本发明涉及一种重组毕赤酵母菌的构建方法，包括如下步骤：(1)将L‑天冬氨酸β‑脱羧酶基因aspD与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接，构建重组质粒pPIC9K‑aspD，然后转化到大肠杆菌DH5α中，获得重组菌株DH5α/pPIC9K‑aspD；所述L‑天冬氨酸β‑脱羧酶氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No.1所示，基因序列如SEQ ID No.2所示；(2)将重组质粒pPIC9K‑aspD在毕赤酵母GS115中成功表达，得到高产稳定性重组毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K‑aspD。利用毕赤酵母菌制备得到的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶的酶活高且稳定，用于生产L‑丙氨酸，具有发酵时间短，转化速度快，生产效率高，副产物少，成本低等优点。
本发明涉及一种重组枯草芽孢杆菌的构建方法，包括如下步骤：(1)将L‑天冬氨酸β‑脱羧酶基因aspD与枯草芽孢杆菌表达质粒连接，构建重组质粒；所述L‑天冬氨酸β‑脱羧酶氨基酸序列如序列表中的SEQ ID No.1所示，基因序列如SEQ ID No.2所示；(2)重组质粒转化入枯草芽孢杆菌中，得到重组枯草芽孢杆菌。利用该重组枯草芽孢杆菌发酵得到的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶含酶液，酶活高且稳定，用于生产L‑丙氨酸，具有转化时间短，转化速度快，生产效率高，副产物少，成本低等优点，适用于工业化生产。
