本发明属于生物技术领域,涉及一种基于一步法荧光定量巢式RT‑PCR检测寨卡病毒的引物组及试剂盒;所述引物组包括一对外部引物和一对内部引物,所述外部引物的上下游序列如SEQ ID NO:1~2所示,所述内部引物的上下游序列如SEQ ID NO:3~4所示;本发明设计的ZIKV一步法荧光定量巢式RT‑PCR引物引物特异性好、灵敏度高其重复性好,设计的一步法荧光定量巢式RT‑PCR检测方法可灵敏、准确、稳定和快速的检测寨卡病毒的存在,可以检测到的最低浓度是6.4✕10‑1 TCID50/mL的病毒。为快速灵敏地检测ZIKV提供了技术手段,对目前寨卡病毒的临床快速诊断和公共防控都具有重要意义。