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[发明专利]一种从人诱导性多能干细胞分化的巨噬细胞及其制备方法和应用-CN202310091028.X在审
发明人： 刘冬羽;李治寰;李锦灵 -专利权人：深圳市寰宇生物科技有限公司
申请日： 2023-01-28 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明提供了一种从人诱导性多能干细胞分化的巨噬细胞的制备方法，包括：提供人诱导性多能干细胞单细胞悬液，在第一培养条件下培养所述人诱导性多能干细胞，分化获得中胚层细胞亚群；在第二培养条件下培养所述中胚层细胞亚群，分化获得髓系细胞生成复合物；收集髓系细胞生成复合物亚群，经细胞筛网收获幼稚巨噬细胞，转入第三培养基中继续分化成熟后得到巨噬细胞。该制备方法能够高效地利用人诱导性多能干细胞分化获得纯度好、活率高、功能完善的巨噬细胞，且分化所用到的培养体系不含动物源成份，无需滋养层细胞。
一种诱导性多能干细胞分化巨噬细胞及其制备方法应用

[实用新型]一种新型3D立体细胞培养皿-CN202320583544.X有效
发明人：李治寰;刘冬羽 -专利权人：深圳市寰宇生物科技有限公司
申请日： 2023-03-13 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型提供一种新型3D立体细胞培养皿，包括皿体和盖子，盖子可拆卸地盖设于皿体的上端部，皿体的内底壁的中间设有圆环凸起部，皿体的外周壁设有限位凸缘，限位凸缘的上端壁设有多个支撑板，盖子的下端壁均分别可与支撑板的上端壁抵接，盖子的下端壁与凸缘的上端壁之间形成第一透气间隙，盖子的内周壁与皿体的外周壁之间以及盖子的内顶壁与皿体的上端壁之间形成第二透气间隙，圆环凸起部的上端壁与盖子的内顶壁之间形成第三透气间隙，本实用新型能够避免细胞团块容易聚集于培养皿中间位置，便于实现3D培养细胞的均一生长，且能够有效保证细胞培养皿的透气效果，确保细胞的良好生长状态，皿体和盖子易于叠放，拿取安全，操作方便，实用性强。
一种新型立体细胞培养皿

[实用新型]过滤杯及过滤装置-CN202223370323.9有效
发明人： 刘冬羽;李治寰 -专利权人：深圳市寰宇生物科技有限公司
申请日： 2022-12-13 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： B01D61/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种过滤杯及过滤装置，包括杯体、滤膜，所述杯体被构造成自底部向顶部逐渐增大的锥形体，且所述杯体底部沿径向方向向外凸出以在所述杯体内壁形成一环形槽，所述滤膜设在所述环形槽底部，适用于将进入所述杯体内的液体进行过滤或者置换溶液体系，液体在流动时能够顺着杯体内所呈现的角度进行流动，液体的流动效果更好，并且不易滞留在杯体的内壁上，在液体流动至杯体底部时，在滤膜的表面进行过滤，进而完成过滤工作，在过滤完成后，便于在杯体内实现对截留物的回收或者置换溶液，也防止滤膜造成损坏。
过滤装置

[发明专利]一种从人诱导性多能干细胞分化的心肌细胞球及其制备方法和应用-CN202310181545.6在审
发明人：李治寰;刘冬羽;李锦灵 -专利权人：深圳市寰宇生物科技有限公司
申请日： 2023-02-22 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明提供了一种从悬浮培养条件下的人诱导性多能干细胞分化的心肌细胞球的制备方法，该制备方法能够在悬浮培养条件下高效地利用人诱导性多能干细胞分化获得纯度好、活率高、功能完善的心肌细胞球，且避免了使用2D培养和分化方式，所用到的培养体系不含动物源成份，无需滋养层细胞，易于实现工艺稳定、进行生产工艺放大和工业化生产心肌细胞球和心肌细胞以满足药物研发、心脏相关疾病临床研究和治疗需求。本发明还提供了一种从人诱导性多能干细胞分化的心肌细胞球及其应用。
一种诱导性多能干细胞分化心肌细胞及其制备方法应用

[发明专利]一种用于外泌体的高效制备装置及其方法-CN202211598357.5在审
发明人： 刘冬羽;李治寰 -专利权人：深圳市寰宇生物科技有限公司
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-03-14 - 主分类号： C12M1/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于外泌体的高效制备装置及其方法，涉及外泌体制备装置技术领域，其技术方案是：包括箱体，所述箱体内壁设有电机仓，所述电机仓顶部为外泌体提纯仓，所述电机仓内壁固定安装加速离心组件，所述加速离心组件包括伺服电机，所述伺服电机固定安装在电机仓内壁，所述伺服电机输出轴外壁固定安装齿轮一，所述齿轮一啮合连接加速齿轮组，所述加速齿轮组顶部固定安装提纯仓，本发明通过设置磁珠提纯组件和速离心组件配合使用，能够将速离心法和瓷珠法这两种提纯外泌体的方法进行结合，省掉了通过磁性吸引磁珠进行吸附，再吸除培养筒中其他物质，提高了工作效率。
一种用于外泌体高效制备装置及其方法

