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[发明专利]一种基于T3 DNA连接酶的镉离子检测方法-CN202110365775.9有效
发明人：李昺之;张幸;锁缇莹;谢思盈;吉峙润 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2021-04-06 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于T3 DNA连接酶的镉离子检测方法，它是通过设计一种DNA模板，当目标物镉离子存在的情况下，目标物拉近了链两端的距离，使得3’端和5’端互补配对，形成平末端；在T3 DNA连接酶的作用下，使该模板环化；再加入一段与环状模板互补配对的寡核苷酸链，作为后续扩增反应的引物；在加入phi 29 DNA聚合酶的作用下，开启滚环扩增反应，得到较长的一段核苷酸链条；在得到的产物中加入荧光染料SYBR Green I，使染料插入到DNA链条中，在517‑537nm的激发波长下，用紫外分光光度计进行检测样品，然后在487‑507nm的激发波下测得荧光强度；使用Real‑Time PCR方法对镉离子进行检测，验证本发明的方法的准确性。
一种基于 t3 dna 连接酶离子检测方法

[发明专利]一种生物传感器检测转录因子NF-κB p50的方法-CN202110289874.3有效
发明人：李昺之;张幸;谢思盈;罗毅轩;吉峙润 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2021-03-18 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12Q1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种生物传感器检测转录因子NF‑κB p50的方法，该方法将带有PAM结构域的双链DNA作为激活序列，与测试样品和反应缓冲液混合孵育后，将核酸外切酶III(Exo III)及反应缓冲液添加到溶液中，孵育，再将配置好的CRISPR报告溶液(CRM)加入溶液中以启动CRISPR反应，测量所得的样品的荧光，最后根据不同浓度的测试样品的荧光值绘制浓度与荧光强度之间的关系图，检测样品的荧光值并代入回归曲线，计算出NF‑κB p50的浓度。本发明的NF‑κB p50检测方法具有灵敏度高，选择性强，成本低的优点，能够实现肿瘤中的NF‑κB p50高效检测及对于NF‑κB p50抑制性药物的筛选和评估。
一种生物传感器检测转录因子 nf p50 方法

[发明专利]一种DNA连接反应与滚环扩增联用的生物传感器检测结构特异性核酸酶FEN1的方法-CN202011472708.9有效
发明人：李昺之;张幸;夏安祺;吉峙润;谢思盈;锁缇莹;罗毅轩 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2020-12-15 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种DNA连接反应与滚环扩增联用的生物传感器检测结构特异性核酸酶FEN1的方法，该方法将带有5’端序列片段的哑铃状DNA探针、测试样品和反应缓冲液混合孵育，然后，将T4DNA连接酶及反应缓冲液添加到溶液中，孵育，再将引物和RCA混合物滴入上述所得的样品中以启动RCA反应，测量上述所得的样品的荧光，最后检测不同浓度的测试样品的荧光值绘制浓度与荧光强度之间的关系图，检测待测样品的荧光值，代入关系图计算出FEN1的浓度。本发明的FEN1检测方法具有灵敏度高，选择性强，成本低的优点，能够实现肿瘤中的FEN1高效检测。
一种 dna 连接反应扩增联用生物传感器检测结构特异性核酸酶 fen1 方法

[发明专利]一种诱导型变构探针结合滚环扩增的镉离子传感方法-CN202010720349.8有效
发明人：黄和;李昺之;张幸;锁缇莹;张世林;谢思盈;夏安祺 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2020-07-24 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明公开了一种诱导型变构探针结合滚环扩增的镉离子传感方法，该方法可以实现对微量镉离子的高灵敏性和特异型的检测。空气、水、土壤中潜在的重金属污染无处不在，严重影响了人们的生活质量和身体健康。重金属离子镉是粮食污染中一种常见的重金属。镉很易蓄积在人体的肾脏、骨组织、眼睛和其他器官组织中，尤其在肾脏和骨组织中的蓄积现象最为严重，可引发肾衰竭、易碎性骨折等疾病，威胁人体健康。由于及其微量的镉离子也会造成人体的严重损伤，所以对于环境的保护以及食品的安全具有重大意义。
一种诱导型变构探针结合扩增离子传感方法

[发明专利]一种基于环形变构DNA电化学反应检测微囊藻毒素的方法-CN202010720347.9有效
发明人：黄和;李昺之;张幸;锁缇莹;夏安祺;谢思盈;张世林 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2020-07-24 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： G01N27/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于环形变构DNA电化学反应检测微囊藻毒素的方法，该方法将DNA探针连接在金电极上，然后将中间插入微囊藻毒素适配体的环状DNA序列与金电极上的DNA探针混合孵育形成复合物；其中，环形DNA序列的两个末端分别与金电极上的DNA探针互补；加入样品溶液与复合物进行共孵育，然后依次加入T4 DNA连接酶和Phi 29 DNA聚合酶，再通过检测加入离子后金电极的电流信号的强弱，实现对目标物的定量检测。本方法制备简单，反应快速，对样品的要求不高，具有较高的灵敏度和特异性，有利于快速的检测出微囊藻毒素的含量。
一种基于环形 dna 电化学反应检测微囊藻毒素方法

[发明专利]一种指数扩增反应和CRISPR-Cas 12a结合的生物传感器及其检测方法和应用-CN202110365781.4在审
发明人：李昺之;张幸;锁缇莹;吉峙润;谢思盈 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2021-04-06 - 公布日： 2021-08-31 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明公开了一种指数扩增反应和CRISPR‑Cas 12a结合的生物传感器及其检测方法和应用，该传感器的DNA模板由两段相同的序列，通过Nt.BstNI的酶切位点连接而成；其中，DNA模板的5’端复制出来的反义链，其临近3’端附近可以与CRISPR‑Cas12a的crRNA互补配对；当样品中含有Let‑7a的序列，DNA模板与Let‑7a序列互补成双链，在聚合酶的作用下启动整个体系的扩增反应，接着在Nt.BstNI的作用下，切割出能够与CRISPR‑Cas12a的crRNA互补的单链DNA，从而激活CRISPR‑Cas12a的切割荧光团标记的单链DNA的能力；反之，若样品中没有Let‑7a，则整个反应不会发生。
一种指数扩增应和 crispr cas 12 结合生物传感器及其检测方法应用