本发明公开了一种乙醇脱氢酶突变体及其编码基因和应用。一种高活性的乙醇脱氢酶突变体基因,编码序列为SEQ ID NO.2,氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。一种将该基因导入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)获得含有该基因的工程菌株,包括该基因制备方法以及发酵培养、收集方法,实现乙醇脱氢酶突变体的制备。本发明提供一种催化活性高、pH及热稳定性、耐受性较好的乙醇脱氢酶突变体,可用于辅酶NADH以及NADPH的再生。
本发明公开了一种重组转氨酶及其制备方法与应用。一种高活性的重组转氨酶突变体,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码基因如SEQ ID NO.1所示。一种制备所述的重组转氨酶的方法,包括发酵培养含有上述编码基因的基因工程菌,以及收集和制备重组转氨酶。本发明所述的重组转氨酶应用于不对称合成手性胺类化合物,特别是用于合成西他列汀及其中间体(R)‑3‑氨基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑丁酸甲酯。本发明所涉及的酶具有优良的立体选择性、区域选择性和催化活力,且其催化的反应温和,反应转化率和产物的产量高,具有较好的应用前景。
本发明公开了一种重组转氨酶及其制备方法和应用。一种高活性的重组转氨酶突变体,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,编码基因如SEQ ID NO.1所示。一种制备所述的重组转氨酶的方法,包括发酵培养含有上述编码基因的基因工程菌,以及收集和制备重组转氨酶。本发明所述的重组转氨酶应用于不对称合成手性胺类化合物,特别是用于合成西他列汀中间体(R)‑3‑氨基‑4‑(2,4,5‑三氟苯基)‑丁酸甲酯。本发明所涉及的酶具有优良的立体选择性、区域选择性和催化活力,且其催化的反应温和,反应转化率和产物的产量高,具有较好的应用前景。