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[发明专利]去环氧基催化活性多肽用于呕吐毒素解毒的用途-CN202010146399.X有效
发明人： 孔令让;王宏伟;孙思龙;侯冰倩 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2020-03-05 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开去环氧基催化活性多肽用于呕吐毒素解毒的用途。本发明的多肽能够在缓和的条件下催化呕吐毒素与谷胱甘肽反应去除环氧基，并产生无毒无害的谷胱甘肽化衍生物，从而实现呕吐毒素的解毒和脱毒。该多肽在农业、食品、饲料和医药等领域具有广泛用途。
去环氧基催化活性多肽用于呕吐毒素解毒用途

[发明专利]一种长穗偃麦草八氢番茄红素合成酶基因PSY-E2克隆转化的方法及其应用-CN202211015966.3在审
发明人： 孔令让;周婷婷;马信;李文欣;赵微;侯冰倩 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2022-08-23 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明提供了一种长穗偃麦草八氢番茄红素合成酶基因PSY‑E2克隆转化的方法及其应用。在对小麦‑长穗偃麦草(7D/7el2)易位系的材料表型分析发现，易位系材料小麦精面粉色泽为黄色，通过对长穗偃麦草(Thinopyrum elongatum)全基因组测序，酵母文库筛选，发现长穗偃麦草八氢番茄红素合成酶PSY‑E2基因可能参与调控小麦胚乳叶黄素的形成。根据长穗偃麦草基因组设计特异性引物，最终克隆得到PSY‑E2基因。通过转基因技术将长穗偃麦草PSY‑E2基因转入普通小麦品种Fielder中，发现转入PSY‑E2后的转基因小麦面粉显著变黄，叶黄素含量显著上升。
一种长穗偃麦草番茄合成基因 psy e2 克隆转化方法及其应用

[发明专利]一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记及其应用-CN202211018120.5在审
发明人： 孔令让;李学峰;李冬;宣宇 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2022-08-24 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测小麦抗茎基腐病基因Fhb7的分子标记及其应用，其中PCR引物序列为K‑7415F和K‑7415R。检测步骤如下：采用CTAB法提取小麦‑长穗偃麦草短片段易位系叶片的全基因组DNA；利用分子标记K‑7415对提取DNA进行PCR扩增；PCR产物在1％琼脂糖凝胶中上样电泳，电泳结束后用AlphaInnotechV.1.2型凝胶成像系统照相并观察结果。本发明中的分子标记K‑7415与抗茎基腐基因Fhb7紧密连锁，利用该分子标记可提高分子标记辅助选择的效率，并且可直接应用于小麦抗茎基腐病生产实践，为通过分子标记辅助选择的方法选育携带Fhb7的抗茎基腐病小麦改良系提供技术支撑。
一种检测小麦抗茎基腐病基因 fhb7 分子标记及其应用

[发明专利]小麦-长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用-CN202211603429.0在审
发明人： 孔令让;李学峰;宣宇;李冬 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2022-12-13 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： A01H1/02 文献下载
摘要：本发明属于小麦遗传育种领域，公开了一种小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系的创制方法及其应用。本发明公开了小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系以及遗传改良系的创制方法，本发明还公开了小麦‑长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位系中与小麦抗茎基腐病基因Fhb7紧密连锁的分子标记K‑7396。本发明结合分子标记辅助选择、原位杂交鉴定技术和茎基腐病抗性鉴定，打破了Fhb7与PSY‑E2的连锁，易位系不仅保持了稳定的茎基腐病抗性，而且面粉色泽呈现白色，可以更好地在生产上推广应用。
小麦长穗偃麦草抗茎基腐病短片段易位创制方法及其应用

[发明专利]用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用-CN202210914093.3在审
发明人：秦冉;崔法;曹鸣苏;蔡益彪;王晨阳;董继梓;徐彗渊;吴永振;赵春华;孙晗;翟冬峰;孔令让 -专利权人：鲁东大学;山东农业大学
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明属于小麦育种技术领域，公开了用于检测小麦多性状相关的多重扩增引物组、方法及应用。所述用于检测小麦多性状相关QTL的多重PCR引物组包括：用于同时检测旗叶宽、株高、穗粒数、不育小穗数性状相关QTL的引物，DNA序列分别为：SEQIDNO：1、SEQIDNO：2、SEQIDNO：3、SEQIDNO：4。本发明利用多重PCR在一个PCR反应中使用一个模板和多对引物同时扩增多个目的片段的PCR反应。与单一PCR相比，提高了PCR的产率，也提高了DNA模板的利用率，环节少周期短。
用于检测小麦性状相关多重扩增引物方法应用

