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[发明专利]一种基于细胞膜蛋白顺序激活的DNA逻辑探针及其应用-CN202310943556.3在审
发明人：刘颖;鞠熀先;方燕云 -专利权人：南京大学
申请日： 2023-07-31 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/115 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于细胞膜蛋白顺序激活的DNA逻辑探针及其应用，探针包括组合使用的P‑DNA‑Set、A1‑EpCAM、A2‑MUC1，其中，A2‑MUC1识别细胞的MUC1，A1‑EpCAM识别细胞的EpCAM，EpCAM较MUC1的表达量差异大；P‑DNA‑Set包括L1‑IGFIIR识别端、L1’‑IGFIIR封闭端、A1’‑EpCAM识别端。本发明的智能响应开关型DNA逻辑探针可基于肿瘤细胞膜上蛋白以特定顺序被激活，实现对特定靶细胞的精准治疗；其开关型设计可有效缓解系统注射时探针的潜在副作用；本发明限定探针结合蛋白顺序的逻辑设计，可提高探针的使用效率，为疾病的治疗提供高效的治疗手段。
一种基于细胞膜蛋白顺序激活 dna 逻辑探针及其应用

[发明专利]一种在混合活细胞悬浮液中免分离、选择性共价标记目标细胞的方法-CN202210370892.9在审
发明人：丁霖;鞠熀先;郭玉娜;汪楠;钟艺红;李伟 -专利权人：南京大学
申请日： 2022-04-08 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种在混合活细胞悬浮液中免分离、选择性共价标记目标细胞的方法。该方法以适配体修饰的辣根过氧化酶为探针，以酪胺修饰的功能分子为标记分子。探针可在混合活细胞悬浮液中选择性结合目标细胞。加入过氧化氢和标记分子后，探针催化过氧化氢氧化标记分子生成极高反应活性、寿命极短的苯氧自由基。只有目标细胞上的探针可将标记分子共价连接在细胞膜上，溶液中悬浮的探针无法介导细胞标记，从而实现对目标细胞的免分离、选择性、快速标记。该方法适用于含酪胺基团的不同标记分子，并可在目标细胞上同时共价连接多种标记分子。利用标记分子的生物或化学反应可对混合活细胞悬浮液中的目标细胞进行荧光标记和检测以及细胞膜改造。
一种混合细胞悬浮液分离选择性共价标记目标方法

[发明专利]一种MOF金属有机框架结构检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的光电化学传感器的制备方法-CN202310496306.X在审
发明人：李延雷;鞠熀先;魏琴;刘子桓;谭佳乐;李煜昊;李唐鑫 -专利权人：济南大学
申请日： 2023-05-05 - 公布日： 2023-08-29 - 主分类号： G01N33/573 文献下载
摘要：本发明涉及一种MOF金属有机框架结构检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的光电化学传感器的制备方法，属于新型功能材料与生物传感检测技术领域；本发明以Mn0.05Cd0.95S纳米颗粒溶液为基底材料以可见光做光源来获得光电流；将金属有机框架结构UiO‑66‑NH2作为二抗的载体，制备了一种检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的光电化学传感器，属于光电化学传感器领域。该传感器可检测信号与样品中分析物浓度成正比，且对目标物表现出了高的灵敏度，宽的检测范围以及低的检出限，能够实现人体血清中NSE的快速灵敏测定，对临床上患者感染类型的判断有着较大的应用价值。
一种 mof 金属有机框架结构检测神经元特异性醇化 nse 电化学传感器制备方法

[发明专利]一种评估活体内唾液酸化水平的高分子探针及其制备方法-CN202310545548.3在审
发明人：陈云龙;鞠熀先;赵诗雅 -专利权人：南京大学
申请日： 2023-05-11 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种评估活体内唾液酸化水平的高分子探针。它以支链末端为炔基的树枝状高分子为载体，表面同时修饰有半乳糖、花氰5荧光染料以及叶酸。检测方案通过将制得的高分子探针皮下注射到荷瘤小鼠的肿瘤区域。利用叶酸介导的靶向内吞使高分子探针进入肿瘤细胞内部。活体内的唾液酸转移酶会在高分子探针末端的半乳糖上连接唾液酸。用高碘酸钠将小鼠肿瘤组织切片中的唾液酸末端氧化出醛基基团，并进一步偶联上酰肼荧光素分子。通过荧光显微镜成像同时收集花氰5和荧光素的荧光信号，并利用软件获取二种荧光叠加区域的荧光素荧光强度，即可用于评估该肿瘤组织的唾液酸化水平。
一种评估活体唾液酸化水平高分子探针及其制备方法

