本发明涉及细菌AB5肠毒素蛋白的定性、定量检测方法，采用超滤法先提取待测样品中的蛋白，得到样品蛋白；将样品蛋白进行酶切；然后采用膜电喷雾电离质谱法进行AB5肠毒素特异性肽段的检测，在肽段水平上定性、定量判定AB5肠毒素编码基因的存在；其中所述AB5肠毒素分别为Ctx、LT、Stx1和Stx2，其序列分别为SEQ ID NO.2所示、SEQ ID NO.3所示、SEQ ID NO.5所示、SEQ ID NO.7所示。本发明采用膜电喷雾电离质谱有效去除酶切引入小分子导致的基质效应，节省了常规质谱分析流程中的脱盐步骤，使得本发明可实现极高灵敏度下的快速检测。
本发明提供了一种同时检测12种腹泻病原菌的试剂盒及其应用，属于多重PCR检测技术领域。本发明的试剂盒含有分别针对12种常见腹泻病原菌的特异性嵌合引物和一对内参引物，特异性嵌合引物对的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-32所示。本发明试剂盒通过设置多重PCR体系，优化反应条件，经单管一次PCR、琼脂糖电泳分析产物长度实现了对12种腹泻病原菌的准确检测。本发明的试剂盒具有检测准确，灵敏度高、特异性强，简便快速的优点，适合对临床腹泻样本中常见病原菌的初筛和腹泻病的流行病学调查，具有良好的应用前景。
本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种检测甲型副伤寒沙门菌(S.Paratyphi A)的RT-LAMP试剂盒，所述试剂盒包含有六条RT-LAMP引物，与RT-LAMP反应液一起构成检测体系，本发明的六条RT-LAMP引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-6所示。本发明的试剂盒可快速、灵敏地检测目前流行的甲型副伤寒沙门菌，在对纯菌总RNA检测中，本发明试剂盒的最低检测限为50pg/反应。其操作简单，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及临床标本的检测，易于大范围推广应用。
本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种检测伤寒沙门菌(Salmonella Typhi)的RT-LAMP试剂盒，所述试剂盒包含有六条RT-LAMP引物，与RT-LAMP反应液一起构成检测体系，本发明的六条RT-LAMP引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1-6所示。本发明的试剂盒可快速、灵敏地检测目前流行的伤寒沙门菌，在对纯菌总RNA检测中，本发明试剂盒的最低检测限为5pg/反应。其操作简单，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及临床标本的检测，易于大范围推广应用。
