本发明公开烟草烟碱代谢相关转录因子NtbHLH66及其编码基因、RNAi干扰载体和应用。本发明的烟草烟碱代谢相关转录因子编码基因NtbHLH66基因，其核苷酸序列为：(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。通过对烟草NtbHLH66基因的表达进行干扰，发现将NtbHLH66基因沉默后，与对照株系相比，NtbHLH66基因干扰株系苗期叶片中烟碱含量明显降低。本发明为降低烟草中烟碱含量提供新的策略和路径，在低烟碱烟草品种育种领域具有广阔的应用前景和巨大的经济效益潜力。
本发明公开了一个烟草烟碱代谢相关转录因子基因NtbHLH68及其编码蛋白与应用。所述烟草转录因子NtbHLH68包含的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其编码蛋白质包含的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本申请通过对烟草NtbHLH68的RNAi干扰沉默，发现将NtbHLH68基因沉默后，和对照植株比，苗期干扰株系叶片中烟碱含量明显降低。利用这一特性，可为烟草低烟碱品种培育提供新的策略和路径。因此，烟草转录因子NtbHLH68具有广阔的应用前景。
本申请属于烟草基因组功能解析技术领域，具体涉及一个烟草NtIMK2类受体蛋白激酶及其在抗旱中的应用。该基因长度为2511bp，碱基序列如SEQ ID No.1所示。将该基因超表达后，可用于增强植物耐旱性，将该基因沉默后，可增加植物对干旱的敏感性。前期在对烟草基因组解析基础上，结合相关磷酸化蛋白质组学、转录组、和miRNA‑seq等多组学整合分析，发现一个LRR类受体激酶（RLKs）NtIMK2基因的表达与干旱响应高度相关。为进一步确定该基因功能及其在植物干旱胁迫响应机制中作用，本申请中，发明人利用RNAi干涉及过表达技术，对NtIMK2基因在干旱胁迫中的功能进行了初步研究，结果表明，超表达NtIMK2基因时，能明显提高植物的抗旱能力。
本发明涉及一种影响烟草腺毛密度基因NsCINS、编码蛋白及其应用，其基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过构建NsCINS基因超量表达载体，转化至烟草中，获得NsCINS基因超表达的烟草植株，发现转基因烟草植株的腺毛密度显著增加，表明该基因与烟草腺毛密度密切相关。本发明有助于研究腺毛及香气形成的机制，为进一步高腺毛密度烟草新品种培育奠定技术基础。
本发明“一组降低雪茄烟叶氯含量的转基因引物、载体、转化体、试剂盒及其应用和方法”属于转基因技术领域。本发明提供一组降低雪茄烟叶氯含量的转基因引物，其包括：序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的上下游引物P1和P2；或，序列分别如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的上下游引物P3和P4。本发明还提供基于该引物获得的转基因载体、转化体、试剂盒和方法。本发明转基因引物获得的重组载体转化获得的转化体转基因烟草植株后可以使转基因烟草植株体内的氯离子含量大幅度降低，最高的降低率接近70％。
