本发明通过基因工程技术分别构建了表达羰基还原酶SEQ ID NO:1、葡萄糖脱氢酶SEQ ID NO:3和醇脱氢酶SEQ ID NO:5的大肠杆菌,表达该羰基还原酶的大肠杆菌和表达该葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌的组合、或者表达该羰基还原酶的大肠杆菌和表达该醇脱氢酶的大肠杆菌的组合能够对底物(S)‑N‑叔丁氧羰基‑3‑氨基‑1‑氯‑2‑酮‑4‑苯基丁烷进行联合催化,得到高光学纯度的(2S,3S)‑N‑叔丁氧羰基‑3‑氨基‑1‑氯‑2‑羟基‑4‑苯基丁烷,适用于工业化生产。
本发明公开了一株表达胆碱激酶及磷酰胆碱胞苷转移酶的基因工程菌,属于基因工程技术领域。该菌株是导入了磷酰胆碱胞苷转移酶CCT基因和胆碱激酶CKI基因共表达质粒的基因工程菌,所述的CCT基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO1中1~1275所示;所述的CKI基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO1中1276~3024所示。本发明的大肠杆菌基因工程菌株可以高效表达胆碱激酶,其诱导酶活达1.94U/mg。本发明还公开了上述基因工程菌的构建方法及利用该基因工程菌催化产胞磷胆碱的应用,催化体系中胞磷胆碱的含量达到19g/L。将该菌株应用于生产胞磷胆碱,具有工艺简单、条件温和、周期短、副产物少等优点。