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[发明专利]一种聚乙二醇非共价结合的左旋门冬酰胺酶及制备方法-CN202310923855.0在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2023-07-26 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N9/82 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种聚乙二醇非共价结合的左旋门冬酰胺酶及制备方法。本发明的聚乙二醇非共价结合的左旋门冬酰胺酶，聚乙二醇作为左旋门冬酰胺酶的修饰剂，所述聚乙二醇修饰剂为直链型或分支型且末端带有氨基的单烷氧基聚乙二醇；所述聚乙二醇修饰剂平均分子量为2kDa‑6kDa。本发明提供了一种新的技术方案，使得本发明的聚乙二醇修饰的左旋门冬酰胺酶相较于现有的聚乙二醇修饰的左旋门冬酰胺酶，活性保持率高的同时，工艺更简单，产品回收率高，解决了现有技术存在的技术问题。
一种聚乙二醇共价结合左旋门冬酰胺酶制备方法

[发明专利]一种聚乙二醇定点修饰的雷珠单抗及其制备方法-CN202310680613.3在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2023-06-09 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C07K16/22 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种聚乙二醇定点修饰的雷珠单抗及其制备方法。本发明首先提供了一种聚乙二醇定点修饰雷珠单抗，所述的定点修饰的雷珠单抗为单点修饰及两点修饰的PEG‑Rani混合物，所述的聚乙二醇为直链型或分支型的带有醛基的单烷氧基聚乙二醇，分子量在4kDa‑20kDa之间。本发明还提供了聚乙二醇定点修饰的雷珠单抗的制备方法。本发明具有如下技术效果：1）本发明的聚乙二醇定点修饰的雷珠单抗，与VEGF的结合能力，优于采用多点随机修饰的Ranibizumab。2）本发明的聚乙二醇定点修饰的雷珠单抗，在结合活性相当的情况下，大大延长了动物体内半衰期。
一种聚乙二醇定点修饰雷珠单抗及其制备方法

[发明专利]一种重组尿酸氧化酶聚乙二醇前药缀合物及其制备方法-CN202211707980.X在审
发明人：刘翔 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-05-09 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种重组尿酸氧化酶聚乙二醇前药缀合物及其制备方法。该前药缀合物为重组尿酸氧化酶rUOX与聚乙二醇PEG的前药缀合物PEG‑L‑UOX，其中PEG通过自身可水解的且自动裂解的暂时连接子linker与重组尿酸氧化酶rUOX连接，每个重组尿酸氧化酶分子平均结合8～10个聚乙二醇分子。此前药缀合物（PEG‑L‑UOX）的PEG可以从结合物结构中降解分离，可实现重组尿酸氧化酶的缓释和控释，延长药物半衰期，降低给药频率，大大提高药物的生物利用度和病人的依从性；同时通过动物实验表明，与传统PEG修饰的尿酸氧化酶（PEG‑UOX）相比，本发明提供的衍生物能减少细胞空泡的产生几率，可能降低引起心血管疾病的潜在风险性，有利于后续药效的优化和药理的研究。
一种重组尿酸氧化酶聚乙二醇前药缀合物及其制备方法

[发明专利]重组人生长激素突变体、其聚乙二醇衍生物、聚乙二醇衍生物的制备方法及其药物用途-CN202210680034.4在审
发明人：刘翔;张锦玉;苏玉平;楼玲艳 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2022-06-16 - 公布日： 2022-08-19 - 主分类号： C07K14/61 文献下载
摘要：本发明提供了一种重组人生长激素突变体、其聚乙二醇衍生物、聚乙二醇衍生物的制备方法及其药物用途。本发明的重组人生长激素突变体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的重组人生长激素突变体是将如SEQ ID NO.3所示的人生长激素氨基酸序列的第101位亮氨酸Leu突变为半胱氨酸Cys。本发明采用基因工程技术将重组人生长激素突变体基因整合入大肠杆菌（E.coli）工程菌中，通过发酵纯化，得到大量高活性高纯度的重组人生长激素突变体蛋白。同时使用聚乙二醇定点修饰重组人生长激素突变体蛋白101位的Cys氨基酸，修饰产物半衰期较未修饰蛋白延长，免疫原性降低，修饰产物均一，与原型酶相比稳定性更好，生产成本更低。
重组人生激素突变体聚乙二醇衍生物制备方法及其药物用途

