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[发明专利]一种新型发酵设备-CN202211133292.7在审
发明人：任钧;樊超;柴进凯;蒋卓君;周小秋;唐旭;肖伟伟 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2022-09-17 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型发酵设备，包括罐体以及用于支撑罐体的底架，所述罐体上设有进出料口，在进出料口处安装可拆卸式盖板，在罐体内设有导流螺旋，所述罐体的两端通过支座固定在底架上，在罐体上固定安装齿环托，在底架上安装减速电机，减速电机的输出端安装驱动齿轮，该驱动齿轮与齿环托啮合，所述罐体尾端中间位置安装有三通道旋转接头，罐体内设夹层，在罐体外壁开设与夹层相通的进口和出口，该进口和出口通过管道连接三通道旋转接头，在罐体内壁安装有喷头，该喷头通过管路连接三通道旋转接头。本发明采用罐体旋转搅拌的方式，混合无死角且混合效果好，不仅可用于常规液态发酵，还可以用于轴搅拌效果差的固态发酵和粘稠物料的液态发酵。
一种新型发酵设备

[发明专利]一种复配型反刍动物过瘤胃蛋白饲料及制作方法-CN202111601064.3在审
发明人：任钧;蒲启建;蒋卓君;樊超;柴进凯;周小秋;唐旭 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： A23K50/10 文献下载
摘要：本发明属于动物饲料领域，具体为一种复配型反刍动物过瘤胃蛋白饲料及制作方法，植物蛋白90‑98份、饲料粘结剂1‑4份和水18‑32份；还包括氨基酸，氨基酸为赖氨酸和蛋氨酸，所述赖氨酸为2‑3份，蛋氨酸为1‑2份。本发明中粗蛋白蛋白小肠消化率高，解决了泌乳高峰期蛋白需求高，摄入的植物来源蛋白平衡性差的技术问题，生产成本低。
一种复配型反刍动物瘤胃蛋白饲料制作方法

[发明专利]一种反刍动物过瘤胃蛋白饲料及其制备方法-CN202111601067.7在审
发明人：任钧;蒲启建;蒋卓君;樊超;柴进凯;唐旭 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： A23K50/10 文献下载
摘要：本发明属于动物饲料领域，具体为一种反刍动物过瘤胃蛋白饲料及其制备方法。所述饲料颗粒为0.8‑1.2mm*0.8‑1.2mm的圆柱形或者直径为0.8‑1.2mm圆球形颗粒。本发明采用减小微生物附着面积，降低微生物对蛋白的降解率，提高蛋白过瘤胃率，解决了热处理易导致消化率降低，及化学处理有毒且适口性较差和物理包被成本高昂的技术问题，效果好，成本低。
一种反刍动物瘤胃蛋白饲料及其制备方法

[发明专利]一种降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法-CN201711034848.6有效
发明人：任钧;周小秋;张韬;唐旭 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司;四川农业大学
申请日： 2017-10-30 - 公布日： 2021-02-26 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明属于发酵工程领域，具体涉及一种降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法，通过直接敲除枯草芽孢杆菌合成γ‑PGA的基因——pgs，包括将pgs‑F插入到pBTS质粒的KpnI和BamHI之间，将pgs‑R插入到BamHI和XhoI之间，构建新的质粒pBTS‑pgs，转化质粒进入待敲除菌株，进行第一次重组，以及进行第二次重组等步骤，获得不具有抗性标记的敲除pgs基因的菌株，阻碍芽孢杆菌合成γ‑PGA，进而降低发酵液的粘度，促进菌体生长，提高发酵产物浓度。
一种降低芽孢杆菌发酵粘度方法

