本发明公开了一种催化生成天冬氨酸的双酶共固定化系统及其构建和应用，双酶共固定化系统以金属有机框架为载体，将热稳定双酶AaMaiA和AspB交联到金属有机框架上得到双酶共固定产物AaMaiA/AspB@NH2‑UiO66，热稳定双酶AaMaiA和AspB氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1‑2所示。本发明双酶共固定化系统对有机试剂耐受，其中还对苯甲醛表现出良好的耐受能力，同时具有良好的重复使用性；与全细胞催化相比对底物马来酸的转化率大大提高，固定化酶的转化率为86.8％。本发明双酶共固定化系统可以避免其他副产物的生成，得到纯度高且产率高的天冬氨酸，降低成本、避免底物浪费，生产过程更为简单。
本发明公开了一种用于马来酸为底物一锅法生物合成L‑天冬氨酸的重组基因、重组酶及其应用，所述重组基因由优化的AaMaiA基因与TAT信号肽基因序列连接，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过优化特定的核糖体结合位点(RBS)序列，使AaMaiA基因表达量提高；为了进一步减少底物或酶跨膜转运限制并加速异构化反应，通过序列优化后的AaMaiA基因与Tat信号肽融合得到重组基因。本发明以重组基因编码的热稳定性酶AaMaiA和热稳定性酶AspB组成的双酶系统有效提高了马来酸一锅生物合成L‑天冬氨酸的产量。
