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[发明专利]一种适用于烟草种子的RNA提取方法-CN201410434938.4有效
发明人：武明珠;李锋;罗朝鹏;王燃;魏攀;金立锋;翟妞;杨军;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-08-30 - 公布日： 2014-11-19 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，具体是一种从烟草种子中提取RNA的方法，其特征在于：实验中先用物理方法除去脂类物质，之后用醋酸钠和异丙醇重复沉淀RNA，并用DNaseI去除RNA中的基因组DNA；最终得到浓度高、质量好、完整性好的RNA。本发明相比现有技术所具备的优点在于：1.提供了一种适合烟草种子总RNA的提取方法。2.有效去除了脂类物质。3.DNaseI除去提取RNA中的基因组DNA污染。4.用NaAc和异丙醇共沉淀去除多糖类物质。5.异丙醇在室温下沉淀RNA能最大程度的降低盐的共沉淀，减少盐类物质对后续实验的影响。6.可大大节约提取时间，实验效果好。
一种适用于烟草种子 rna 提取方法

[发明专利]一种检测新鲜烟叶萜类化合物代谢组学方法-CN201410375770.4有效
发明人： 金立锋;郑庆霞;陈霞;周会娜;刘萍萍;陈千思;李锋;王燃;罗朝鹏;魏攀;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-08-01 - 公布日： 2014-10-15 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：一种检测新鲜烟叶萜类化合物代谢组学方法，其特征在于：将采集后的鲜烟叶进行冷冻干燥、磨碎，用两步法进行提取，第一步用溶剂萃取法，提取游离的萜类；第二步采用碱裂解法提取结合型的萜类，两步提取合并后进行衍生化，最终样品利用GC-MS全扫描方法同SD全扫描方法进行分析。本发明的突出优点是建立了一种基于GC-MSQQQ平台的烟草萜类物质代谢组方法，该方法可检测到烟草中15种萜类物质，该方法精密度，回收率及样品稳定性均符合检测要求，并且方法简单、高效且重现性好，植物萜类方法检测尚无统一标准，该方法建立对于研究烟草萜类物质代谢具有重要意义。
一种检测新鲜烟叶化合物代谢方法

[发明专利]一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法-CN201410221024.X有效
发明人：陈霞;周会娜;金立锋;陈千思;刘萍萍;翟妞;郑庆霞;卢鹏;王燃;魏春阳;杨军;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-05-23 - 公布日： 2014-07-30 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：一种LC-MS/MS检测烟草及烟草制品中特有亚硝胺的样品前处理方法，步骤如下：1）配制乙酸铵缓冲溶液；2）烟草及烟草制品的干燥、粉碎；3）粉碎好的样品加入乙酸铵缓冲溶液，超声提取；4）提取完的样品室温高速离心，得第一上清液；5）在第一上清液中加入乙酸乙酯进行萃取净化后，离心得第二上清液；6）取第二上清液经氮气吹干、去离子水复溶，制得待测样品；7）通过LC-MS/MS对待测样品中含有的烟草特有亚硝胺进行检测。本发明的优点在于：样品前处理方法简单易行，利用乙酸铵缓冲溶液将烟草特有亚硝胺溶出，并通过乙酸乙酯液液萃取进行净化，除去了蛋白质和干扰物质，得到除杂后的精制样液，使得样品检测具有较高精确度，且提取效率高，操作简便、省时，试剂消耗量小。
一种 lc ms 检测烟草制品特有亚硝胺样品处理方法

[发明专利]一种节能高效的新鲜烟叶冷冻干燥方法-CN201410140980.5有效
发明人：周会娜;翟妞;陈千思;刘萍萍;金立锋;陈霞;郑庆霞;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-04-10 - 公布日： 2014-07-16 - 主分类号： A24B3/10 文献下载
摘要：一种节能高效的新鲜烟叶冷冻干燥方法，其特征在于：具体步骤如下：1）冻干机预冷、装料，2）新鲜烟叶样品预冻；3）一次干燥；4）二次干燥；5）最后升温至20℃，真空度为0-5mTorr，在该条件下继续干燥，使样品充分干燥并将温度恢复至室温，可避免取出样品后由于温度较低形成冷凝水而使样品再次吸水。本发明的优点在于：1，提供了一种大批量鲜烟叶样品的冷冻干燥方法，所获得的冻干样品可直接用于烟叶代谢组学分析，保证烟叶样品冷冻干燥过程、程度的一致性、分析数据的统一性；2，冷冻、干燥过程节能高效，3、程序设定好后，一键操作即可，一般人员就可以完成，简单易行。
一种节能高效新鲜烟叶冷冻干燥方法