[发明专利]一种快速检测长穗偃麦草抗赤霉病基因的分子标记-CN201711161553.5有效
发明人：王宏伟;葛文扬;孔令让;马信 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-11-21 - 公布日： 2021-09-24 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速检测长穗偃麦草抗赤霉病基因的分子标记，以两个小麦‑长穗偃麦草异代换系7el1和7el2为亲本，构建F2分离群体，筛选出目标位点附近发生重组的单株并繁成株系，结合赤霉病表型鉴定技术，寻找与其紧密连锁的分子标记，用于小麦抗赤霉病育种、抗赤霉病形状的早期分子辅助选择，可以提高育种效率。
一种快速检测长穗偃麦草赤霉病基因分子标记

[发明专利]核酸分子在植物转基因、分子育种、病害防治和分子标记物中的用途-CN202010146400.9有效
发明人： 孔令让;王宏伟;孙思龙;葛文扬 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2020-03-05 - 公布日： 2021-09-21 - 主分类号： C12N15/57 文献下载
摘要：本发明公开核酸分子在植物转基因、分子育种、病害防治和分子标记物中的用途。本发明通过基因工程使编码去环氧基蛋白酶的核酸分子在植物内表达，从而高效去除单端孢霉烯族毒素的环氧基，直接减少植物体内毒素含量，同时还可提高作物的抗病能力，显著提高作物品质。本发明弥补了目前尚未有明确的基因可通过去环氧基催化单端孢霉烯族毒素进行解毒的空白，在植物转基因、分子育种、病害防治方面具有广阔的应用前景。
核酸分子植物转基因育种病害防治标记中的用途

[发明专利]一种快速检测长穗偃麦草抗叶锈病基因的分子标记及应用-CN201711161642.X有效
发明人：王宏伟;孔令让;吕忠璠;马信 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-11-21 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速检测长穗偃麦草抗叶锈病基因的分子标记及应用，借助于经过诱导的小麦‑长穗偃麦草抗叶锈病短片段易位系，结合小麦D基因组的参考序列，设计开发与其紧密连锁的分子标记Xsdau798，用于小麦抗叶锈病育种、抗叶锈病性状的早期分子标记辅助选择，以提高育种效率。
一种快速检测长穗偃麦草叶锈病基因分子标记应用

[发明专利]一种快速检测粗山羊草抗白粉病基因的功能标记及应用-CN201711161774.2有效
发明人： 孔令让;王宏伟;唐恒;胡立芹;宋时洋 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-11-21 - 公布日： 2021-08-24 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及小麦遗传学及其分子育种领域，尤其涉及粗山羊草抗白粉病基因功能标记的开发与应用。本发明在对粗山羊草抗白粉病基因Ml2147图位克隆的基础上，利用其候选基因特异的结构序列，开发了SDAU‑2147功能标记，并利用180多份粗山羊草自然种质进行验证。结果证明，本发明提供的功能标记具有快速、直接、高通量等特点，特异性高，可在较短时间内完成大批量材料中该抗病基因的筛选和表型预测工作，可有效服务于小麦抗白粉病育种工作。
一种快速检测山羊白粉病基因功能标记应用

[发明专利]一种小麦八氢番茄红素合成酶基因psy-e2的功能标记及其应用-CN201810337659.4有效
发明人： 孔令让;王彪;李学峰 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2018-04-16 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明公开了一种小麦八氢番茄红素合成酶基因psy‑e2的功能标记，其中PCR引物序列为PSY‑F和PSY‑R。检测步骤如下：采用Buffer S法提取小麦叶片的全基因组DNA；利用psy‑e2基因功能标记检测提取DNA进行PCR扩增；PCR产物进行PAGE电泳，采用银染法进行显色反应后观察结果。本发明中psy‑e2的功能分子标记不依赖于分子遗传作图，利用该功能标记可提高分子标记辅助选择的效率，并且可直接应用于生产实践，为通过分子标记辅助选择的方法选育黄色素含量低的改良系或杂交种提供技术支撑。
一种小麦番茄合成基因 psy e2 功能标记及其应用

