本发明提供了一种L‑氨基酸连接酶的制备方法及其在二肽合成上的应用。其中，二肽合成方法包括利用如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的L‑氨基酸连接酶进行二肽合成反应，得到二肽。利用本申请的L‑氨基酸连接酶，能够进行多种功能二肽的合成，底物谱较广，且合成效率较高，能够较好地用于工业放大，成本低，收率高，实现了真正的绿色化学。
本发明提供了一种α‑氨基酸脂酰基转移酶的制备方法及其在二肽合成上的应用。其中，二肽合成的方法包括：利用α‑氨基酸脂酰基转移酶进行二肽合成反应，得到二肽；其中，α‑氨基酸脂酰基转移酶具有如SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的保守区域。利用本申请的α‑氨基酸脂酰基转移酶，能够进行多种功能二肽的合成，底物谱较广，且部分酶的合成效率较高，能够较好地用于工业放大，成本低，收率高，实现了真正的绿色化学。
本发明提供了一种酰胺酶突变体及其应用，包括：(a)具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的蛋白质；或(b)在(a)中所示氨基酸序列的如下至少一个位点：L81、E62、M311、N180、P121、R58、E32、T230、N82、N190、D192、D217、H219、K77、M78、P79、F80、F61、D185、D59、L182、T183、P184、I227、C228、G229、A231或V232，经过氨基酸突变且具有酰胺酶功能的蛋白质；或(c)与(a)和(b)中任一项限定的氨基酸序列具有80％以上同源性且具有酰胺酶功能的蛋白质。能够解决现有技术中酰胺酶立体选择性和催化活性不高的问题，适用于酶催化领域。