[发明专利]一种人胎盘组织源蜕膜间充质干细胞的简易制备方法-CN202111053645.8在审
发明人：李锦灵;李治寰;苏榆媛;刘冬羽 -专利权人：东莞宣冠干细胞再生医学有限公司
申请日： 2021-09-01 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种人胎盘组织源蜕膜间充质干细胞的简易制备方法，属于生物学技术领域。该方法包括如下步骤：将胎盘的蜕膜组织剪下，用含2％双抗的生理盐水反复清洗后使用镊子剥离蜕膜组织，收集蜕膜组织并剪碎，使用0.1％的胶原蛋白酶进行消化，稀释消化后使用一次性使用输血器过滤网对细胞悬液进行过滤并收集，400g离心5分钟后弃上清，将细胞沉淀使用5％完全培养基重悬后，400g离心5分钟后弃上清，使用5％完全培养基重悬后种瓶培养。本发明采用一步消化法制备胎盘底蜕膜干细胞，在分离、培养过程中采用改良的制备方法和培养体系减少对细胞的伤害，短缩了操作时长，提高分离效率，缩短培养周期，提高干细胞的产量的同时获得高纯度、表征优良的细胞。
一种胎盘组织源蜕膜间充质干细胞简易制备方法

[发明专利]一种制备高品质人源牙髓干细胞的方法-CN202110740561.5在审
发明人：王英亚;刘冬羽;李治寰 -专利权人：东莞宣冠干细胞再生医学有限公司
申请日： 2021-06-24 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及细胞生物领域，公开了一种于体外分离制备高品质人源牙髓干细胞的方法，包括以下步骤：S1.依据牙齿供者的年龄与健康情况进行样本初筛，随后采集牙齿并运送到GMP实验室。S2.利用工具将牙齿压碎，并取出已暴露的牙髓组织，将其进一步剪碎后，加入联合消化酶，震荡消化分解组织；终止消化反应后，离心获取沉淀。S3.加入完全培养基将组织细胞重悬并且过滤，得到单细胞悬液。S4.将细胞接种于培养瓶中，每周进行2次换液，待瓶中细胞的融合度达到80～90％，加入胰酶替代物(Tryple‑Express)消化细胞并进行传代扩增。本发明通过对牙齿样本的严格筛选和对牙髓干细胞分离培养方法的进一步规范调整，以确保一种高品质的临床级牙髓干细胞的制备产出。
一种制备品质牙髓干细胞方法

[发明专利]一种原代临床级脂肪干细胞分离制备的方法-CN202110508050.0在审
发明人：王丽莎;刘冬羽;李治寰 -专利权人：东莞宣冠干细胞再生医学有限公司
申请日： 2021-05-10 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种原代临床级脂肪干细胞的分离方法。主要步骤为将5～10mL抽脂脂肪组织及膨胀液转移至50mL离心管中，加入45mL生理盐水颠倒混匀后，400g，离心7min，此时离心管内分为四层，从上到下依次为油脂层、脂肪组织层、生理盐水层和细胞沉淀层。用巴氏吸管将脂肪组织转移至新的离心管中，保留最下面一层细胞沉淀，用完全培养基重悬细胞沉淀并接种至培养瓶培养。向脂肪组织中加入人源I型胶原蛋白酶，37℃，180～200rpm消化20～30min后，加入完全培养基终止消化，收集离心管底部细胞沉淀，加入完全培养基重悬细胞沉淀，将细胞悬液转移至培养瓶培养；每3天更换一次培养液，待细胞融合度达90～95％时进行消化传代，对P3细胞进行细胞表面抗原检测和三系分化能力检测。
一种临床脂肪干细胞分离制备方法

[发明专利]一种在较短培养时间内提高脐带间充质干细胞产量的方法-CN202110433951.8在审
发明人：王丽莎;刘冬羽;李治寰 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2021-04-20 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种在较短培养时间内提高脐带来源间充质干细胞产量的方法。主要步骤为将一根长约30cm的脐带组织剪成4～5cm小段，去除血液洗净后剥离出脐带华氏胶，将华氏胶放入含10％血替的完全培养基中浸泡后，剪至1～3mm3组织块并接种至培养瓶中培养。培养8～12天后收获首批原代脐带间充质干细胞，同时回收组织块进行二次贴壁培养。培养5～9天后收获第二批原代脐带间充质干细胞。采用该方法能够在20天内使华氏胶中的细胞最大限度地游离出来，提高了组织利用率和原代细胞产量；同时操作步骤简便，只需两次细胞收集操作即可完成。
一种培养时间内提高脐带间充质干细胞产量方法

[发明专利]一种诱导人间充质干细胞成软骨分化培养基及其制备方法-CN201911010808.7在审
发明人：李艳群;李治寰;刘冬羽 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-10-18 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明提供了一种可诱导人间充质干细胞成软骨分化的培养基，属于干细胞培养技术领域。该成软骨诱导培养基包括以下成分：低糖DMEM基础培养基、胎牛血清、丙酮酸钠、抗坏血酸、脯氨酸、地塞米松、转铁蛋白、胰岛素、亚硒酸钠、转化生长因子β3(TGF‑β3)。在二维培养环境下使用该培养基对间充质干细胞进行成软骨分化诱导成功率更高，而且分化时间只需要19天。
一种诱导人间干细胞软骨分化培养基及其制备方法

