本发明公开了一种鼠Bpifb5基因多克隆抗体及其制备方法,包括步骤:a)用PCR方法扩增序列如SEQ ID NO:1所示的Bpifb5基因和序列如SEQ ID NO:2所示的pET32a表达质粒;b)将Bpifb5基因连接到pET32a表达载体中构建重组质粒;c)将所述重组质粒转入BL21感受态细菌,经过培养、诱导、裂解和纯化,得到特异性目的蛋白;d)免疫兔子后,采血,纯化抗体血清,得到多克隆抗体。通过制备基因Bpifb5的多克隆抗体,该抗体能够特异性识别目的蛋白,从而便于研究目的蛋白的表达和定位等。