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[发明专利]油菜含片及其制备方法-CN201310602364.2无效
发明人： 陈剑清;吕正兵;舒特俊;聂作明 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2013-11-20 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： A23L1/212 文献下载
摘要：本发明提供一种油菜含片，它为固体片剂，成分为100%油菜。制备方法为：挑选具有丰富肉质的八成成熟度油菜，剔除病虫、腐烂及干瘪部分，清洗，脱水处理使水分含量控制在11%以下；加入超微粉碎机进行超微粉碎；以喷雾的形式均匀喷入食用酒精，并不断搅拌，使形成大小一致的颗粒，将颗粒倒入湿法制粒机中制粒；均匀单层铺开，放入30～37℃烘箱中继续烘干，除去油菜颗粒中的酒精直到无酒精残留；加入压片机中进行压片；用钴60辐照进行灭菌，包装。该油菜含片营养价值高、保健功能好、携带和食用方便、易消化吸收、保存时间长。
油菜含片及其制备方法

[发明专利]脱水蔬菜万年青含片及其制备方法-CN201310587381.3有效
发明人：张耀洲;陈剑清;陈昊 -专利权人：正源堂（天津）生物科技有限公司
申请日： 2013-11-20 - 公布日： 2014-03-05 - 主分类号： A23L1/212 文献下载
摘要：本发明提供一种脱水蔬菜万年青含片，它为固体片剂，成分为100%万年青。制备方法为：将脱水蔬菜万年青30～37℃热风循环烘干，使水分含量控制在8%以下；加入超微粉碎机进行超微粉碎；以喷雾的形式均匀喷入食用酒精，并不断搅拌，使形成大小一致的颗粒，将颗粒倒入湿法制粒机中制粒；均匀单层铺开，放入30～37℃烘箱中继续烘干，除去万年青颗粒中的酒精直到无酒精残留；加入压片机中进行压片；用钴60辐照进行灭菌，包装，得到成品脱水蔬菜万年青含片。该含片营养价值高、保健功能好、携带和食用方便、易消化吸收、保存时间长。
脱水蔬菜万年青含片及其制备方法

[发明专利]一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒复制非必需基因的方法-CN201210288003.0有效
发明人：田凤鸣;陈剑清;舒特俊;张耀洲 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-08-14 - 公布日： 2014-02-19 - 主分类号： C12N15/65 文献下载
摘要：本发明涉及一种靶向敲除家蚕核型多角体病毒BmNPV复制非必需基因的方法，所述方法以BmNPV为材料，通过PCR对其一个复制非必需片段两端的同源序列进行扩增并克隆至载体pUC19中；通过重叠PCR法依次拼接BmNPV的IE1早期启动子、标记基因(EGFP)、终止序列SV40polyA，并克隆至上述载体pUC19获得重组转移载体pUC19-lef7-IE1-EGFP-SV40polyA-gp64；将该载体与野生BmNPV的基因组共转染BmN细胞，经同源重组获得带有荧光标记的重组病毒RBmNPV-EGFP；将其基因组DNA与不带有标记基因的转移载体pUC19-lef7-gp64共转染BmN细胞，通过同源重组获得不带有荧光标记基因的重组病毒RBmNPV。本发明解决了重组病毒基因组中带有标记基因的问题，提高了阳性重组病毒的筛选效率，且此标记基因可以被反复利用。
一种靶向家蚕核型多角体病毒复制必需基因方法

[发明专利]一种蛹虫草培养基及其应用-CN201310462899.4有效
发明人： 陈剑清;陈昊;叶曼 -专利权人：台州康晶生物科技有限公司
申请日： 2013-09-29 - 公布日： 2014-01-29 - 主分类号： C05G1/00 文献下载
摘要：本发明提供一种蛹虫草培养基，由以下含量的各组分组成：干蚕蛹粉30g/L、大米粉170g/L、磷酸二氢钾1.2g/L、磷酸二氢钠0.8g/L、牛肉膏1g/L。配制该培养基，密封、灭菌、冷却；然后接种蛹虫草菌种，菌种密度为3～5个菌球/mL，培养基与菌种体积比为50:1；培养，包括暗培养、光培养；收获子实体。使用该方法培育得到的蛹虫草制成药物，以接种有lewiss肺癌的C57小鼠为实验对象，按药物中蛹虫草给药剂量为5g/kg的标准进行给药，每日给药1次，连续10天后，检测得lewis肺癌肿瘤的抑制率为19.6%。
一种虫草培养基及其应用

