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[发明专利]一种利用木质纤维素水解液生产丁二酸的高耐受酵母工程菌株及其应用-CN202310891526.2在审
发明人： 祁庆生;卢雪梅;崔志勇;谷金红 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于微生物及发酵工程技术领域，具体涉及一种利用木质纤维素水解液生产丁二酸的高耐受酵母工程菌株及其应用。本发明是在酵母细胞中将谷胱甘肽合成酶超表达，有助于提高其糠醛耐受能力。经试验证明，所述菌株能够利用含有糠醛等抑制物的木质纤维素水解液。经发酵培养后，丁二酸产量达到37.4g/L，转化率达到0.78g/g葡萄糖/木糖。同时上述工程菌在培养过程中可以进行低pH发酵，从而减少工业生产过程中对培养液pH进行调节的步骤，进一步节约成本，从而表明其在在食品、化工及可降解材料等诸多领域具有良好的实际应用价值和前景。
一种利用木质纤维素水解生产丁二酸耐受酵母工程菌株及其应用

[实用新型]一种处理转炉煤气的静电除尘器-CN202321368917.8有效
发明人： 祁庆生;戎建宇;朱骏;商林跃;徐玉红 -专利权人：江苏天之洁环境工程有限公司
申请日： 2023-05-31 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： B03C3/04 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种处理转炉煤气的静电除尘器，包括静电除尘器的主体，主体下方固定安装有支撑腿，主体的底部固定安装有出灰口，出灰口的下方设置有运输管，运输管上表面固定安装收集斗，运输管的下表面固定安装有出料管，收集斗套设在出灰口上，运输管的中间设置有凝结组件，通过凝结组件使灰尘凝结，运输管的中间设置有输送组件，通过输送组件实现灰尘的运送。本实用新型，静电除尘器所排出的灰尘便会转变成湿润的泥浆，从而可以避免灰尘扬起，进而起到保护周边环境的作用，同时也实现了对工人的身体健康保护，也大大的方便对其的转运工作，使得其在转运过程中，不会被风吹起，有效保护了转运过程中的环境安全，进一步方便使用。
一种处理转炉煤气静电除尘器

[发明专利]高产2-岩藻糖基乳糖的工程菌株及其构建方法与应用-CN202310628277.8在审
发明人： 祁庆生;张妍;刘萌萌 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-05-30 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，涉及高产2'‑岩藻糖基乳糖的工程菌株及其构建方法与应用。本发明通过代谢工程改造使得解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)具有吸收乳糖及在细胞内合成GDP‑L‑岩藻糖的能力，并通过表达融合Ub标签的α‑1,2‑岩藻糖基转移酶使细胞能够提高2'‑岩藻糖基乳糖的产量，随后通过增强GDP‑D‑甘露糖合成途径及NADPH再生途径，所获得的重组解脂耶氏酵母菌株具有高产2'‑岩藻糖基乳糖的能力。
高产岩藻糖基乳糖工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种β-法尼烯合成酶突变体及其应用-CN202310293091.1在审
发明人：侯进;张瑾;祁庆生;刘营航 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-03-23 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明提供一种β‑法尼烯合成酶突变体及其应用，属于蛋白质工程改造和工程菌技术领域。本发明首先使用蛋白质工程对β‑法尼烯合成酶AanFS进行了半理性设计，采用同源建模，使用分子对接和分子动力学模拟并计算出有利于提高其活性的突变体，经实验验证后得到多个活性提高的位点并组合突变，并得到的最优突变体AanFSK197T/F180H使β‑法尼烯产量较野生型提高了283.8％。同时利用基因工程技术获得表达该β‑法尼烯合成酶突变体的解脂耶氏酵母菌株Q26菌株，该菌株能够利用油酸和厨余用油为碳源进行β‑法尼烯的生产，是高产β‑法尼烯的优良菌株，因此具有良好实际应用之价值。
一种法尼烯合成突变体及其应用

[发明专利]一种角质酶变体及其制备方法和在塑料降解中的应用-CN202310206008.2在审
发明人： 祁庆生;苏田源;崔志勇;郑义;李庆宾 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-03-06 - 公布日： 2023-06-23 - 主分类号： C12N9/18 文献下载
摘要：本发明属于酶工程和塑料降解技术领域，具体涉及一种角质酶变体及其制备方法和在塑料降解中的应用。本发明以角质酶ICCG为出发酶利用生物信息学及蛋白质工程技术进行工程改造，获得一系列底物PET亲和力提高的突变体，经试验验证，所获得的角质酶变体对PET具有更高亲和力，同时对于PET的水解活性更高，只需要3.7小时或更短就可以水解90％的PET底物；同时超过99％的水解产物是对苯二甲酸和乙二醇单体，几乎没有不完全降解的BHET和MHET，水解更加彻底，从而更加有利于满足PET废弃物的解聚再利用的实际应用需求，因此具有良好的实际应用之价值。
一种角质变体及其制备方法塑料降解中的应用