[发明专利]一种利用共晶点，共熔点判断烟叶样品冷冻干燥预冷温度的方法-CN201410140978.8有效
发明人：刘萍萍;周会娜;陈千思;翟妞;金立锋;陈霞;郑庆霞;林福呈;卢鹏 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-04-10 - 公布日： 2014-07-16 - 主分类号： A24B3/10 文献下载
摘要：一种利用共晶点、共熔点判断烟叶样品冷冻干燥预冷温度的方法，其特征在于：是以冻干机为平台，通过差式扫描热量法（DSC）对不同时期的新鲜烟叶样品共晶点和共熔点进行测定，确定新鲜烟叶样品冷冻干燥合适的一次干燥温度和二次干燥温度。本发明的突出优点在于：围绕新鲜烟叶的真空冷冻干燥工艺，确定出节能高效的冷冻温度，为大批新鲜烟叶样品的冷冻干燥提供合适的工艺，从而达到节能高效的目的。
一种利用共晶点熔点判断烟叶样品冷冻干燥预冷温度方法

[发明专利]LC-MS研究稻瘟病菌代谢组学的样品制备及检测方法-CN201410121444.0有效
发明人：张勇;林福呈;金立锋;冯晓晓;苏珍珠;刘小红;卢建平 -专利权人：浙江大学
申请日： 2014-03-28 - 公布日： 2014-07-02 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于LC-MS研究稻瘟病菌代谢组学的样品制备法，包括稻瘟病菌菌丝样品的培养、过滤收集、液氮灭活处理、冷冻干燥；冻干后的菌丝块于-70℃冷藏作为样品备用。本发明还同时提供了利用上述样品进行的检测法，将样品研磨破碎后进行溶剂提取；提取完毕后，离心，所得上清过0.22μm的有机相微孔滤膜后进行上机检测：选用C18色谱柱（2.1×100mm，1.8μm）；进样量2μL；柱温60℃；流动相组成为含0.1%FA的水和含0.1%FA的乙腈，流速0.4mL/min；质谱采用ESI（+）电离方式，质量扫描范围100～1100。采用本发明的提取及检测方法能得到较好的TIC图。
lc ms 研究稻瘟病代谢样品制备检测方法

[发明专利]一种汞离子的检测方法-CN201410140977.3在审
发明人：刘萍萍;周会娜;陈千思;翟妞;金立锋;陈霞;郑庆霞;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-04-10 - 公布日： 2014-06-25 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：一种汞离子的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：1）将标准汞离子溶液和金纳米簇溶液进行混合，建立检测纳米簇的荧光信号淬灭和汞离子量之间的标准曲线；2）将样品溶液和金纳米簇溶液进行混合，将检测纳米簇的荧光信号淬灭强度带入标准曲线，得到样品中汞离子的含量。本发明的优点在于：灵敏度高，其他离子对汞离子检测干扰小，可实现对汞离子的选择性检测，从而达到快速检测汞离子浓度的目的。该发明在汞离子的检测中具有广阔的应用前景。
一种离子检测方法

[实用新型]一种自动滚径打点的纵向进击装置-CN201320657379.4有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B23Q7/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种自动滚径打点的纵向进击装置，包括支架、设在支架上的丝杆、连接在丝杆一端的伺服电机、设在丝杆两侧的直线导轨、设在支架上的若干个气夹，本结构设计一种自动将物料纵向进击的结构，结构紧凑，操作方便，自动化程度高，减小劳动强度。
一种自动打点纵向进击装置

[实用新型]自动滚径打点流水线-CN201320657403.4有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B23P23/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及自动滚径打点流水线，包括底座、设在底座上的自动加工装置、控制自动加工装置的PLC系统控制器，所述自动加工装置包括产品依次通过加工的上料漏斗、X方向转接工位、Y方向进给工位、滚径工位和打点工位五个装置，所述X方向转接工位与Y方向进给工位垂直交叉连接，所述上料漏斗、滚径工位、打点工位分别与X方向转接工位相互连接，本结构设计一种适用于拉杆天线或类似产品都通用的自动输送加工流水线，自动化程度高，降低劳动强度，结构紧凑，提高工作效率。
自动打点流水线

