发明公开了一种抗p16单克隆抗体,抗p16单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列由SEQ ID No.2所示的DNA序列所编码,抗p16单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列由SEQ ID No.3所示的DNA序列所编码;所述抗p16单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.4所示的氨基酸序列,所述p16单克隆抗体的轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID No.5所示的氨基酸序列。本发明获得的杂交瘤(30859‑S17)分泌产生的单克隆抗体,能识别重组蛋白p16分子和表达p16的淋巴细胞,能够检测高表达p16蛋白的皮肤鳞状细胞癌、胰腺癌、黑素瘤、淋巴瘤、食管癌、宫颈癌等多种肿瘤组织。