[发明专利]一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用-CN202310295225.3在审
发明人：卢雪梅;张书航;祁庆生 -专利权人：山东大学
申请日： 2023-03-23 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明提供本发明属于微生物技术和酶工程技术领域，具体涉及一种溶葡萄球菌酶变体及其在益生菌中表达的方法及其应用。本发明首先实现溶葡萄球菌酶在益生菌EcN中组成型分泌和表达，所得重组溶葡萄球菌酶具有良好的杀菌活性和相对广谱性。进一步定向改造溶葡萄球菌酶，以获得与原始蛋白质相比具有更高热稳定性的突变蛋白。基于上述特点，我们建立了一种低成本、简单的，即利用组成型表达的益生菌菌株EcN‑Lys(To)与食品(牛奶)中致病金黄色葡萄球菌的共培养进而控制病原菌的生长的方法。为溶葡萄球菌酶在食品杀菌行业的应用奠定了基础。
一种葡萄球菌变体及其益生菌中表达方法应用

[发明专利]分裂基因在调控苏氨酸合成和细胞形态及生长中的应用-CN202211727433.8在审
发明人：梁泉峰;王苏蒙;祁庆生 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于基因工程和微生物技术领域，具体涉及分裂基因在调控苏氨酸合成和细胞形态及生长中的应用。本发明通过试验证明，通过生物元件调控分裂基因的表达强度，则对目标微生物的苏氨酸合成以及其细胞形态和生长均会产生影响。如当ftsZ表达太强时对微生物细胞生长影响较小，且对苏氨酸生产影响较小，甚至不利于苏氨酸生产，而当ftsZ表达较弱时利于细胞生物量的积累，且促进苏氨酸合成。因此通过调控上述分裂基因表达强度，从而实现对菌株发酵生产苏氨酸的动态调控，不仅有利于实际生产，同时亦可将其作为模型菌株进行苏氨酸合成机制以及细胞形态以及生长机制的相关研究，具有良好的实际应用之价值。
分裂基因调控苏氨酸合成细胞形态生长中的应用

[发明专利]一株石蜡和聚乙烯高效降解菌及其应用-CN202211181288.8在审
发明人：苏田源;袁英博;典龙阳;梁泉峰;祁庆生 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-09-27 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于微生物和环保技术领域，具体涉及一株石蜡和聚乙烯高效降解菌及其应用。本发明筛选获得的鸟氨酸拉乌尔菌DY‑2415，不仅能够有效降解液体石蜡，同时对聚乙烯塑料有很好的降解效果，同时发现该菌株对聚苯乙烯也有一定的降解效果。利用本发明的菌株对聚乙烯薄膜进行降解，两个月后，塑料表面破损严重，有明显凹坑出现，失重率达8％，表明其具有良好的聚乙烯降解效果。本发明降解菌株具有绿色环保，成本低廉，操作方便等优点，为石蜡清防处理以及聚乙烯等聚烯烃类塑料废弃物的处理提供了新资源和思路，因此具有良好的实际应用价值。
石蜡聚乙烯高效降解及其应用

[发明专利]一种金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶及其变体和应用-CN202211039754.9在审
发明人：卢雪梅;祁庆生;苌妍;李庆宾 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-08-29 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C12N9/78 文献下载
摘要：本发明属于微生物技术和酶工程技术领域，提供一种金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶及其变体和应用。本发明从牛奶中分离出一株金黄色葡萄球菌噬菌体DZ25，并克隆、表达出裂解酶基因，命名为LysDZ25，进而研究其性质并进行理性设计，获得一系列金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶变体，并通过实验验证筛选获得在高温条件下同样具有显著金黄色葡萄球菌裂解性能的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶变体，非常有助于实际生产生活应用，为开发控制金黄色葡萄球菌的新型有效的生物绿色抑制剂奠定了基础，因此具有良好的实际应用之价值。
一种金黄色葡萄球菌噬菌体裂解及其变体应用

[发明专利]一种溶葡萄球菌酶变体及其制备方法和应用-CN202211032377.6在审
发明人：卢雪梅;祁庆生;文康舒;李庆宾 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-08-26 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：本发明提供一种溶葡萄球菌酶变体及其制备方法和应用，属于生物技术和酶工程技术领域。本发明以热稳定性作为鉴定酶优良特性的重要指标，对野生型溶葡萄球菌酶进行基于理性设计的热稳定性改造，获得一系列溶葡萄球菌酶变体，并通过实验验证筛选获得热稳定性显著提高以及具有良好pH稳定性和储存稳定性的溶葡萄球菌酶变体，因此具有良好的实际应用之价值。
一种葡萄球菌变体及其制备方法应用

