本发明涉及病毒分子生物学检测技术领域,具体提供一种用于检测猴痘病毒的引物、荧光冻干微芯片、试剂盒及方法。本发明所提供引物的序列如SEQ ID NO.1~9所示。本发明通过大量实验验证,本发明的引物探针、试剂盒、检测方法比常规方法准确性更高、特异性优良,同时最低检出限可达1copies/μL,说明敏感性较高,同时对猴痘病毒进行检测的批内变异系数在0.29%~0.92%之间,批间变异系数在0.36%~1.01%之间,说明重复性良好。
本发明涉及一种pRBE-HCR-hAAT-hFIXml质粒及其构建和应用,该质粒的序列如SEQ ID NO.17所示,其含有hAAT启动子、RBE元件和HCR调控元件。该质粒和rep表达质粒共高压注射哺乳动物体内可用于外源基因定点整合于人类19号染色体上的AAVS1特定位点以表达人类凝血因子IX。使用该表达质粒可以稳定表达人类凝血因子IX,且加大了整合系统在肝中的整合效率,从而实现更高的表达量和更长的表达时间。