[发明专利]利用可拆卸DNA-聚合物限域单细胞的方法及其在分泌物检测上的应用-CN202210096855.3在审
发明人：刘颖;鞠熀先;方燕云 -专利权人：南京大学
申请日： 2022-01-26 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： C12Q1/6816 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用可拆卸DNA‑聚合物限域单细胞的方法，包括：体外制备检测DNA‑聚合物和封装DNA‑聚合物，检测DNA‑聚合物上连接有检测探针；胆固醇修饰的Anchor DNA插入到单细胞的细胞膜上，再根据DNA配对原则在Anchor DNA上依次组装检测DNA‑聚合物和封装DNA‑聚合物，从而在细胞膜上组装DNA‑聚合物交联网络达到限域单细胞的目的。本发明还包括上述利用可拆卸DNA‑聚合物限域单细胞的方法在分泌物检测上的应用。本发明具有操作简单、高单细胞封装率的优势，其构建过程中无需复杂的仪器设备，且构建的DNA‑聚合物具有良好的生物相容性及可拆卸性，支持受测细胞的后续应用。
利用可拆卸 dna 聚合物单细胞方法及其分泌物检测应用

[发明专利]一种基于Cu2-CN202310496250.8在审
发明人：范大伟;宫正兴;马洪敏;吴丹;任祥;王欢;王雪莹;鞠熀先;魏琴 -专利权人：济南大学
申请日： 2023-05-05 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： G01N33/573 文献下载
摘要：基于Cu2S/CdSSe异质结构的神经元特异性烯醇化酶电致化学发光传感器的制备方法。本发明以Cu2S/CdSSe为电致化学发光的发光体，雪花状Cu2S提供大的表面积以及高效的催化活性，阻止了CdSSe纳米颗粒团聚的同时，极大的提高了电致化学发光性能。以Au‑In2O3作为标记物标记神经元特异性烯醇化酶检测抗体，由于纳米颗粒In2O3的介孔中掺入Au颗粒，所以不需要额外的Au纳米颗粒修饰便可直接连接检测抗体，同时宽范围的紫外可见吸收，可以有效地提高传感器的灵敏度。实现了对神经元特异性烯醇化酶的灵敏检测。其检测限为16 g/mL。
一种基于 cu base sub

[发明专利]基于靶标蛋白诱导DNA酶循环生成的均相免疫分析方法-CN201710234646.X有效
发明人：吴洁;鞠熀先;杨凯丽 -专利权人：南京大学
申请日： 2017-04-07 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：一种基于靶标蛋白诱导DNA酶循环生成的均相免疫分析方法，该方法的检测溶液包括抗体1‑DNA1偶联物、抗体2‑DNA2偶联物、血红素hemin、核酸外切酶III和DNA3/DNA4双链DNA。当靶标蛋白存在时，可被抗体1‑DNA1和抗体2‑DNA2同时免疫识别，基于邻位效应，DNA1与DNA2会进行杂交而后与双链DNA上的DNA3发生链取代反应，进而释放出富含G序列的DNA4与hemin结合形成G‑四链体/hemin DNA酶，此外，与DNA1和DNA2反应的DNA3能被核酸外切酶III识别并切断，使得DNA1和DNA2可与另一个DNA3发生链取代反应，从而释放另一个DNA4生成DNA酶，如此循环，生成大量的DNA酶。该DNA酶可催化TMB显色和鲁米诺发光，通过比色或化学发光成像的方法可对靶标蛋白进行灵敏的定量分析。该方法操作简单、快速、灵敏、普适性高，具有一定的临床应用价值。
基于靶标蛋白诱导 dna 循环生成均相免疫分析方法