[发明专利]一种蛹虫草的培育方法及其应用-CN201310456846.1有效
发明人： 陈剑清;舒特俊 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2013-09-29 - 公布日： 2014-01-01 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：本发明提供一种蛹虫草的培育方法，它包括以下步骤：干蚕蛹粉20g/L、大米粉180g/L、磷酸二氢钾1.2g/L、磷酸二氢钠1g/L、余量为水配制培养基，密封、灭菌、冷却；接种蛹虫草菌种，菌种密度为3～5个菌球/mL，培养基与菌种体积比为50:1；培养，包括暗培养、光培养；收获子实体。使用该方法培育得到的蛹虫草制成药物，以接种有lewiss肺癌的C57小鼠为实验对象，按药物中蛹虫草给药剂量为5g/kg的标准进行给药，每日给药1次，连续10天后，检测得lewis肺癌肿瘤的抑制率为19.6%。
一种虫草培育方法及其应用

[实用新型]药品包装盒-CN201320297685.1有效
发明人：张耀洲;陈剑清;陈昊 -专利权人：正源堂（天津）生物科技有限公司
申请日： 2013-05-28 - 公布日： 2014-01-01 - 主分类号： A61J1/03 文献下载
摘要：本实用新型公开一种药品包装盒，它包括盒体（1）和盖于盒体（1）顶部的盒盖（2），所述盒体（1）顶部向内设置有一端开口的用于容置药品的空腔（3），所述空腔（3）的形状与尺寸以刚好能放置一颗或多颗药品为准。该药品包装盒不仅可避免药品之间的碰撞、摩擦损失，而且置于内的药品不易遗失、也不会因为受潮或氧化从而影响药品质量，另外该药品包装盒还可重复利用、携带方便。
药品包装

[发明专利]表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白基因的家蚕重组杆状病毒及其制备方法和应用-CN201310001030.X无效
发明人：张耀洲;南芙蓉;张浩;舒特俊;陈剑清 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2013-01-04 - 公布日： 2013-06-05 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种表达重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白基因的家蚕重组杆状病毒及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明通过将重组人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白(rhTNFR-Fc)基因构建到家蚕杆状病毒表达系统中获得重组杆状病毒，从而高效表达目的蛋白，并纯化出目的融合蛋白rhTNFR-Fc。本发明通过家蚕杆状病毒表达系统可以高效表达并纯化出融合蛋白rhTNFR-Fc，平均每mL蚕血淋巴可纯化出0.17mg的目的融合蛋白。
表达重组肿瘤坏死因子受体 fc 融合蛋白基因家蚕杆状病毒及其制备方法应用

[发明专利]一种家蚕气味结合蛋白BmOBP2的表达纯化方法-CN201310025720.9有效
发明人：张耀洲;刘玲玲;杜瑶瑶;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2013-01-22 - 公布日： 2013-05-15 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种家蚕气味结合蛋白BmOBP2的表达纯化方法。通过设计引物，构建重组表达载体pET-32a-BmOBP2，诱导表达得到大量重组目的蛋白，重组蛋白经镍离子亲和层析和阴离子交互那层析两步纯化等简易的技术可以得到纯度较高的重组蛋白，为以后研究其三维结构和生物学功能奠定了极其重要的基础，该还方法解决了天然膜蛋白表达量低、难纯化的问题。
一种家蚕气味结合蛋白 bmobp2 表达纯化方法

[发明专利]一种家蚕触角结合蛋白基因、蛋白及其制备方法-CN201310024544.7无效
发明人：张耀洲;李晓瑞;李霞;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2013-01-23 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种家蚕触角结合蛋白基因、蛋白及其制备方法。该家蚕触角结合蛋白基因的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。家蚕触角结合蛋白的制备方法是用本发明的家蚕触角结合蛋白基因构建重组表达载体后导入宿主菌构建基因工程菌，利用IPTG诱导表达蛋白，再经过纯化得到最终蛋白产物。本发明的ABP基因片段不含信号肽序列，构建的重组表达载体pET-32a-ABP经诱导表达能获得大量重组目的蛋白，为以后研究其三维结构和生物学功能奠定了极其重要的基础，该方法还解决了天然膜蛋白表达量低、难纯化的问题。
一种家蚕触角结合蛋白基因及其制备方法

[发明专利]一种MnSOD-Hemolin融合蛋白及其结晶方法-CN201310001456.5无效
发明人：张耀洲;杜瑶瑶;刘玲玲;王鉴;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2013-01-04 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种MnSOD-Hemolin融合蛋白及其结晶方法，属于DNA重组技术和蛋白纯化技术领域。本发明通过引物设计，构建重组表达载体pET-28a-MnSOD-Hemolin，诱导表达得到大量重组目的蛋白，然后20mM/L的咪唑溶液洗杂蛋白，200mM/L的咪唑溶液洗脱重组目的蛋白；将得到的重组目的蛋白在经过superdex75分离，可以得到较纯的重组目的蛋白，再将该重组目的蛋白进行点晶条件的探索，液滴中可以看到不规则结构形成。本发明提供的方法，流程简单，对蛋白结晶的一种全新的探索方法，具有重要意义。
一种 mnsod hemolin 融合蛋白及其结晶方法

