本发明公开了一种靶向敲除鸡TET2基因的sgRNA及CRISPR/Cas9系统与应用,所述sgRNA核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4任一所示,本发明还公开了靶向敲除鸡TET2基因的CRISPR‑Cas9系统,以及该系统在敲除鸡TET2基因的细胞株中的应用。本发明通过CRISPR‑Cas9技术首次靶向敲除鸡巨噬细胞系(HD11)的TET2基因,适用于较难转染和抗生素筛选敏感的免疫细胞,且确保了细胞中不含有转基因片段,同时发现敲除TET2基因的HD11细胞具有免疫抑制特征,为鸡免疫抑制机制的研究提供了理想模型。