[发明专利]一种基于控制释放ZIF-8屏蔽壳层的光电化学NSE传感器的制备方法-CN202210312565.8有效
发明人：白宇;冯涛;刘成庆;徐晓龙;周金芝;鞠熀先;魏琴 -专利权人：济南大学
申请日： 2022-03-28 - 公布日： 2023-07-04 - 主分类号： G01N27/30 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于葡萄糖酸分解ZIF‑8屏蔽壳层的光电化学神经元特异性烯醇化酶传感器的制备方法及应用。本发明具体是在氧化铟锡（ITO）导电玻璃上修饰In2O3纳米颗粒，通过连续离子层吸附法（SILAR）在In2O3上生长钒酸铋（BiVO4），形成的敏化结构可增加光的捕获，促进光生电子空穴的分离效率，具有强的光电化学性能，在In2O3/BiVO4敏化层上修饰ZIF‑8作为信号屏蔽层，通过制备的二氧化硅负载的葡萄糖氧化酶分解葡萄糖产生葡萄糖酸，从而使ZIF‑8部分降解。构建了一种分离式基于ZIF‑8屏蔽壳层降解控制的光电化学传感器，实现了对神经元特异性烯醇化酶的灵敏检测，该方法对早期诊断和检测小细胞肺癌具有重要意义。
一种基于控制释放 zif 屏蔽光电化学 nse 传感器制备方法

[发明专利]一种检测唾液酸化糖链抗原KL-6铱纳米点电化学发光传感器的制备方法-CN202011571558.7有效
发明人：杜宇;任祥;吴丹;刘雪静;范大伟;魏琴;鞠熀先 -专利权人：济南大学
申请日： 2020-12-27 - 公布日： 2023-06-20 - 主分类号： G01N27/26 文献下载
摘要：本发明涉及一种检测唾液酸化糖链抗原KL‑6铱纳米点电化学发光传感器的制备方法，其特征在于，制备一种水溶性好、生物相容性好、电化学发光效率高的铱纳米点，以抗体标记的铱纳米点溶液作为信号探针，研制一种无标记型电化学发光免疫传感器，用于间质性肺疾病标志物唾液酸化糖链抗原KL‑6的快速、灵敏检测，检出限为45 fg/mL，线性范围为100 fg/mL‑50 ng/mL，具有特异性强、重现性好、信号稳定等优点。
一种检测唾液酸化抗原 kl 纳米电化学发光传感器制备方法

[发明专利]一种玫瑰花型催化剂VS2-CN202111186311.8有效
发明人：许靖奕;鞠熀先;徐晓龙;周金芝;魏琴 -专利权人：济南大学
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C25B11/056 文献下载
摘要：氮气是大气中含量最丰富的气体。含氮化合物被广泛应用于农业、医药和化工等领域，需求量及其高。氨气作为一种基础气体，在合成此类化合物中发挥了必不可少的作用。因此，氮气合成氨成为当今世界发展的重中之重。目前工业上合成氨主要使用哈伯博施法，但其反应条件苛刻，并且污染环境，不符合当今的绿色可持续发展理念。由于重金属催化剂价格昂贵，生产非贵金属的催化剂用于电催化分解N2饱和的电解液实现氮还原制氨的研究备受关注，近几年在能源领域一直是最大热门。本发明提供了一种在碳布上水热合成玫瑰花型VS2后用电沉积法电沉积上Bi2O3的制备方法及其电催化氮还原应用。
一种玫瑰花催化剂 vs base sub

[发明专利]一种基于三维碳化钛-二硫化钼复合物生物传感器的制备方法-CN202010571728.5有效
发明人：杨磊;魏琴;杨兴龙;杜宇;刘雪静;冯锐;王欢;鞠熀先 -专利权人：济南大学
申请日： 2020-06-22 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： G01N27/48 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于三维碳化钛‑二硫化钼复合物免疫传感器的制备方法及应用，属于新型纳米材料领域与生物传感技术领域；本发明首次通过混合‑干燥法制备三维多孔碳化钛‑二硫化钼(Ti3C2Tx‑MoS2)复合材料，并以鲁米诺作为还原剂制备铂功能化三维Ti3C2Tx/MoS2(Lum@Pt/Ti3C2Tx‑MoS2)作为传感基底，首次提出了一种用于非小细胞肺癌疾病标志物CYFRA 21‑1的高灵敏检测的免疫传感器的制备方法，Ti3C2Tx/MoS2具有高导电性、高电化学活性、大比表面积与生物相容性，可高效催化水中的溶解氧转化为超氧阴离子自由基O2•−，从而增强鲁米诺与O2•−之间的电致化学发光反应实现信号高效稳定输出，该传感器检出限低至18 pg/mL，线性范围50 pg/mL‑50 ng/mL，在非小细胞肺癌早期诊断中具有明显的潜在应用价值。
一种基于三维碳化二硫化钼复合物生物传感器制备方法