[发明专利]一种检测粗山羊草抗白粉病基因的KASP标记及应用-CN201711161820.9有效
发明人： 孔令让;王宏伟;唐恒;胡立芹;宋时洋 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-11-21 - 公布日： 2021-03-23 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明涉及小麦遗传学及其分子育种领域，尤其涉及粗山羊草抗白粉病基因功能标记的开发与应用。本发明在对粗山羊草抗白粉病基因Ml2147图位克隆的基础上，利用其候选基因特异的结构序列，开发了SDAU‑kasp2147功能标记，并利用180多份粗山羊草自然种质及遗传后代材料进行验证。结果证明，这本发明提供的功能标记具有快速、直接、高通量等特点，特异性高，可在较短时间内完成大批量材料中该抗病基因的筛选和表型预测工作，可有效服务于小麦抗白粉病育种工作。
一种检测山羊白粉病基因 kasp 标记应用

[发明专利]一种小麦赤霉病抗性鉴定方法-CN201610983029.5有效
发明人： 孔令让;赵兰飞;王宏伟 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2016-11-09 - 公布日： 2020-06-02 - 主分类号： C12Q1/18 文献下载
摘要：本发明属于植物抗性鉴定领域，涉及一种小麦赤霉病抗性鉴定方法，以一叶一心期至二叶一心期的小麦叶片为检测对象，将叶片切割为叶段后在叶段中部接种禾谷镰刀菌孢子悬浮液使叶片接菌，并在接种2‑3天后即可获得鉴定结果，与单花滴注法相比，本发明方法可以在小麦苗期利用离体叶片进行赤霉病抗性鉴定，同时具有鉴定周期短，操作简单，重复性好和能够将数量性状转变成质量性状鉴定等优点，该发明的发布能够有效促进小麦抗赤霉病遗传、育种及抗病机理等工作取得突破性研究进展。
一种小麦赤霉病抗性鉴定方法

[发明专利]一种快速检测LOX转基因小麦的方法及应用该方法的试剂盒-CN201611090104.1有效
发明人： 孔令让;王彪;杜旭烨 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2016-11-29 - 公布日： 2020-03-31 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明涉及分子遗传育种领域，具体提供了一种快速检测LOX转基因小麦的方法及应用该方法的试剂盒，以特异、敏感的外引物F3和B3、内引物FIP和BIP为扩增靶序列。检测方法通过DNA提取和LAMP检测，反应液颜色由紫蓝色变为天蓝色，则为转基因小麦品系。本发明对DNA模板质量要求不高，LAMP检测周期短，检测成本低，操作过程简便，结果分析简单。
一种快速检测 lox 转基因小麦方法应用试剂盒

[发明专利]一种小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5的LAMP快速检测方法-CN201610566379.1有效
发明人：张小村;孔令让;杜旭烨 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2016-07-18 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明提供了一种小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5的LAMP快速检测方法，本发明利用GenBank公布的小麦1Dx5基因序列设计LAMP引物，建立了小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5的LAMP检测体系，并对反应条件进行了优化。LAMP在引物FIP，BIP，F3，B3比例为0.8μM:0.8μM:0.1μM:0.1μM的25μL体系下，60℃反应60min为最佳反应条件，且LAMP引物能从供试的38份小麦材料中区分小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5。结果表明，建立的LAMP检测体系简单、快速、灵敏度好、特异性高，在小麦高分子量谷蛋白亚基1Dx5检测方面潜力巨大。
一种小麦分子量谷蛋白 dx5 lamp 快速检测方法

[发明专利]一种在温室或异季条件下冬小麦F2代的单株选择方法-CN201710323400.X有效
发明人：赵檀芳;孔令让 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2017-05-10 - 公布日： 2019-05-28 - 主分类号： A01H1/04 文献下载
摘要：小麦育种周期长，小麦加代种植是缩短育种年限和快速繁殖良种的重要途径。如果在温室或异季条件下种植冬小麦F2代，所选的单株会表现春性强、抗冻性差等缺陷，难以在生产上推广种植。因此小麦杂交育种一般都是将杂种F2代安排在当地进行正常的秋播选株。本发明提供了一种在温室或异季条件下种植的冬小麦F2代的单株选择方法。本发明提供了杂交组合的选择、种植方法以及单株的具体选择方法，单株选择从株高、抗病性、拔节期、抽穗期、单株穗数和穗粒数、籽粒饱满度等提供了具体的选择方法。本方法克服了F2不能进行温室或异地加代的缺点，提供了选择优良单株的方法，而且能快速高效地选育出符合育种目标要求的小麦新品种。
一种温室条件下冬小麦 f2 单株选择方法

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