[发明专利]一种人生长激素重组表达载体、表达人生长激素的工程菌、其构建方法及其应用-CN202011046142.3在审
发明人：陈宣亦;张锦玉;董坤龙 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2020-09-29 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种人生长激素重组表达载体，所述的表达载体是将核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的带融合标签和肠激酶酶切位点的人生长激素DNA导入表达质粒构建而成。本发明还提供了高效表达人生长激素的工程菌、其构建方法及其应用。本发明具有如下技术效果：1）硫氧还原蛋白TrxA融合标签能够保证人生长激素的蛋白内二硫键正确形成，保证蛋白质的正确结构。促进人生长激素在大肠杆菌胞内充分折叠，提高人生长激素蛋白在破菌后上清的溶解度，还可自行剪切，最终得到不含融合标签的人生长激素，避免不必要的人体免疫原性。2）除了带有硫氧还原蛋白TrxA融合标签，还带有His亲和标签，可通过亲和层析较简单的得到纯度95%以上的目的蛋白。
一种人生激素重组表达载体工程构建方法及其应用

[发明专利]一种聚乙二醇化尿酸氧化酶冻干粉剂及其制备方法-CN201810171512.2有效
发明人：张加慧;刘翔;钟达;戎隆富;董坤龙 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2018-03-01 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： A61K38/44 文献下载
摘要：本发明涉及聚乙二醇化尿酸氧化酶缀合物的稳定制剂，尤其涉及一种聚乙二醇化尿酸氧化酶冻干粉剂及其制备方法。一种聚乙二醇化尿酸氧化酶冻干粉剂，该冻干粉剂的固体成分包括聚乙二醇化尿酸氧化酶、保护剂和冻干赋形剂，所述的保护剂采用蔗糖，冻干赋形剂采用精氨酸，按质量份数计：聚乙二醇化尿酸氧化酶0.5‑5.0份；蔗糖15‑35份；精氨酸5.0‑25份。该冻干粉剂提高了聚乙二醇化尿酸氧化酶冻干粉剂的稳定性，并且成型好。本发明还提供上述的冻干粉剂的制备方法。
一种聚乙二醇尿酸氧化酶粉剂及其制备方法

[发明专利]一种检测口腔中幽门螺杆菌的组合物和试剂盒-CN202010380517.3在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2020-05-08 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12Q1/58 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测幽门螺杆菌的检测组合物，所述组合物含有尿素、磷酸氢二钾、氢氧化钠、对羟基苯甲酸甲酯、溴百里酚蓝和蒸馏水。本发明还提供了含有所述组合物的检测幽门螺杆菌的试剂盒，所述试剂盒包括口腔样本取样装置、检测装置、装有所述组合物的挤压式塑料瓶和装有95%v/v乙醇的挤压式塑料瓶。本发明具有如下技术效果：本发明的方法操作简便，适合没有专业知识和设备的一般消费者使用，能够精确且快速检测口腔样本中的幽门螺杆菌。
一种检测口腔幽门螺杆组合试剂盒

[发明专利]一种金属β-内酰胺酶活性的检测方法-CN202010150274.4在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2020-03-06 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测金属β‑内酰胺酶活性的方法，包括如下步骤：1)标准品制备与检测；2)反应体系制备；3)待测样品准备；4)样品检测；5)对照品制备与检测；6)数据测定与计算。本发明通过测定金属β‑内酰胺酶底物减少量的方式来计算待测金属β‑内酰胺酶的酶比活性，本发明的方法操作简便，不需要配制多种溶液，发明人创造性地归纳出新的数学式，来计算金属β‑内酰胺酶活性，产生了意想不到的技术效果，能够精确且快速检测金属β‑内酰胺酶活性的方法。
一种金属内酰胺活性检测方法