[发明专利]一种基于主客体策略电化学发光生长激素传感平台-CN202211553374.7在审
发明人：张潇月;杜宇;李玉阳;任祥;张诺;魏琴;鞠熀先 -专利权人：济南大学
申请日： 2022-12-06 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于主客体策略电化学发光生长激素传感平台，提供了该平台的制备和检测方法。具体涉及基于主客体策略电化学发光生长激素传感平台的制备和基于主客体策略电化学发光生长激素传感平台的检测方法。首次利用葫芦[7]脲在电化学发光生长激素传感平台表面选择性识别并捕获生长激素，并利用基于主客体策略改性金纳米簇提高了生长激素传感平台的稳定性和灵敏度。本发明属于电化学发光检测技术领域。
一种基于主客策略电化学发光生长激素传感平台

[发明专利]一种可视化误导细胞内唾液酸化的介孔硅探针及制备方法-CN202111219329.3在审
发明人：陈云龙;鞠熀先 -专利权人：南京大学
申请日： 2021-10-15 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C09K11/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于可视化误导细胞内唾液酸化的介孔硅探针。它以介孔二氧化硅纳米粒子为载体，表面同时修饰了半乳糖，叶酸和修饰有被黑洞猝灭剂1(BHQ1)猝灭的羧基荧光素(FAM)的功能双链DNA分子，内部装载有两端分别有苯硼酸和花菁5荧光素(Cy5)的功能单链DNA分子。当介孔硅探针通过其表面的叶酸介导的细胞内吞进入细胞内后，细胞内的唾液酸转移酶会以介孔硅探针表面的半乳糖为基底在连接上唾液酸，从介孔硅内部释放出来的功能单链DNA分子一端的Cy5的荧光用于示踪，另一端的苯硼酸会与连接的唾液酸特异性结合，并引发邻位链取代作用取代下功能双链DNA分子中修饰有BHQ1的单链，恢复FAM的荧光，实现细胞内唾液酸化的可视化误导。
一种可视化误导细胞内唾液酸化介孔硅探针制备方法

[发明专利]一种用于细胞环境中选择性标记游离糖蛋白的聚糖重构方法-CN202111189720.3在审
发明人：丁霖;鞠熀先;毛安雯;钟彤;王晓剑;谢然 -专利权人：南京大学
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C08F289/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种在细胞环境中选择性标记游离糖蛋白的聚糖重构方法。该方法利用聚合物包裹的半乳糖氧化酶(GO)作为聚糖重构探针(GO‑PN)。探针上聚合物对酶活性中心的屏蔽效应随底物尺寸改变而不同。当底物为细胞时，细胞表面锚定的糖复合物(包括糖蛋白、糖脂等)难以接近探针的酶活性中心，因此聚糖重构难以发生；而当底物为游离糖蛋白时，糖蛋白上的糖链可以接近酶活性中心，糖链末端的半乳糖和N‑乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)被GO氧化生成醛基。基于该原理，探针可在细胞和游离糖蛋白的混合物中选择性重构糖蛋白的聚糖。醛基可进一步与酰肼修饰分子反应，实现细胞环境中游离糖蛋白的聚糖标记。该方法为在复杂生物环境中原位检测游离糖蛋白及其糖基化程度提供了工具，对于发展基于聚糖检测和编辑的临床诊断和活体干预方法具有重要意义。
一种用于细胞环境选择性标记游离糖蛋白聚糖方法

[发明专利]一种细胞表面聚糖的可激活型标记方法-CN202111189718.6在审
发明人：丁霖;鞠熀先;毛安雯;钟彤;谢然;王晓剑 -专利权人：南京大学
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C08F289/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种细胞表面聚糖的可激活型标记方法。利用原子转移自由基聚合(ATRP)技术，在半乳糖氧化酶(GO)表面利用二硫键连接链引发剂，原位可控生长聚合物(PN)，构建聚糖氧化探针GO‑PN。将探针与细胞共温育时，探针上的PN作为物理屏障，使细胞表面聚糖难以接近酶活性中心，GO‑PN无法氧化聚糖末端的半乳糖和N‑乙酰半乳糖胺(Gal/GalNAc)。当向体系中加入还原剂三(2‑羧乙基)膦(TCEP)时，PN和GO之间的二硫键断开使PN解离，探针的酶活性位点得以暴露，氧化细胞表面聚糖的Gal/GalNAc生成醛基。该醛基可进一步与酰肼修饰分子发生高效连接反应，从而实现细胞表面聚糖的可激活型标记。该方法实现了细胞膜聚糖标记的时间控制，为聚糖原位检测和功能研究提供了一种重要的工具。
一种细胞表面聚糖激活标记方法

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