本发明公开了用于鉴别木通及其两种混伪品的微滴数字PCR方法及应用。基于木通及其常见混伪品关木通和川木通的ITS2序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,开发单重和三重微滴数字PCR技术。单重微滴数字PCR技术能够分别特异性检测木通、川木通和关木通,三重微滴数字PCR技术可以一次性在同一PCR反应体系中同时检测三种药材,不同引物组之间没有相互干扰,可用于市售木通药材及相关中成药检测。所述特异性引物和TaqMan探针为SEQ ID No.1‑9所示序列。该方法特异性强,灵敏度高,适用于痕量DNA的检测,可为中药质量控制和市场监管提供依据,保证中药安全性及有效性。
本发明提供了一种用于检测中成药中三七的方法。基于三七的ITS2序列设计特异性引物和TaqMan探针,构建荧光定量PCR反应体系,能够区分三七及其常见混伪品,用于市售含三七中成药检测。所述特异性引物和TaqMan探针为SEQ ID No.1‑3所示的序列。该方法特异性强,灵敏度高,重复性好,可作为中成药质量控制和市场监管的有力手段,保证中药安全性及有效性。
本发明提供了一种新的用于快速鉴别冬虫夏草及其混伪品的荧光定量PCR检测用特异性引物和Taqman探针以及检测方法,能够用于对冬虫夏草药材、含冬虫夏草的成方制剂及其他相关产品进行真伪鉴定。本发明还提供了该特异性引物和Taqman探针用于冬虫夏草及其混伪品鉴别的便携式荧光定量PCR检测的用途,所述特异性引物及Taqman探针为SEQ ID No.1‑3所示的序列。所述方法采用Taqman探针及荧光定量PCR法,检测样品中应有的冬虫夏草药材。应用于冬虫夏草药材、含冬虫夏草的成方制剂及其他相关产品的质量控制,所述方法特异性强、灵敏度高、重复性好。
本发明公开了一种宁夏枸杞和枸杞SNP快速鉴定方法,其包括如下步骤:1)以待测样品DNA为模板,扩增含有SEQ ID No.1所示的序列;2)对扩增产物进行测序,分析SEQ ID No.1所示的序列,如果自SEQ ID No.1所示序列的5’端起第97位、第173位为C,第200位为G,则鉴定为宁夏枸杞,如果自SEQ ID No.1所示序列的5’端起第97位、第173位为T,第200位为A,则鉴定为枸杞。本发明能够实现宁夏枸杞、枸杞原植物、药材和生饮片的快速、准确鉴定。
本发明公开了滇鸡血藤药材DNA条形码标准序列和滇鸡血藤药材快速分子鉴定的方法,其特征在于所述DNA条形码标准检测基因为叶绿体trnH-psbA基因,具有基因序列SEQ ID NO.1。该方法可以为滇鸡血藤药材提供分子身份证,从而对其进行准确快速的鉴定。该方法主要流程包括:滇鸡血藤实验样本首先由形态学专家鉴定,DNA分离提取及PCR扩增、测序,测序结果通过手工校对、序列拼接,所得序列与对照药材的序列进行比对,以确保结果的可靠性。本发明采用传统的形态学鉴定与分子鉴定相结合,可确保物种鉴定的准确性和可靠性。本发明提供的滇鸡血藤的DNA条形码标准基因序列及方法能够实现滇鸡血藤药材的快速准确鉴定,缩短鉴定时间。