本发明涉及分子诊断技术领域,具体涉及一种基于RPA‑LbCas12a体系可视化检测类鼻疽的组合物及其应用。本发明提供用于检测类鼻疽伯克霍尔德菌的组合物,包括RPA引物、crRNA、LbCas12a蛋白酶和ssDNA荧光探针;所述RPA引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示;所述crRNA的转录模板的核苷酸序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:9所示。基于所述组合物,本发明还提供一种检测类鼻疽伯克霍尔德菌的方法。该方法通过RPA扩增与CRISPR‑Cas12a系统的结合,获得了检测下限为2.7拷贝/μL的灵敏度以及更强的特异性,并且能在1h内检出样本中是否含有类鼻疽伯克霍尔德菌,无需借助大型仪器设备,有助于类鼻疽的快速诊断和筛查。
本发明涉及病毒分子检测领域,具体而言,涉及用于检测4型疱疹病毒的核酸序列组合及其应用。用于检测4型疱疹病毒的核酸序列组合,包括以下引物对以及探针;所述引物对如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示,所述探针的核酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明提供的用于检测4型疱疹病毒的核酸组合,其包括引物和与引物相对应的探针,该核酸组合针对4型疱疹病毒特异性基因EBNA‑LP设计,结合实时PCR技术,对4型疱疹病毒进行检测,具有灵敏度高,特异性好的特点。
本发明涉及病毒分子检测领域,具体而言,涉及一种用于检测呼吸道病毒的核酸组合及其应用。一种用于检测呼吸道病毒的核酸组合,所述核酸组合包括以下引物对及其对应的探针中的一种或多种,各引物对及其对应的探针如SEQ ID NO:1‑9所示。该核酸组合针对4型疱疹病毒、腺病毒和呼吸道合胞病毒特异基因设计,结合实时荧光定量PCR技术和三重荧光探针,同时对4型疱疹病毒、腺病毒和呼吸道合胞病毒进行检测,具有灵敏度高,特异性好的特点。
本发明涉及生物技术领域,具体而言,提供了一种用于Real‑time PCR检测具核梭杆菌的引物组、产品及检测方法与应用。本发明提供的引物组序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示,该引物组特异性强,灵敏度高,实用性强。采用Real‑time PCR进行检测,可以实现快速定性检测,假阳性率低,成本也低,适用现场快速检测。
本发明涉及生物技术领域,具体而言,涉及一种用于检测螺杆菌的核酸组合,其包括引物和与引物相对应的探针,引物包括SEQ ID NO.3所示的下游引物,还包括碱基序列如SEQ ID NO.1所示的第一上游引物及如SEQ ID NO.2所示的第二上游引物中的至少一种;探针包括SEQ ID NO.4所示的第一探针和SEQ ID NO.5所示的第二探针中的至少一种。该核酸组合针对幽门螺杆菌特异性GlmM设计,两种上游引物及两种探针的设计都是为了防止幽门螺杆菌出现突变而发生漏检,结合PCR技术,对幽门螺杆菌进行检测,具有灵敏度高,特异性好的特点。