[实用新型]一种可装载多种组织进行石蜡切片制作过程的容器-CN201922483979.3有效
发明人：李艳群;李治寰;刘冬羽 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： G01N1/31 文献下载
摘要：本实用新型公开一种可装载多种组织进行石蜡切片制作过程的容器，包括瓶体、瓶盖，所述瓶体外表面设置规则多孔，所述瓶体的孔径大小为2mm，所述瓶底为圆底，凸起的高度为2‑4mm，所述瓶盖部分与瓶身连接，所述瓶体容量为5ml，所述瓶体为圆柱形。
一种装载多种组织进行石蜡切片制作过程容器

[实用新型]一种免疫组化、免疫荧光切片轻便小型的抗体孵育盒-CN201922483978.9有效
发明人：李艳群;李治寰;刘冬羽 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-12-20 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本实用新型公开一种免疫组化、免疫荧光切片轻便小型的抗体孵育盒，包括盒体、盒盖，所述盒体带有一条排水导管和一个洗耳球，所述盒体内设置规则多正方形孔隔层，所述盒体隔层的孔径大小为5mm，所述盒体长为12cm，宽为10cm，高为3cm，盒盖部分与盒体有两个连接点连接。该设计可以方便切片放置、排水和加水都容易，孵育盒轻便易携带转移，切片之间有阻隔防止抗体混合，使用其进行免疫组化、免疫荧光切片制作非常方便。
一种免疫荧光切片轻便小型抗体孵育

[发明专利]雌激素调节剂及其制得的组合物-CN201910366388.X在审
发明人：李治寰;林立龙;张一心;刘冬羽 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-05-05 - 公布日： 2019-07-23 - 主分类号： C07D239/91 文献下载
摘要：本发明涉及激素受体调节剂技术领域，尤其公开了一种雌激素受体调节剂及其制得的组合物。所述雌激素受体调节剂的化合物结构式如下：本发明雌激素受体调节剂可以上调ERRα和PGC‑1α的功能，可以有效地应用于缓解胰岛素抵抗或恢复胰岛素敏感性，改善糖尿病患者的葡萄糖平衡，并有效地降低糖尿病患者的血糖浓度以及血红蛋白A1c糖基化水平。
雌激素受体调节剂有效地糖尿病血红蛋白激素受体调节剂雌激素调节剂化合物结构式胰岛素敏感性葡萄糖糖基化水平胰岛素抵抗血糖缓解平衡应用恢复

[发明专利]蛋白聚糖酶调节剂及其药用组合物-CN201910366389.4在审
发明人：李治寰;林立龙;张一心;刘冬羽 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-05-05 - 公布日： 2019-07-23 - 主分类号： C07D263/32 文献下载
摘要：本发明涉及技术领域，尤其公开了一类蛋白聚糖酶调节剂及其制得的药用组合物与应用。所述蛋白聚糖酶调节剂的化合物结构式如下：本发明的蛋白聚糖酶调节剂可以有效抑制aggrecanase‑1和aggrecanase‑2这两类蛋白聚糖酶的活性，防止骨关节炎过程中软骨蛋白聚糖的降解，阻止软骨退变，本发明所涉及的化合物及其药学可接受的药学组合物可以用于风湿性关节炎、大骨节病、骨关节炎等关节软骨完整性受损而引起的疾病或症状。
蛋白聚糖酶调节剂药用组合物骨关节炎大骨节病风湿性关节炎化合物结构式软骨蛋白聚糖蛋白聚糖酶药学组合物关节软骨有效抑制可接受软骨降解退变受损疾病应用

[发明专利]嘧啶酮类化合物及其制得的组合物-CN201910366392.6在审
发明人：李治寰;张一心;刘冬羽;林立龙 -专利权人：东莞市恩联干细胞生物科技研究院
申请日： 2019-05-05 - 公布日： 2019-07-23 - 主分类号： C07D487/04 文献下载
摘要：本发明涉及化学医药技术领域，尤其公开了一类嘧啶酮类化合物及其制得的药用组合物和应用。所述嘧啶酮类化合物的化合物结构式如下：本发明的嘧啶酮类化合物可以作为蛋白酶抑制剂有可以有效抑制多种肿瘤细胞的生长，对EGFR，Her家族的蛋白酶，如EGFR L858R/T790M、EGFR E745_A750/T790等产生抑制作用，可用于制备抗肿瘤药物，并可以克服现有药物诱发的耐药性。本发明所涉及的化合物及其药学可接受的药学组合物可用于制备治疗人类及其它哺乳动物抗肿瘤药物。
嘧啶酮类化合物可用制备抗肿瘤药物蛋白酶抑制剂化合物结构式蛋白酶抗肿瘤药物药学组合物药用组合物化学医药药物诱发有效抑制肿瘤细胞耐药性哺乳动物可接受制备生长治疗应用

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