[发明专利]一种肠激酶冻干制剂-CN201911333463.9在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2019-12-23 - 公布日： 2021-07-09 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明提供了一种肠激酶冻干制剂，包含肠激酶、稳定剂、填充剂、非离子表面活性剂和缓冲剂；所述的稳定剂由氨基酸中的一种或多种和糖类中的一种或多种组成；所述的氨基酸为α‑氨基酸及它们的可药用的盐形式；所述的糖类为非还原性多糖；所述的填充剂为甘露醇；所述的缓冲剂用于将制剂的pH维持在5.8~9.1的范围。本发明具有如下技术效果：1）本发明的肠激酶冻干制剂在冷藏环境下储存720天后纯度均在95%以上，活性保持率均在90%以上；此外，各冻干制剂形态未发生明显变化，其复溶后未见明显可见异物；2）本发明的肠激酶冻干制剂在室温环境下储存60天后纯度均在94%以上，活性保持率均在90%以上，各冻干制剂形态未发生明显变化，其复溶后未见明显可见异物。
一种肠激酶制剂

[发明专利]一种肠激酶活性的检测方法-CN201910912489.2在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2019-09-25 - 公布日： 2021-03-26 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测肠激酶活性的方法，包括如下步骤：1）标准品制备：取已知含量的融合蛋白用Tris‑HCl溶液系列稀释；2）样品准备：将融合蛋白与待测肠激酶样品加入到酶切缓冲液中，进行酶切反应，然后将体系更换为Tris‑HCl溶液，作为待检品；3）样品检测：准备并设置高效液相色谱，取标准品与待检品依次上样；4）数据测定与计算：以各标准品峰面积对各标准品质量拟合标准曲线；将待检品中融合蛋白峰代入标准曲线，计算出待检品中融合蛋白的质量，再计算出待测肠激酶样品的酶比活性。本发明通过测定肠激酶底物减少量的方式来计算待测肠激酶的酶比活性，并创造性地归纳出新的数学式，来计算肠激酶活性，能够精确且快速检测肠激酶活性的方法。
一种肠激酶活性检测方法

[发明专利]一种检测血清中尿酸氧化酶含量的方法-CN201910230756.8在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2019-03-26 - 公布日： 2020-10-09 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测血清中尿酸氧化酶含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）标准品制备：取已知酶比活性的尿酸氧化酶，用Tris‑HCl溶液稀释；2）标准曲线制作：在试管中加入工作溶液，再加入标准品及空白血清，恒温水浴反应后加入终止液终止，检测吸光值；3）样品检测：在试管中加入工作溶液，再加入待测样品，恒温水浴反应后加入终止液终止，检测吸光值；4）数据测定与计算：根据标准品的酶比活性和标准曲线各点中的标准品蛋白含量计算各点标准品酶活性；再以标准曲线各点吸光值对各点标准品酶活性拟合标准曲线；将待测样品吸光值代入标准曲线，通过计算公式得出待测样品蛋白含量。本发明的方法很精确，且简单快速，相对于现有的复杂的方法，大大节约了成本。
一种检测血清尿酸氧化酶含量方法

[发明专利]一种快速检测聚乙二醇修饰蛋白中间体的修饰度的方法-CN201811547559.0在审
发明人：张弨 -专利权人： 修正生物医药（杭州）研究院有限公司
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2020-06-26 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明提供了一种快速检测聚乙二醇修饰蛋白中间体的修饰度的方法，包括如下步骤：1）对待测样品进行预处理，方法如下：取待测样品溶液，去除溶液中干扰两相法检测游离聚乙二醇的蛋白组分和小分子杂质组分；2）采用两相法，测算步骤1）处理后的样品溶液中的游离聚乙二醇质量；3）根据步骤2）的游离聚乙二醇质量推算出待测样品的聚乙二醇修饰度。本发明还提供上述方法在检测样品溶液中聚乙二醇含量、聚乙二醇残留量或聚乙二醇修饰度方面的应用。本发明具有如下技术效果：通过实现待测样品中其他物质与游离PEG的分离，去除待测样品中非游离PEG组分，使得这些物质不干扰两相法检测游离PEG含量，从而更加精确且快速地检测PEG修饰度。
一种快速检测聚乙二醇修饰蛋白中间体方法

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