本发明公开了一种用于靶向肿瘤细胞的多肽偶联物及其制备方法与应用。所述多肽偶联物包括靶向肿瘤细胞的插入肽、偶联剂以及CD19多肽；其中，所述插入肽通过所述偶联剂与所述CD19多肽连接；所述插入肽选自如下(a1)或(a2)：(a1)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述的多肽；(a2)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且为具有靶向肿瘤细胞功能由(a1)衍生的多肽。本发明利用了原本影响肿瘤的发展和治疗效果的肿瘤低氧和酸化特征，令其成为治疗的靶向条件，能够将目标分子特异性的插入到肿瘤微环境的细胞中，给肿瘤带有特异性的标志，为靶向杀伤和治疗提供靶点，从而吸引免疫细胞靶向攻击和杀伤。
本发明公开了一种靶向肿瘤的酸性敏感纳米肽段及其应用。所述靶向肿瘤的酸性敏感纳米肽段包括顺序串联的低pH纳米插入肽、偶联剂、以及Fc片段；其中，所述低pH纳米插入肽包括序列为SEQ ID NO.1的氨基酸序列或其变体。该靶向肿瘤的酸性敏感纳米肽段利用肿瘤微环境pH7微酸环境的特点，给微环境中的肿瘤细胞以及其他基质细胞插入特异性的标记，可以吸引并结合到NK细胞的CD16分子上，由该标记特异性招募激活NK细胞的ADCC功能，达到对肿瘤细胞的杀伤功能。
本发明公开了一种信号肽优化靶向CD19的嵌合抗原受体、表达该嵌合抗原受体的T细胞及制备方法和应用，所述信号肽优化靶向CD19的嵌合抗原受体包含顺序串联的跨膜蛋白信号肽、抗CD19抗体单链可变区、CD8蛋白分子的铰链区、跨膜区、4‑1BB共刺激结构域与CD3ζ胞内信号传导结构域，其中，所述跨膜蛋白信号肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示，该嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID No.11或SEQ ID No.12或SEQ ID No.13所示，该靶向CD19的嵌合抗原受体在T细胞中更加高效、稳定表达，以更好地发挥对靶细胞的杀伤作用。
