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[发明专利]一种规模化寡核酸生产用氨解装置-CN202210216355.9有效
发明人：刘宗文;钱鑫;余意;占应强;张鹏举;王鹏飞 -专利权人：安徽瑞拜药业有限公司
申请日： 2022-03-07 - 公布日： 2022-12-06 - 主分类号： C07H21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种规模化寡核酸生产用氨解装置，包括氨解箱，氨解箱内安装有氨解输送装置与氨解固定装置，氨解固定装置上安装有若干合成柱；本发明能够批量的对合成柱进行氨解与洗脱处理，整个过程中无需将合成柱中固相载体颗粒取出，降低了工作劳动量，提升了工作效率，也避免了有机气体的逸散，还能避免固相载体颗粒频繁转移，出现污染损坏的情况；本发明在工作时，整个过程是在密封箱体内进行，不会造成氨气与有机气体的泄露，在需要开箱时，也能够通过抽真空对残留的气体进行吸收统一处理，避免扩散，从而保证生产环境的安全，降低了生产处理过程对环境造成的污染。
一种规模化核酸生产氨解装置

[发明专利]一种阳离子脂质核酸疫苗组合物及其制备方法-CN202110926955.X有效
发明人：刘宗文;雍金贵;潘红;朱桃花;占应强 -专利权人：通用生物（安徽）股份有限公司
申请日： 2021-08-12 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： A61K39/145 文献下载
摘要：本发明涉及一种阳离子脂质核酸疫苗组合物及其制备方法，属于生物技术领域，本发明制备了一种阳离子脂质体，该阳离子脂质体是将脂质基体和改性透明质酸通过正负电荷相吸，将改性透明质酸均匀的包覆在脂质基体表面，没有引入有机溶剂，避免了有机溶剂带来的毒性，同时，也提高了阳离子脂质体的包封率。先制得脂质基体，然后加入核酸类药物，对药物进行负载，最后通过改性透明质酸均匀的包覆在脂质基体表面，进行包覆，常见的聚合物基因载体普遍存在细胞毒性大、生物难降解的缺点，本发明中通过对单糖的聚合、修饰，既可以降低毒性，也可以提高载药量，减少了阳离子脂质体的用量，解决了毒性大的问题。
一种阳离子核酸疫苗组合及其制备方法

[发明专利]一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法-CN202210265559.1在审
发明人：刘宗文;钱鑫;余意;占应强;任俊招;胡志鹏 -专利权人：通用生物（滁州）有限公司
申请日： 2022-03-17 - 公布日： 2022-05-31 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于超滤膜的核酸生产纯化方法，纯化方法采用离子交换工艺，包括以下步骤:步骤一：在制备间配制1M NaOH溶液、2M NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液；步骤二：将步骤一中制备的溶液存储至三种缓冲液配制罐中并转移至纯化柱层析间；步骤三：NaOH溶液、NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液分别通入除泡器，经除泡器进入纯化仪接口，预先通入NaOH溶液作为缓冲液对纯化柱进行冲洗平衡，NaCl溶液和磷酸氢二钠溶液作为洗脱液；步骤四：将反应产物泵入纯化仪，通过缓冲液和洗脱液将反应产物进行离子交换，杂质分离，得到预成品产物并分装至收集袋；步骤五：将预成品产物通过超滤膜进行脱盐处理，即可，使整体纯化效果好。
一种基于超滤膜核酸生产纯化方法

[发明专利]一种大规模引物冷凝电泳纯化分离的方法-CN201910272578.5有效
发明人：雍金贵;占应强;刘宗文 -专利权人：通用生物系统（安徽）有限公司
申请日： 2019-04-04 - 公布日： 2021-10-08 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种大规模引物冷凝电泳纯化分离的方法，涉及生物工程纯化技术领域。该方法包括16％预制胶配制、10xTBE缓冲液配制、PAGE胶配制、加样跑样四个步骤，上样前加饱和尿素溶解引物，一方面可以使样品变性，另一方面可以增加样品比重，使得样品加入凹槽时使引物下沉，与分离方法配套的凝胶电泳槽包括低温恒温箱、电泳槽主体，电泳槽主体放置于低温恒温箱的内部，低温恒温箱内设有冷凝器、第二温度传感器并盛装有乙醇，通过冷却乙醇的循环冷却，能够保持电泳缓冲液的低温恒温，不会造成由于温度升高而使条带变形的情况，大大节约了需要更换缓冲液的控温成本。
一种大规模引物冷凝电泳纯化分离方法

[发明专利]一种二代测序捕获探针的制备方法-CN202110231889.4在审
发明人：雍金贵;刘宗文;占应强 -专利权人：通用生物系统（安徽）有限公司
申请日： 2021-03-02 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C07H1/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种二代测序捕获探针的制备方法，通过固相亚磷酸酰胺三脂法将DNA固定在固相载体上，经过脱保护、耦连、加帽、氧化四步循环反应，逐步将若干个核苷酸单体依次连接上去，最终完成DNA链的合成，此法具有高效、快速偶联、起始反应物比较稳定的优点，该二代测序捕获探针的制备方法实质上是固态杂交法，又称固相法，其本质就是芯片，芯片上布满了探针，其特点是DNA探针，探针长度为50‑105bp不等，其探针的密度和序列都可以认为设置，相对而言，针对一个区段的探针密度越大，其捕获成功率越高，解决了现在技术中，如何利用固相化学法制备二代测序捕获探针，为二代测序研究提供了保障的问题。
一种二代捕获探针制备方法

[发明专利]一种法医探针荧光标记基因残留控制的方法-CN201910309199.9有效
发明人：雍金贵;占应强;刘宗文 -专利权人：通用生物系统（安徽）有限公司
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2021-05-04 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开一种法医探针荧光标记基因残留控制的方法，采用探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'‑3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。这种实时荧光定量PCR技术重复性好，特异性高，灵敏性高，可多重PCR。应用到该方法中的离心沉淀干燥一体机，可以稳定、可控、高效地完成连续多个试管的离心搅拌与干燥操作。
一种法医探针荧光标记基因残留控制方法

[发明专利]一种长链DNA引物的HPLC纯化改进的方法-CN201910413373.4有效
发明人：雍金贵;占应强;刘宗文 -专利权人：通用生物系统（安徽）有限公司
申请日： 2019-05-17 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种长链DNA引物的HPLC纯化改进的方法，包括如下步骤：第一步、在全自动DNA合成仪上合成DNA引物，自动脱去单体上的第一个碱基5’‑OH基团上的DMTr保护基；第二步、注入离子交换高效液相色谱系统进行粗检测；第三步、去除杂质短链DNA；第四步、脱除亚磷酰胺单体；第五步、进一步纯化处理；第六步、纯度检测。本发明通过将带DMT的DNA先进行HPLC纯化用以除去短片段，之后进行脱DMT步骤，然后进一步纯化，带DMT的DNA极性很弱，有很强的疏水性，不带DMT的短片断就能通过HPLC纯化被高效分离，然后对带DMT的目标分子量抽干后加10％的醋酸处理，使DMT完全脱除，处理后的引物继续进行HPLC纯化，可以得到高质量的DNA引物，纯度达到99％以上。
一种 dna 引物 hplc 纯化改进方法

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