了一种在大肠杆菌中表达瑞替普酶的方法。本发明所提供的在大肠杆菌中表达瑞替普酶的方法是将瑞替普酶基因插入到原核表达载体的多克隆位点，得到重组表达载体，再将该重组表达载体与质粒pREP4共转化大肠杆菌，得到重组大肠杆菌，培养该重组大肠杆菌，表达得到瑞替普酶。本发明方法可以大大提高瑞替普酶在大肠杆菌中的表达量，用本发明方法培养上述重组大肠杆菌，每升培养基中瑞替普酶的表达量占总蛋白的48±5％。本发明方法简单易行，能降低生产成本，为瑞替普酶的普及和应用奠定坚实的基础，同时对大规模工业化生产重组外源蛋白具有重要的意义。
一种大肠杆菌表达瑞替普酶方法

[发明专利]用于转基因海带的通用载体及其在瑞替普酶表达中的应用-CN200410013850.1无效
发明人：沈子龙;廖建民;孙石静;张新元;秦松 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2004-01-08 - 公布日： 2004-12-22 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，创建一种用于海带转基因的通用表达载体，构建一种用于在海带中表达具有生物活性的蛋白质、多肽的通用表达载体，及其在实现目的基因在海带中活性表达的应用，尤其是在海带中表达瑞替普酶的应用。该载体具有通用性，可以在SV40启动子下游的多克隆位点(HindIII～Xba I)插入任何目的片段。用bar基因替代原质粒中的筛选标志基因β－Galactosidase基因，Bar基因可以编码PAT酶，可以用bar基因作为筛选标志基因用于转基因海带的筛选。以该载体在海带中表达结构比较复杂的外源基因，例如瑞替普酶基因的表达产物不需要复性就具有生物活性，从而降低生产成本。
用于转基因海带通用载体及其瑞替普酶表达中的应用

[发明专利]组织型纤溶酶原激活剂突变体的复性分离纯化方法-CN200410013849.9无效
发明人：沈子龙;廖建民;孙石静;张新元 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2004-01-08 - 公布日： 2004-12-22 - 主分类号： C12N9/00 文献下载
摘要：本发明属于医药生物技术重组蛋白分离纯化技术领域，公开了一种用低廉、普通级别的常用试剂咪唑和尿素，以它们的浓度梯度在合适的条件下，使在大肠杆菌中与(His)₆融合表达的组织型纤溶酶原激活剂瑞替普酶正确折叠成有活性、并可在使瑞替普酶复性的同时分离纯化得到纯度达到96％的瑞替普酶的方法。该方法不但能简化复性、分离纯化的程序，还能提高复性率，最终提高瑞替普酶的产率，大大降低生产成本，并能应用于工业化生产。
组织型纤溶酶原激活剂突变体复性分离纯化方法

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