[发明专利]一种蛹虫草培养基及其制备方法和应用-CN201310004296.X有效
发明人：张耀洲;张丽;陈剑清;盖其静;舒特俊 -专利权人：正源堂（天津）生物科技有限公司
申请日： 2013-01-07 - 公布日： 2013-04-17 - 主分类号： C05G1/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种蛹虫草培养基及其制备方法和应用，所述蛹虫草培养基由A液与B粉混合制成；其中，所述A液含有如下浓度的成分：KH2PO41.2~1.5g/L；NaH2PO4 0.8~1.2g/L；所述B粉含有以重量计的干蚕蛹粉和大米粉，且A液与B粉的液固比为1:1；以纯净水将KH2PO4、NaH2PO4溶解、并充分混匀后再加入干蚕蛹粉、大米粉混合均匀，装入培养瓶，密封，灭菌，冷却。本发明所提供的蛹虫草培养基可用于培养蛹虫草。本发明通过研究大米和干蚕蛹粉的最佳比例而首次找到可培养出含有较高虫草素含量的蛹虫草的培养基，并发现其中干蚕蛹粉所占比例为40%以上时，虫草素的含量有所增加，并且在50%、80%以及100%时虫草素含量较佳。
一种虫草培养基及其制备方法应用

[发明专利]家蚕蚕蛹中30kD蛋白群的纯化方法-CN201210452817.3有效
发明人：张耀洲;王鉴;杜瑶瑶;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-11-13 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C07K1/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种家蚕蚕蛹中30kD蛋白群的纯化方法，属于蛋白纯化技术领域，该方法的纯化步骤为：取家蚕蚕蛹进行破碎细胞，细胞破碎液离心后取上清进行硫酸铵分级沉淀，沉淀重悬后经过80kD~100kD超滤膜超滤，流出液再经过30kD~50kD超滤膜超滤，收集截留液，最终获得30kD蛋白群。本发明的纯化方法减少了对目的蛋白的损伤及损耗，能够利用最简单的步骤获得大量较纯的目的蛋白，操作简单且成本低廉。
家蚕蚕蛹 30 kd 蛋白纯化方法

[发明专利]一种家蚕天然免疫蛋白Hemolin及其纯化方法-CN201210452712.8有效
发明人：张耀洲;杜瑶瑶;刘玲玲;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-11-12 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明涉及一种家蚕天然免疫蛋白Hemolin及其纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明以蚕蛹作为原料，通过不同的离心方法，超滤，得到含有免疫蛋白的组分，将含有目的蛋白的上清溶液然经过AKTAexplorer10蛋白纯化系统中简单的层析技术分离纯化得到目的蛋白Hemolin。本发明主要是利用了Superdex200和Superdex75凝胶层析，这为天然免疫蛋白的纯化提出了一种全新的解决方法，具有重要意义。
一种家蚕天然免疫蛋白 hemolin 及其纯化方法

[发明专利]一种提取蚕蛹油的方法-CN201210446304.1无效
发明人：张耀洲;王玉芳;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-11-09 - 公布日： 2013-03-13 - 主分类号： C11B1/10 文献下载
摘要：本发明涉及一种用匀浆法从蚕蛹中提取蚕蛹油的方法，本发明由蚕蛹预处理、匀浆法提取、制备蚕蛹油、精炼四个步骤组成。本发明与溶剂浸提法相比，通过用匀浆法提取步骤，提取时间由2小时缩短到30分钟，提取率由80.3％提高到89.7％，产品得率由24.1％提高到26.9％。本发明所制备的蚕蛹油经检测，各项指标符合文献报道的蚕蛹油质量标准。本发明具有工艺简单、提取率高、提取时间短、生产成本低等优点，可用于从蚕蛹中制备蚕蛹油。
一种提取蚕蛹方法

[发明专利]多角体基因前180bp片段及其应用-CN201210453344.9有效
发明人：张耀洲;耿文杰;毕臻乐;舒特俊;陈剑清 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-11-13 - 公布日： 2013-03-06 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了多角体基因前180bp片段及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的多角体基因前180bp片段核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。该片段可以应用于融合蛋白的表达。本发明还公开了一种表达载体，由出发载体的多克隆位点依次插入上述片段和蛋白酶酶切位点片段构建而成。本发明的多角体基因前180bp序列比其全长序列具有更优异的性质，可以与其他目的基因连接表达融合蛋白，不但能够实现提高表达量的效果，还可以增加融合蛋白在中性pH值条件下的溶解性，使其适用于蛋白酶酶切功能的最佳pH值，大大方便了目的蛋白的获取。
多角体基因 180 bp 片段及其应用