本公开提供了一种非洲猪瘟病毒P72基因荧光探针PCR检测引物探针组,所述引物探针组的正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,特异性荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID No.3,其中,所述特异性荧光探针的5’端标记有荧光报告基团,3’端标记有荧光淬灭基团。本公开还提供了一种非洲猪瘟病毒P72基因荧光探针PCR检测试剂盒及方法。本公开的试剂盒及其检测方法具有覆盖范围广,检测时间短,检测效率高,可用于猪的唾液、鼻腔拭子、血液、组织等样本中的非洲猪瘟病毒检测。