本发明公开了一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法,包括多重PCR引物,所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物为SEQ ID N081~SEQ ID N0112序列组成的上游引物组;所述下游引物为SEQ ID N0114核苷酸序列组成的;检测方法包括以下步骤S1,提取人外周血单个核细胞获得总RNA;S2,将获得的RNA采用一步RT‑PCR的方法,进行多重PCR反应,获得多重PCR产物;S3,多重PCR反应结束后,磁珠纯化PCR产物,除去多余的引物;S4,在纯化后的多重PCR产物的3’末端添加碱基A,获得具有3’粘性末端A的PCR产物;S5,将具有3’粘性末端A的PCR产物与接头序列相连,获得含接头的连接产物。本发明提供了一种T细胞白血病微小残留病检测方法,提高了检测效率,适合推广。