[发明专利]一种枯草芽孢杆菌Z12及应用-CN201611085518.5有效
发明人：任钧;唐旭;曹镜;雷蕾;樊超;柴进凯;曹富明;孙楠;范佳 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2016-11-30 - 公布日： 2020-01-07 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种可用于进行蛋白表达的枯草芽孢杆菌及应用，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌Z12(Bacillus subtilis Z12)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，保藏号为12750。本发明中的菌株为可被高效转化并且蛋白分泌量大的枯草芽孢杆菌，可以作为枯草芽孢杆菌表达系统的原始菌株。其转化效率可达1.8×10
一种枯草芽孢杆菌 z12 应用

[发明专利]一种改造芽孢杆菌基因组的方法-CN201611081187.8有效
发明人：任钧;唐旭;曹镜;雷蕾;樊超;柴进凯;曹富明;孙楠;范佳 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2016-11-30 - 公布日： 2019-09-20 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种改造芽孢杆菌基因组的方法。本发明具有适应性广(质粒转化难度低，pBTS质粒可以在多种革兰氏阳性菌中进行复制，改造多种菌的基因组)，可以反复多次改造同一菌株(重组质粒具有两个同源重组片段，依次发生两次同源重组，第二次同源重组后可能恢复到野生型，也可以得到改造菌株，但是不残留任何影响继续改造的片段，如抗性标记、质粒复制元件等)，并且可以改造对细菌生长影响较大的基因(引入cre重组酶和第二种抗性标记系统，可依靠抗性筛选第二次重组得到的改造菌株，杀死生存能力强的野生型菌株，之后表达cre重组酶，切割掉第二种抗性标记，残留的片段不会影响再次对菌株进行改造)。
改造菌株抗性标记同源重组芽孢杆菌基因组残留革兰氏阳性菌生物技术领域野生型菌株抗性筛选生存能力细菌生长质粒复制质粒转化重组质粒基因组野生型质粒切割杀死复制基因引入恢复

[发明专利]一种基于芽孢杆菌的无抗表达系统及构建方法-CN201611082702.4有效
发明人：任钧;唐旭;曹镜;雷蕾;樊超;柴进凯;曹富明;孙楠;范佳 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2016-11-30 - 公布日： 2019-08-02 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用枯草芽孢杆菌进行表达的无抗表达系统及构建方法。其将利用低背景的木糖操纵子诱导表达的T7 RNA聚合酶，T7 RNA聚合酶再专一性转录T7启动子后目的基因的级联放大表达系统转入芽孢杆菌基因组中，并且删除了中间使用的筛选标记基因。其克服了抗生素筛选标记基因易发生漂移，质粒表达系统不稳定，表达不可诱导表达量不高的缺点，建立了一种低背景可控诱导且高效表达的无抗表达系统。结合枯草芽孢杆菌表达系统本身发酵成本低，可规模化生产，发酵产物可分泌到发酵液中，不含有内毒素等优点，给表达目的蛋白提供了一种全新的表达系统。
一种基于芽孢杆菌表达系统构建方法

[发明专利]一种高效降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法-CN201811383908.X在审
发明人：任钧;唐旭 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2018-11-20 - 公布日： 2019-02-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于发酵工程领域，具体涉及一种高效降低芽孢杆菌发酵液粘度的方法，其特征在于：敲除待改造菌株表达系统的eps操纵子，具体为敲除待改造菌株表达系统的eps操纵子为将扩增后eps操纵子的上游片段eps‑F插入到pBTS质粒的KpnI和BamHI之间，下游片段eps‑R插入到BamHI和XhoI之间，构建新的质粒pBTS‑eps，电转化质粒于改造菌株、培养基培养和PCR鉴定而得。本发明阻碍胞外多糖合成，进而大大降低发酵液粘度，促进发酵产物分离，降低成本，大大提高效率。
发酵液粘度操纵子菌株质粒表达系统芽孢杆菌敲除培养基培养改造胞外多糖发酵产物发酵工程下游片段电转化构建扩增合成上游阻碍

