本发明涉及一种人STAT3基因SiRNA慢病毒载体,包括:一段核苷酸序列和慢病毒载体pLenti6.3/V5-DEST,该核苷酸序列含有针对人STAT3基因mRNA序列的干扰靶序列SiRNA,该人STAT3基因mRNA序列的Gene bank登录号为NM_139276;该干扰靶序列SiRNA选自:SEQ ID NO:1,SEQ IDNO:2,SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4。该慢病毒载体在靶细胞内时表达人STAT3基因siRNA分子的正义链与反义链,使人STAT3mRNA发生特异性降解,导致其表达沉默,提供一种体内敲除STAT3基因表达的有效方式,为治疗肿瘤开辟了新的途径。