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[发明专利]体外诱导人多能干细胞分化为γ-氨基丁酸能神经元的方法及试剂盒-CN202310690997.7在审
发明人：李时畅;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2023-06-12 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：本公开涉及体外诱导人多能干细胞分化为γ‑氨基丁酸能神经元的方法及试剂盒，属于发育生物学与细胞生物学技术领域。该方法包括：神经上皮细胞诱导阶段：诱导人多能干细胞分化为神经上皮细胞，使用第一信号通路调控剂以及白藜芦醇促进神经上皮细胞分化；γ‑氨基丁酸能神经前体细胞诱导阶段：诱导神经上皮细胞分化为γ‑氨基丁酸能神经前体细胞，使用Hedgehog信号通路激动剂促进γ‑氨基丁酸能神经前体细胞分化；γ‑氨基丁酸能神经元分化阶段：诱导γ‑氨基丁酸能神经前体细胞分化为γ‑氨基丁酸能神经元，使用环磷酸腺苷信号通路激动剂促进γ‑氨基丁酸能神经元的分化成熟。本公开的方法克服了拟胚体‑神经球分化方法的技术门槛，并提高了诱导分化效率。
体外诱导多能干细胞化为氨基丁酸神经元方法试剂盒

[发明专利]基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒-CN202310096480.5在审
发明人：杨珺涵;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2023-01-19 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N5/0793 文献下载
摘要：一种基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒，该方法包括：使用包含小分子制剂的第一培养基诱导人诱导多能干细胞分化至神经外胚层阶段细胞；使用包含Hedgehog通路激活剂的第二培养基诱导神经外胚层细胞分化至内侧神经节隆起细胞；使用包含中药成分的第三培养基诱导内侧神经节隆起细胞分化至成熟的胆碱能神经元，其中中药成分包括虎杖苷、芍药苷、红景天苷和二苯乙烯苷。本发明的该方法在切实可行的基础上具有高效、低成本等特点，从细胞形态和标志基因的表达上可以确定本发明定向、高效地分化至胆碱能神经元。从而为基于各种胆碱能神经元的研究提供更方便、快捷有效的细胞来源方案。
基于中药成分胆碱能神经元分化方法试剂盒

[发明专利]生物素连全氟羧酸类化合物及制备方法-CN202211539528.7在审
发明人：赵苗苗;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-03-31 - 主分类号： C07D495/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种生物素连全氟羧酸类化合物及制备方法，该生物素连全氟羧酸类化合物具有如下式(1)所示结构：式(1)。本发明将生物素、二胺以及全氟羧酸类化合物混合，于溶剂中进行搅拌反应，并在反应结束后对其进行提纯，得到生物素连全氟羧酸类化合物，实现了全氟羧酸类污染物的高效生物素标记，为全氟羧酸类持久性环境环境污染物的直接作用靶点的研究提供了新的方法。
生物素连全氟羧酸化合物制备方法

[发明专利]生物素标记的全氟磺酸类化合物及制备方法-CN202211539535.7在审
发明人：赵苗苗;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-03-10 - 主分类号： C07D495/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种生物素标记的全氟磺酸类化合物及制备方法，该生物素标记的全氟磺酸类化合物，具有如式(1)所示结构：其中，X为C2～C20烷基醚；R为以下结构式中的任一种：该生物素标记的全氟磺酸类化合物能够用于基于生物素—亲和素系统对全氟磺酸类化合物的特异性结合蛋白靶点进行识别并提取，为此类环境污染物的直接靶点和关键分子事件研究提供新的方法。
生物素标记全氟磺酸类化合物制备方法

[发明专利]化合物下拉靶点蛋白的方法-CN202211539527.2在审
发明人：赵苗苗;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2022-12-02 - 公布日： 2023-03-07 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明提供了一种化合物下拉靶点蛋白的方法，包括利用裂解液处理细胞得到细胞总蛋白，其中裂解液包括蛋白酶抑制剂；利用蛋白G/A磁珠对细胞总蛋白进行预处理，得到待测细胞总蛋白，以去除细胞总蛋白中非特异结合的蛋白；在含有牛血清蛋白的下拉缓冲液中利用生物素标记化合物对亲和素磁珠进行预处理，得到结合有生物素标记化合物的亲和素磁珠体；将预处理后得到的亲和素磁珠体加至待测细胞总蛋白中进行孵育处理，得到捕获有特异性靶点蛋白的亲和素磁珠体；利用生物素或未被生物素标记的化合物对孵育处理后得到的亲和素磁珠体进行处理，得到目标下拉靶点蛋白。
化合物下拉蛋白方法

[发明专利]体外诱导人多能干细胞分化为多巴胺能神经元的方法-CN202211209331.7在审
发明人：李时畅;杨仁君;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供了一种体外诱导人多能干细胞分化为多巴胺能神经元的方法，包括：中脑腹侧神经前体诱导阶段：诱导人多能干细胞分化为中脑腹侧神经前体细胞，其中使用多种小分子通路调控剂以及白藜芦醇促进中脑腹侧神经前体分化；多巴胺能神经元分化阶段：诱导中脑腹侧神经前体细胞分化为多巴胺能神经元，其中利用香胶甾酮促进多巴胺能神经元的分化成熟。本发明还提供了体外诱导人多能干细胞分化为多巴胺能神经元的试剂盒。
体外诱导多能干细胞化为多巴胺神经元方法

[发明专利]诱导人多能干细胞分化为肺泡细胞或肺泡类器官的培养基及方法-CN202110598378.6有效
发明人：杨仁君;刘抒羽;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了诱导人多能干细胞分化为肺泡细胞或肺泡类器官的培养基及方法，具体涉及使用小分子激活剂/抑制剂诱导人多能干细胞分化为肺前体细胞或肺泡细胞的培养基及方法。本发明诱导分化而来的细胞表达典型的肺前体细胞和肺泡细胞生物标志物，其中三维人肺泡类器官具有肺泡样泡状结构，可以作为毒理学研究、药物筛选和肺部疾病研究的材料。
诱导多能干细胞化为肺泡细胞器官培养基方法