[发明专利]一种转化芽孢杆菌的方法-CN201410686389.X有效
发明人：任钧 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2014-11-26 - 公布日： 2017-12-19 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体为一种转化芽孢杆菌的方法。该方法首先诱导芽孢杆菌进入可被转化的状态，再与含有重组质粒的大肠杆菌进行共培养，期间添加多粘菌素，杀死大肠杆菌，释放出质粒。共培养之后的菌株再涂布到对应抗生素平板上进行筛选，得到被转化的菌株。该转化方法操作简单，不需要特殊的设备；不仅可用于枯草芽孢杆菌的模式菌株的转化，还可用于野生型菌株的枯草芽孢杆菌转化和其它芽孢杆菌属的细菌转化，适应性广。
一种转化芽孢杆菌方法

[发明专利]一种利用芽孢杆菌高效分泌表达外源蛋白的方法-CN201710522101.9在审
发明人：任钧;唐旭;雷蕾;樊超;柴进凯;曹付明;范佳;曹镜 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2017-06-30 - 公布日： 2017-10-24 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用芽孢杆菌高效分泌表达外源蛋白的方法，其特征在于所述目的蛋白在胞内大量积累，其就被大量分泌到发酵液中。其不依赖于信号肽或者特征结构，与现有的Sec途径、Tat途径、Com系统和ABC转运途径有本质上差异。当任一目的蛋白在细胞内大量表达，就可以通过这一途径大量分泌到细胞外，最大分泌量可以达到g/L级别。不仅克服了现有分泌途径分泌量低，通用性差的特点，还可以无选择性地将目的蛋白分泌到发酵液中，降低后期分离纯化的难度。
一种利用芽孢杆菌高效分泌表达蛋白方法

[发明专利]一种蛋白盐的高效清洁生产方法-CN201710009603.1在审
发明人：唐旭;曹付明;雷蕾;孙楠;曹镜;任钧;柴进凯;樊超;范佳 -专利权人：成都美溢德生物技术有限公司
申请日： 2017-01-06 - 公布日： 2017-05-24 - 主分类号： C12P21/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白盐的高效清洁生产方法，包括以下步骤步骤A，将植物蛋白原料进行水解；步骤B，所述步骤A完成后，将水解液的pH值调至5～9，将水解液的温度调至40～80℃；步骤C，所述步骤B完成后，向水解液中加入可溶性金属盐，进行螯合反应；步骤D，将步骤C所得反应产物进行烘干；步骤E，将步骤D所得烘干产物进行粉碎处理，最终制得蛋白盐产品。本发明方法操作简便，设备投资少，生产周期短，且没有固体和液体废弃物产生，对环境影响小。通过本发明生产方法制备得到的蛋白盐可作为饲料添加剂应用。
一种蛋白高效清洁生产方法

[发明专利]大型齿轮机床鼓轮组装件的加工方法-CN201510351551.7在审
发明人：刘振玲;刘家兰;张桂萍;魏萍;闫立国;任钧;陈义召 -专利权人：天津第一机床总厂
申请日： 2015-06-23 - 公布日： 2015-09-23 - 主分类号： B23P15/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种大型齿轮机床鼓轮组装件的加工方法，鼓轮组装件是由摇台鼓轮、蜗轮和刀架座圆盘构成，特征在于：鼓轮组装件加工方法包括如下步骤：S1步骤、分别对摇台鼓轮、蜗轮、刀架座圆盘进行粗加工；S2步骤、对摇台鼓轮、蜗轮、刀架座圆盘进行时效处理，时效处理后，分别对摇台鼓轮、蜗轮、刀架座圆盘进行半精加工及部分精加工；S3步骤、分别将摇台鼓轮、蜗轮、刀架座圆盘进行组装，然后对组装件进行精加工；S4步骤、先拆下刀架座圆盘，去掉工艺台，然后再对蜗轮进行精加工。优点是：可确保组鼓轮装件的加工精度和质量，提高机床的利用率；并为大型鼓轮组装件在切削机床上加工提供便利的条件和先进的工艺手段。
大型齿轮机床组装加工方法

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