[实用新型]一种自动滚径打点的横向转载装置-CN201320656643.2有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B65G47/90 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种自动滚径打点的横向转载装置，包括支架、设在支架上的伺服电机、通过伺服电机驱动的丝杆和若干个转载夹，本结构设计一种自动将物料横向转载到另一个装置的结构，结构紧凑，操作方便，自动化程度高，减小劳动强度。
一种自动打点横向转载装置

[实用新型]自动滚径打点设备-CN201320657391.5有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B23P23/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及自动滚径打点设备，包括底座、设在底座上的自动加工装置、控制自动加工装置的PLC系统控制器，所述自动加工装置包括产品依次通过加工的上料漏斗、X方向转接工位、Y方向进给工位、滚径工位和打点工位五个装置，所述X方向转接工位与Y方向进给工位垂直交叉连接，所述上料漏斗、滚径工位、打点工位分别与X方向转接工位相互连接。本结构设计一种适用于拉杆天线或类似产品都通用的自动输送加工流水线，自动化程度高，降低劳动强度，结构紧凑，提高工作效率。
自动打点设备

[实用新型]一种高效自动打点装置-CN201320656959.1有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B21D22/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种高效自动打点装置，包括支架、设在支架上的气缸、设在支架通过气缸驱动的打点四组工位和若干压杆，本结构设计一种能够对物料自动打点的结构，自动化程度高，能够提高工作效率，减小劳动强度。
一种高效自动打点装置

[实用新型]一种高效自动滚径装置-CN201320657448.1有效
发明人： 金立锋 -专利权人：嘉兴市尤纳特电子科技有限公司
申请日： 2013-10-23 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： B21D17/04 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种高效自动滚径装置，包括伺服电机支架、设在伺服电机支架上的伺服电机、变频电机、滚轮、轴承，所述变频电机与滚轮一体化设置并且可拆卸，本结构设计一种能够对物料自动滚径的结构，自动化程度高，能够提高工作效率，减小劳动强度。
一种高效自动装置

[发明专利]烟草鲨烯合酶蛋白、烟草鲨烯合酶基因及其应用-CN201410062823.7有效
发明人：陈千思;周会娜;刘萍萍;王燃;翟妞;金立锋;魏春阳;陈霞;李锋;杨军;郑庆霞;林福呈 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-02-24 - 公布日： 2014-05-28 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种烟草鲨烯合酶蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。烟草鲨烯合酶基因NtSQS是烟草甾醇合成途径的关键调控基因。在幼嫩组织中特异高表达，将构建好的病毒介导的基因沉默载体TRV-NtSQS接种本氏烟草，并得到高沉默效率的植株，检测本氏烟草中植物甾醇的含量，发现基因沉默植株中甾醇含量显著下降，下降了41.26%，表明沉默该基因可以显著的降低植物的甾醇含量。烟草鲨烯合酶基因NtSQS是烟草甾醇合成途径的关键调控基因，可用于调节烟草的甾醇含量，有助于低甾醇优质烟草的基因工程育种。
烟草鲨烯合酶蛋白基因及其应用

[发明专利]一种GC-MS靶向性烟草样品甾醇提取方法-CN201410004090.1有效
发明人：翟妞;陈千思;刘萍萍;金立锋;周会娜;陈霞;赵阁;张丽;王晓瑜;孙世豪 -专利权人：中国烟草总公司郑州烟草研究院
申请日： 2014-01-06 - 公布日： 2014-04-09 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：一种GC-MS靶向性烟草样品甾醇提取方法，包括以下工艺步骤：1）烟草样品冷冻冻干，粉碎机打碎；2）粉碎好样品50mg加入正己烷1.5ml，超声提取；3）提取完样品室温高速离心，上清转移到色谱瓶，氮气吹干，为一；4）沉淀加80%甲醇、20%KOH溶液1.2ml；5）高速离心，取上清转移至色谱瓶，加正己烷1.0ml，震荡、静置；6）取上清，加饱和NaCl1.0ml，取上清为溶液二，一二合并，氮气吹干，加氯仿0.5ml溶解后，即为专一适于GC-MS测定的烟草样品甾醇上样分析溶液。本发明的优点在于：提供了一种最适合烟草叶片甾醇的提取方法；样品用量少，仅为50mg；有机试剂使用种类少，使用量少，相对便宜，毒性较小；提取时间更短，样品重现性较好。
一种 gc ms 靶向烟草样品提取方法

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