[发明专利]一种肝脏类器官模型及其建立方法和应用-CN201910519244.3有效
发明人：梁小星;费凡;殷诺雅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2019-06-14 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：一种肝脏类器官模型及其建立方法和应用，所述方法包括以下步骤：(1)对胚胎干细胞进行支持培养；(2)制备细胞球，并依次经过中内胚阶段、肝脏诱导阶段和成熟阶段进行分化培养，得到包含肝细胞、胆管细胞和内皮细胞的不同类型细胞，不同类型细胞有序排列组合构成肝脏类器官。本发明可通过控制不同分化阶段的化合物暴露时间，进行化合物对肝脏毒性效应与肝脏早期发育影响的筛选与评价。同时，本发明可在短时间高通量进行单一或多种化合物的肝脏发育影响与肝脏毒性效应评价，且评价指标简单、直观、多样化，可对许多新合成化合物进行快速初筛，为后续化合物改造、药理学与毒理学机制研究或投入市场使用建立基础。
一种肝脏器官模型及其建立方法应用

[发明专利]检测化合物的肺毒性的方法-CN202110598316.5在审
发明人：杨仁君;刘抒羽;殷诺雅;费凡 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2021-09-03 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测化合物对人体肺毒性的方法，所述毒性检测方法使用人多能干细胞肺分化模型，模拟人体内真实情况，能够高效、准确地评估化合物对人肺的毒性。该方法可以作为评估PM2.5之类环境污染物肺毒性的有效手段，也可以用于临床前药物的肺毒性评估，降低临床实验失败的风险。
检测化合物毒性方法

[发明专利]一种筛选和/或评价物质的方法及其应用-CN201910310805.9有效
发明人：梁小星;费凡;殷诺雅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2020-06-23 - 主分类号： C12N5/0735 文献下载
摘要：一种筛选和/或评价化合物的方法及其应用，所述方法包括以下步骤：(1)对胚胎干细胞进行支持培养；(2)制备细胞球，并在含有待测化合物的分化培养基中进行分化培养得到包含内、中、外三个胚层细胞的腔状拟胚体；(3)通过分析胚胎发育的指标筛选和/或评价所述化合物。本发明可同时进行多种化合物单一或联合暴露的胚胎发育影响的评价，评价指标简单、直观，可对许多新型化合物、新型药物、污染物进行快速的初筛，为后续药理学、毒理学机理提供明确研究方向，且本发明所需供试品用量少，实验周期灵活。
一种筛选评价物质方法及其应用

[实用新型]一种微孔模具-CN201821538823.X有效
发明人：梁小星;费凡;殷诺雅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2019-05-31 - 主分类号： B29C33/38 文献下载
摘要：一种微孔模具，所述微孔模具包括底板、手持棒和拉环，其中所述底板的下表面有整齐排列的多个凸起结构，在所述底板的上表面具有竖直的手持棒和拉环，所述手持棒和所述拉环与所述底板紧密连接。本实用新型的微孔模具具有耐磨损不开裂，使用寿命长；无毒无味，对细胞无任何影响；可进行高温高压灭菌，方便反复使用；成本相对低；生物实验重复性好的优点。
底板微孔模具手持棒拉环高温高压灭菌本实用新型紧密连接生物实验使用寿命凸起结构整齐排列耐磨损上表面下表面竖直无毒细胞

[发明专利]微孔模具及其制备方法和应用-CN201811096910.9在审
发明人：梁小星;费凡;殷诺雅 -专利权人：中国科学院生态环境研究中心
申请日： 2018-09-19 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： B29C33/38 文献下载
摘要：一种微孔模具及其制备方法和应用，所述微孔模具包括底板、手持棒和拉环，其中所述底板的下表面有整齐排列的多个凸起结构，在所述底板的上表面具有竖直的手持棒和拉环，所述手持棒和所述拉环与所述底板紧密连接。本发明的微孔模具具有耐磨损不开裂，使用寿命长；无毒无味，对细胞无任何影响；可进行高温高压灭菌，方便反复使用；成本相对低；生物实验重复性好的优点。
底板微孔模具手持棒拉环制备方法和应用高温高压灭菌紧密连接生物实验使用寿命凸起结构整齐排列耐磨损上表面下表面竖直无毒细胞

[发明专利]一种用于栓塞治疗和止痛的药物组合物及其制备方法-CN200910259208.4有效
发明人：范田园;殷诺雅;袁惠燕 -专利权人：北京大学
申请日： 2009-12-16 - 公布日： 2010-06-02 - 主分类号： A61K47/48 文献下载
摘要：本发明提供一种用于栓塞治疗和止痛的药物组合物及其制备方法，该药物组合物包括含有羟基的生物相容性高分子化合物与含有不饱和双键和阴离子基团的单体，以及任选的乙烯基单体通过自由基引发的聚合反应而生成的聚合物，含氨基基团局麻药结合到生成的聚合物的阴离子基团上。本发明将盐酸利多卡因结合到聚合物载体上，可以在栓塞治疗中充分发挥局麻药所具有的止痛功效。聚合物的阴离子部分能够与含氨基基团的局麻药适当地结合，既可以实现较高的载药量，又可以使栓塞剂中的药物被体内的阳离子所交换，从而缓慢地释放。此外，该聚合物栓塞载体制备工艺简单，成本低，适合大规模的工业化生产。
一种用于栓塞治疗止痛药物组合及其制备方法

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