[发明专利]基于血红素生物传感器的生长偶联的高通量筛选方法及其在多基因代谢途径优化中的应用-CN202211336059.9在审
发明人：王倩;张健;祁庆生;崔志勇;王琦 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-10-28 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明属于合成生物学及微生物代谢工程技术领域，具体涉及基于血红素生物传感器的生长偶联的高通量筛选方法及其在多基因代谢途径优化中的应用。本发明通过建立血红素途径文库并建立高效可行的基于血红素传感器的高通量筛选方法，从而快速平衡血红素代谢通路，同时，构建了血红素合成关键酶原卟啉亚铁螯合酶突变体文库，筛选获得高酶活的理想变体，改善了菌体生长和生产性能，为其他代谢产物的代谢通路平衡及高通量筛选提供理论参考，因此具有良好的实际应用之价值。
基于血红素生物传感器生长通量筛选方法及其多基因代谢途径优化中的应用

[发明专利]一株高产β-胡萝卜素的解脂耶氏酵母及其应用-CN202110075231.9有效
发明人： 祁庆生;侯进;刘萌萌;张瑾 -专利权人：山东大学
申请日： 2021-01-20 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明具体涉及一株高产β‑胡萝卜素的解脂耶氏酵母及其应用。所述菌株能够利用普通碳源和氮源，经高密度培养后，β‑胡萝卜素产量达到7.8g/L，含量达到161mg/g DCW，是高产β‑胡萝卜素的优良菌株。该工程菌株以将CarRP和CarB基因定点整合至zeta位点的低产β‑胡萝卜素解脂耶氏酵母菌株T1为出发菌，将内源关键酶HMGs、HMGCR、ERG20、GGS1、ERG8、ERG12、ERG19及IDI进行多轮随机整合，并引入外源GGPP合成酶GPS(可将IPP和DMAPP直接催化成GGPP)和血红蛋白VHb，最后对降低脂质体降解的关键基因AAL8进行敲除得到该高产菌株。作为一种β‑胡萝卜素生产工程菌，在食品、饲料、医药及化妆品领域具有良好的应用前景。
高产胡萝卜素解脂耶氏酵母及其应用

[发明专利]具有线粒体定位还原TCA途径的高产琥珀酸酵母工程菌株及其构建方法和应用-CN202210395975.3在审
发明人： 祁庆生;崔志勇;侯进;钟驭涛;邓敬宇 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-04-15 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供一种具有线粒体定位还原TCA途径的高产琥珀酸酵母工程菌株及其构建方法和应用，属于微生物及发酵工程技术领域。本发明是在酵母细胞中将琥珀酸生物合成途径的相关酶类超表达并定位至线粒体基质，有助于还原TCA途径在真核微生物中的功能表达。所述菌株能够利用普通碳源和氮源，经分批补料发酵培养后，琥珀酸产量达到50.1g/L，转化率达到0.75g/g葡萄糖。作为一种高效生产琥珀酸的优良菌株，在食品、化工及可降解材料等领域具有良好的应用前景。
具有线粒体定位还原 tca 途径高产琥珀酸酵母工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种利用解脂耶氏酵母途径定位合成萜类化合物的方法-CN201910384517.8有效
发明人： 祁庆生;侯进;蒋新;崔志勇;郑会会 -专利权人：山东大学
申请日： 2019-05-09 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： C12P7/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用解脂耶氏酵母途径定位合成萜类化合物的方法，是在解脂耶氏酵母中将甲羟戊酸合成途径的乙酰辅酶A硫解酶、HMG‑CoA合成酶和HMG‑CoA还原酶超表达并定位至过氧化物酶体，获得工程菌MP1；在工程菌株MP1的基础上，表达α‑法呢烯合成途径，获得工程菌FP1；或表达β‑胡萝卜素合成途径，获得工程菌CP1；或表达芳樟醇合成途径，获得工程菌LP1；使菌株FP1、CP1或LP1能够利用含脂肪酸或油脂的培养基在好氧条件下实现合成萜类化合物，比利用传统方法合成萜类化合物的产率更高。本发明方法可以利用脂肪酸、油脂和廉价的厨余用油来生产甲羟戊酸下游萜类化合物，具有可观的应用前景和经济价值。
一种利用解脂耶氏酵母途径定位合成化合物方法

[发明专利]一种噬菌体酶辅助的体内DNA片段组装方法、试剂盒及其应用-CN202111601141.5在审
发明人： 祁庆生;庞庆霄;苏田源 -专利权人：山东大学
申请日： 2021-12-24 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明提供一种噬菌体酶辅助的体内DNA片段组装方法、试剂盒及其应用，属于合成生物学技术领域。本发明通过组合表达噬菌体衍生的DNA外切核酸酶和DNA连接酶，报告了一种有效的体内DNA组装方法。在测试了来自不同噬菌体的各种DNA外切酶和连接酶后，最终确定T5DNA外切酶与T4DNA连接酶组合在所有组合中具有最佳的体内DNA组装效率。该方法不仅能够在大肠杆菌细胞中组装短至5bp的同源序列的DNA片段，还可以用于其他细菌，如假单胞菌、乳杆菌、产碱杆菌，甚至是低效同源重组的解脂耶氏酵母，同时，本发明还提供了用于上述方法的试剂盒，具有可观的应用价值和前景。
一种噬菌体辅助体内 dna 片段组装方法试剂盒及其应用

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